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表皮细胞生长因子对烟雾吸入性损伤大鼠肺泡上皮Ⅱ型细胞形态和功能的影响

作 者: 柳琪林
导 师: 盛志勇
学 校: 中国人民解放军军医进修学院
专 业: 外科学
关键词: 肺泡Ⅱ型上皮细胞 表皮细胞生长因子 肺泡液体清除率 肺表面活性物质 Na+-K+-ATP酶 表面活性物质相关蛋白A
分类号: R602
类 型: 博士论文
年 份: 2003年
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内容摘要


观察烟雾吸入性损伤后大鼠肺泡上皮Ⅱ型细胞(alveolar epithelial type Ⅱ cell,AT Ⅱ)形态和功能的改变,研究经气管滴入表皮细胞生长因子(epidermal growth factor,EGF)对肺泡主动修复、肺水转运的影响,并通过体外实验进一步阐明EGF上调ATⅡ功能的机制。 方法:研究分为5个部分:首先对大鼠烟雾吸入性损伤模型制作方法进行改良,通过严格控制发烟条件和致伤程序,制作出稳定高效的动物模型;第二部分采用经气管滴入EGF的方法,观察正常和烟雾吸入性损伤大鼠ATⅡ增殖和合成功能的改变:64只SpragueDawley大鼠(160~180g)随机分为四组:Ⅰ组(n=4)为正常对照;Ⅱ组(n=20);单纯EGF给药;Ⅲ组(n=20);单纯吸入性损伤;Ⅳ组(n=20);吸入性损伤+EGF给药。Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组各分为24h、48h、72h、120h和168h五个亚组(n=4)。Ⅱ组和Ⅳ组大鼠用特殊针头经气管滴入EGF(100μg/kg)。在各时间点活杀大鼠,进行肺组织的病理形态学检查,并进行抗Br-dU和抗SP-A免疫组化染色,观察ATⅡ增殖和合成能力的变化;第三部分采用125Ⅰ标记白蛋白溶液进行肺灌注,检测各组大鼠(分组方法同第二部分,每个时间点6只,共96只)1h肺泡液体清除率(alveolar liquid clearance,ALC);我们在第四部分的实验中改良了大鼠ATⅡ体外培养方法;第五部分的研究内容是采用RT-PCR方法观察体外不同浓度EGF对ATⅡNa+K+ATP酶α1亚基和SP-A mRNA表达的影响。 结果:本研究采用的改良大鼠烟雾吸入性损伤模型致伤效果稳定。 中文钓县 伤后24h、48h、72h肺水量、血浆MDA明显升高。外源性EGF能 够促进正常和吸入性损伤大鼠AT H增殖,增加SP-A表达,促进损 伤肺组织的主动修复。正常大鼠lh ALC为p2.O7 t 3.6刀%,经气管 滴入砒F后MC显著升高,48h、72h和12Oh分另11增力。到[(43.37 士门*4)巩(P<OO1);(41.75土7*2)%,(P<0*1)Z(35.86士4*9)%, (叼.05)上 168h后恢复正常水平。&入性损伤后 ALC在 24h下降 了36.7O,其他时间点ALC也有不同程度减少,到伤后120h才能 恢复。而吸入性损伤大鼠经气管滴注EGF后,伤后 48h的 ALC即 恢复到正常水平。体外研究结果显示,EGF可以上调 AT 11 SP-A m叫A表达,但是对 N计K“-ATP酶al亚基 m洲A表达没有明显影 响。 结论:烟雾吸入性损伤可以导致AT H功能受损,AL C下降,SP-A 合成分泌减少。外源性 EGF能促进烟雾吸入性损伤大鼠 AT 11增殖, 提高SP-A表达,加强肺水转运,从而加速损伤肺泡的主动修复过 程。肺水肿清除能力增强的主要原因是 EGF促进 AT 11增殖,上调 SP人 m删的表达,但是N才K”-ATP酶a1亚基在m叫A水平表 达量的变化可能不是ALC升高9主要因素。

全文目录


英文缩写一览表  4-5
中文摘要  5-7
英文摘要  7-9
论文正文  9-76
  前言  10-12
  第一部分: 大鼠烟雾吸入性损伤模型的制作  12-24
  第二部分: 经气管滴入EGF对烟雾吸入性损伤大鼠ATⅡ增殖和SP-A表达的影响  24-31
  第三部分: 经气管滴入EGF对烟雾吸入性损伤大鼠肺泡液体转运功能的影响  31-43
    第四部分: 大鼠ATⅡ的体外培养与鉴定  36-43
  第五部分: EGF对大鼠ATⅡNa~+-K~+-ATP酶α_1亚基和SP-AmRNA表达的影响  43-50
  讨论  50-57
  结论  57-58
  参考文献  58-66
  照片  66-76
综述: 肺泡上皮Ⅱ型细胞形态与功能研究进展  76-83
研究生期间发表文章  83-84
研究生期间参加学术会议  84-85
致谢  85

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中图分类: > 医药、卫生 > 外科学 > 外科病理学、解剖学
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