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山羊胎儿神经系统发育中NGF及受体TrKA的表达

作　者: 卿素珠
导　师: 张涌
学　校: 西北农林科技大学
专　业: 临床兽医学
关键词: NGF TrKA 中枢神经系统脉络丛脊神经节胎儿发育山羊
分类号: S827.2
类　型: 博士论文
年　份: 2003年
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内容摘要

运用免疫组织化学超敏SP法对山羊胎儿脑、脊髓、脑室脉络丛及外周脊神经节发育过程中NGF及其高亲和力受体TrKA的表达及其功能意义进行了系统研究和探讨，并对山羊脑室脉络丛及外周脊神经节的组织发生进行了详细观察。主要实验结果如下： 1．山羊胎儿脊髓灰质中存在NGF及其受体TrKA，于E6W就可检测到，随胚龄增加，其表达范围及免疫反应着色程度逐渐加大。NGF主要分布于腹角和背角的神经细胞，反应产物主要定位于胞质和突起；TrKA的分布主要以腹角及胶状质为主，反应产物主要定位于胞核，后期胞质及突起也可见到阳性反应。在山羊胎儿脊髓白质中也可观察到NGF及TrKA免疫阳性反应，尤其是在发育后期更为显著，阳性反应主要分布于神经胶质细胞核、神经纤维的轴索及雪旺氏细胞。结果提示NGF不仅对交感和感觉神经元的发育起作用，而且还与腹角运动神经元的发育有关。 2．NGF及其受体TrKA广泛存在于山羊胎儿脑干各部。在延髓，NGF及TrKA的表达始于E6W，以后随胚龄增加，表达范围及强度逐渐增大；脑桥灰质发育过程中，在三叉神经运动主核、外展神经核、脑桥核等核团存在NGF及TrKA免疫阳性反应，NGF及TrKA在延髓和脑桥灰质核团的表达规律与其生长发育规律相符。中脑灰质核团形成和发育过程中也存在NGF及TrKA的表达，始于E6W，而后随胚胎发育进程在主要灰质核团均有表达，且强度也逐渐加大；TrKA较强表达出现于E14W后。从反应产物的定位看，NGF反应产物主要定位于神经元的胞质和突起，TrKA前期以胞核表达为特点，后期则主要在胞质和胞膜。山羊脑干发育中NGF及TrKA的存在提示NGF在脑干灰质核团神经元的分化、增殖、发育及成熟过程发挥作用。 3．山羊胎儿小脑存在NGF及其受体TrKA。随胚胎发育进程，NGF在小脑皮质和髓质中的分布及染色强度逐渐增大，特别是E15W后，极广泛地分布于皮质和髓质；随着E14W蒲肯野细胞层的明显形成，蒲肯野细胞开始表达NGF，而且强度越来越大，并一直维持至出生前(E21w)：受体TrKA在小脑中的分布相对较弱，随着蒲肯野氏层出现，在蒲肯野细胞中也一直有表达，但染色强度变化不明显。小脑中内源性NGF及受体TrKA的存在提示NGF在小脑的生长发育中发挥着重要的营养调节功能。 4．在山羊间脑发育过程中存在内源性NGF及其受体TrKA，它们在间脑各灰质核团出现的时间较晚。NGF主要分布于上丘脑缰核、丘脑及下丘脑的主要核团及内、外侧膝状体，阳性反应大多于E11W出现，随胚胎发育进程，阳性细胞密度逐渐降低、而胞体直径逐渐增大；TrKA阳性反应产物则出现较晚，局部核团内TrKA免疫阳性反应约在E12W后陆续出现，且反应强度较弱，TrKA局限性分布一直持续到E18W前，而后其分布范围及着色程度逐渐增大。阳性反应产物的分布均以胞核为主，在发育后期胞质和突起中可见到。间脑第三脑室室管膜上皮也可表达NGF及其受体肠KA，且有随室管膜上皮的层次变薄呈现出表达渐弱的趋势，阳性反应产物定位于胞质和胞核。内源性NGF及肠KA在间脑中的规律性表达提示NGF与间脑部分灰质核团中神经元的分化、发育及成熟有关。 5.山羊大脑皮质发育过程中存在内源性NGF及肠KA。于E6W即有表达，随胚胎发育进程中新皮质和海马皮质的逐步发育，NGF的分布范围及表达强度均越来越大;肠KA在大脑皮质发育过程中的表达与NGF有一致性，着色强度上较NGF弱。E14W后，NGF主要在锥体细胞中表达，反应产物亚细胞定位于胞质和突起;肠KA阳性反应主要定位于胞核。至出生前，NGF及肠KA的分布范围及着色强度均达到最大。结果提示NGF可在两个皮质区就地合成，它与大脑皮质的发育及生理功能的维持有关。 6.山羊胎儿脑室脉络丛上皮，最初是由脑泡上皮凸出形成简单的褶所构成，而后形成复杂的分支;上皮由假复层柱状向单层柱状过渡，最后变为单层立方上皮;上皮细胞形态由柱状变为立方、个体逐渐变小:在发育各时期上皮顶端均可见到嗜酸性的刷状缘。在各发育阶段的脑室脉络丛上皮存在免疫反应性的NGF及其受体肠KA，且随胎龄增加表达逐渐增强。反应产物的亚细胞定位略有不同，NGF主要定位于胞核，尤以核膜着色更甚;肠KA则主要定位于核膜。脉络丛上皮内源性NGF的功能可能涉及两方面，一是对脑室脉络丛上皮细胞的发育成熟起营养作用;另一方面分泌产物通过脑脊液循环对脑的发育发挥调节作用。 7.山羊胎儿脊神经节于E6w就已经形成，但此时节内神经元形态不清晰，至Esw，节内神经元形态逐渐清晰，节内神经纤维数量少;随胚胎发育，节内神经元数量并不显著增加，而是节细胞之间神经纤维及胶质细胞的增多和神经元个体的增长，从而使神经节的体积逐渐增大。节内神经元既可分为形态和着色不同的明暗两类，也可分为胞径不同的大、中、小三类。山羊胎儿脊神经节内存在NGF及其受体肠KA，随着胚胎发育，NGF主要分布于节内各类神经元的胞质中，特别是在E14w后;肠KA阳性反应则在EIOw后才出现，主要分布于中、小神经元的胞质和胞核，而大神经元未能见到阳性反应，但在大神经元周围的卫星细胞可观察到肠KA强阳性反应产物。上述结果说明NGF对外周神经峭

全文目录

第一章脊椎动物神经系统的发生和发育  15-43
  1.1 中枢神经系统发生概述  15-23
    1.1.1 神经系统的起源  15
    1.1.2 神经系统发育分化的基本规律和模式  15-16
    1.1.3 神经系统的早期发育  16-17
    1.1.4 中枢神经系统发育的形态学研究概况  17-23
  1.2 外周神经系统发生  23-28
    1.2.1 概述  23-24
    1.2.2 神经嵴的发育和分化  24-28
  1.3 与神经系统发育有关的特异性蛋白质  28-32
    1.3.1 发展概况  29
    1.3.2 与神经生长相关的蛋白质  29-32
  1.4 神经生长因子及其受体与神经系统发育  32-43
    1.4.1 神经生长因子的分子结构  33-34
    1.4.2 中枢神经系统中的NGF  34-36
    1.4.3 外周神经系统中的NGF  36-37
    1.4.4 神经生长因子受体  37-40
    1.4.5 NGF及其受体在神经系统中的作用  40-43
第二章神经生长因子及其受体TrKA在山羊脊髓发育中的表达特点  43-55
  2.1 材料与方法  43-44
    2.1.1 主要试剂与仪器  43-44
    2.1.2 实验材料与实验方法  44
  2.2 结果  44-47
    2.2.1 山羊脊髓发育中NGF的表达  44-45
    2.2.2 山羊脊髓发育过程中TrKA的表达  45-46
    2.2.3 山羊脊髓腹角神经元NGF和TrKA表达的定量分析  46-47
    2.2.4 山羊脊髓发育过程中NGF和TrKA的表达规律  47
  2.3 讨论  47-49
    2.3.1 NGF及其受体TrKA在山羊脊髓早期发育中的表达特点  47-48
    2.3.2 山羊脊髓发育过程中NGF及其受体表达的功能意义  48-49
  2.4 小结  49
  2.5 图版  49-55
第三章山羊脑干发育过程中NGF及其受体TrKA的表达  55-68
  3.1 材料与方法  55-56
    3.1.1 主要试剂与仪器  55
    3.1.2 实验材料与实验方法  55-56
  3.2 结果  56-58
    3.2.1 山羊延髓灰质发育中NGF及TrKA的表达  56-57
    3.2.2 脑桥灰质发育中NGF及TrKA的表达  57
    3.2.3 山羊中脑灰质发育过程中NGF及TrKA的表达  57-58
  3.3 讨论  58-59
    3.3.1 延髓灰质核团发育过程中NGF及TrKA表达的功能意义  58
    3.3.2 脑桥灰质核团发育过程中NGF及TrKA表达的功能意义  58-59
    3.3.3 山羊中脑灰质核团发育过程中NGF及TrKA表达的功能意义  59
  3.4 小结  59-60
  3.5 图版  60-68
第四章山羊小脑生长发育过程中NGF及其受体TrKA的表达特点  68-76
  4.1 材料与方法  68-69
    4.1.1 主要试剂与仪器  68
    4.1.2 实验材料与实验方法  68-69
  4.2 结果  69-71
    4.2.1 山羊小脑发育过程中NGF及其受体TrKA的表达特点  69-71
    4.2.2 NGF及其受体TrKA在小脑蒲肯野细胞表达的定量分析  71
  4.3 讨论  71-72
    4.3.1 山羊小脑发育过程中NGF及其受体TrKA表达的功能意义  71-72
    4.3.2 神经胶质细胞表达NGF及受体TrKA的意义  72
    4.3.3 NGF及TrKA分布变化与小脑发育的关系  72
  4.4 小结  72-73
  4.5 图版  73-76
第五章山羊间脑发育中NGF及其受体TrKA的表达特点  76-85
  5.1 材料与方法  76-77
    5.1.1 主要试剂与仪器  76
    5.1.2 实验材料与实验方法  76-77
  5.2 结果  77-79
    5.2.1 山羊间脑发育过程中NGF及其受体TrKA的分布  77-78
    5.2.2 NGF及其受体TrKA在间脑发育中的表达规律  78-79
  5.3 讨论  79-80
    5.3.1 山羊间脑发育中NGF及TrKA表达规律及其功能意义  79
    5.3.2 室管膜上皮细胞表达NGF及TrKA的功能意义  79-80
  5.4 小结  80
  5.5 图版  80-85
第六章山羊大脑皮质生长发育过程中NGF及TrKA的表达特点  85-92
  6.1 材料与方法  85-86
    6.1.1 主要试剂与仪器  85
    6.1.2 实验材料与实验方法  85-86
  6.2 结果  86-87
    6.2.1 大脑皮质发育过程中NGF及TrKA的分布  86-87
    6.2.2 NGF及TrKA在山羊大脑皮质发育过程中的表达规律  87
  6.3 讨论  87-88
  6.4 小结  88-89
  6.5 图版  89-92
第七章 NGF及其受体TrKA在山羊胎儿脑室脉络丛的表达  92-100
  7.1 材料与方法  92
    7.1.1 主要试剂与仪器  92
    7.1.2 实验材料与实验方法  92
  7.2 结果  92-96
    7.2.1 山羊胎儿脑室脉络丛上皮发育的形态特点  93
    7.2.2 山羊胎儿脑室脉络丛上皮发育过程中NGF及TrKA的表达特点  93-94
    7.2.3 山羊胎儿脑室脉络丛上皮发育过程中NGF及TrKA表达的定量分析  94-96
  7.4 小结  96
  7.5 图版  96-100
第八章 NGF及其受体TrKA在山羊胎儿脊神经节发育过程中的表达  100-109
  8.1 材料与方法  100-101
    8.1.1 主要试剂与仪器  100
    8.1.2 实验材料与实验方法  100-101
  8.2 结果  101-103
    8.2.1 脊神经节的组织发生  101-102
    8.2.2 各时期脊神经节中NGF的分布  102
    8.2.3 各时期脊神经节中TrKA的分布  102-103
    8.2.4 各时期脊神经节内神经元中NGF及TrKA的半定量分析  103
  8.3 讨论  103-105
    8.3.1 山羊胎儿脊神经节发育的形态学特点  103-104
    8.3.2 NGF及其受体TrKA在山羊胎儿脊神经节中表达的功能意义  104
    8.3.3 脊神经节卫星细胞表达NGF及其受体的功能意义  104-105
  8.4 小结  105
  8.5 图版  105-109
结论  109-111
参考文献  111-132
致谢  132-133
个人简介  133

山羊胎儿神经系统发育中NGF及受体TrKA的表达

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