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雷公藤药材HPLC特征图谱研究

作　者: 朱精英
导　师: 吴春敏
学　校: 福建中医药大学
专　业: 中药学
关键词: 雷公藤雷公藤内酯醇 HPLC 特征图谱
分类号: R284
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

雷公藤系卫矛科雷公藤属植物雷公藤Tripterygium wilfordii Hook. f.多年生藤本植物,主产于福建、浙江、安徽、河南等地,传统使用雷公藤的根或去皮的木质部,现在也有使用雷公藤叶。临床上常用其治疗类风湿关节炎、肾脏疾病及皮肤病等,药理研究也表明其有抗肿瘤、抗炎等作用,但雷公藤有大毒,应用时须谨慎。雷公藤化学成分复杂,特别是有些微量成分具有很强的生物活性,主要的活性成分如雷公藤内酯醇、雷公藤红素即是有效成分也是毒性成分。雷公藤临床上治疗指数低,不良反应发生率远高于其他药物,主要发生在消化系统、泌尿系统、生殖系统、心血管系统、骨髓及血液系统。因此,为了临床应用的安全有效,亟待有效的质量控制方法。雷公藤传统以根或去皮的木质部入药,随着基础研究的深入及受资源的限制,现在也有用叶入药的。本研究以福建泰宁雷公藤GAP基地药材为主要研究对象,采用固相萃取及超高效液相色谱技术,首次建立了雷公藤根木质部、根皮、茎、叶四个部位的特征图谱。经过系统适应性和方法学考察,各个部位的特征图谱建立方法均稳定、可靠、重现性较好。研究结果表明,雷公藤根木质部、根皮、茎、叶中化学成分存在显著差异：雷公藤根皮中所含的化合物种类最多,各化合物之间的含量差异很大；雷公藤根木质部中含有的化合物比雷公藤根皮中的少,为“临床上使用去皮的雷公藤根”提供了理论支持,但是随着季节的变化,含量变化也很大,其中秋季采收的雷公藤根木质部中含有的化合物最多,同时,GAP基地生产的雷公藤根木质部比野生的化合物含量要高,提示我们要对雷公藤药材进行规范种植；在临床使用时,雷公藤茎大多都是被弃用的部位,但是本实验结果表明,雷公藤茎中含有的化合物含量虽然不高,但是随着季节的变化,含量变化不大,提示我们可以对雷公藤茎进行开发利用；雷公藤叶中雷公藤内酯醇的含量随着季节的变化,差异很大,其中秋季采收的雷公藤叶中雷公藤内酯醇的含量最高,表明雷公藤叶在秋季采收最佳,另外,雷公藤落叶中的化学成分与雷公藤植物采摘的叶中的成分种类差异不大,提示雷公藤落叶也可以进行开发利用。本论文对雷公藤中具代表性的有效成分-雷公藤内酯醇在根皮和叶中的分布进行了研究,建立了雷公藤内酯醇的HPLC测定方法,该方法操作简单,结果稳定,可作为雷公藤中雷公藤内酯醇的含量测定方法。本实验还比较了同一采收季节根皮与叶中的雷公藤内酯醇含量,并分别比较了不同采收季节采集的根皮与叶中的雷公藤内酯醇含量,结果发现在春季采收的雷公藤植株中,雷公藤叶中雷公藤内酯醇的含量比雷公藤根皮中的含量要低,而在秋季采集的药材则刚好相反,提示雷公藤叶宜在秋季采集。这一发现为雷公藤的合理种植与利用提供了基础研究数据,为扩大雷公藤的药用部位、提高其药用价值奠定了基础。以上研究结果表明,雷公藤药材及其制剂的质量控制不能只是单一控制某一个有效成分或少数几个有效成分的含量,而是应该从整体上对雷公藤药材进行质量控制,本实验将雷公藤药材分为四个部位,建立的四个部位的特征图谱能较好地反映雷公藤药材不同用药部位的质量,为雷公藤药材资源的进一步合理利用及保证临床雷公藤用药的安全、有效和可控提供了技术支持与基础研究数据。

全文目录

中文摘要  5-7
英文摘要  7-9
前言  9-16
  一、化学成分方面  9-10
  二、药理作用方面  10-11
  三、毒性研究方面  11-12
  四、质量控制研究方面  12-14
  五、展望  14-16
第一章雷公藤不同部位的特征图谱研究  16-59
  1. 仪器与试药  16
  2. 实验用对照品、药材及试药  16-18
  3. 对照品溶液和供试品溶液制备  18
  4、色谱条件的选择  18-21
  5、雷公藤根皮的特征图谱研究  21-30
    5.1 色谱条件  21-22
    5.2 方法学考察  22-25
    5.3 雷公藤根皮特征图谱及技术参数  25-29
    5.4 结果与讨论  29-30
  6、雷公藤根木质部的特征图谱研究  30-39
    6.1 色谱条件  30-31
    6.2 方法学考察  31-34
    6.3 雷公藤根木质部特征图谱及技术数  34-39
    6.4 结果与讨论  39
  7、雷公藤茎的特征图谱研究  39-49
    7.1 色谱条件  39-40
    7.2 方法学考察  40-44
    7.3 雷公藤茎特征图谱及技术参数  44-49
    7.4 结果与讨论  49
  8、雷公藤叶的特征图谱研究  49-59
    8.1 色谱条件  49-50
    8.2 方法学考察  50-53
    8.3 雷公藤茎特征图谱及技术数  53-57
    8.4 结果与讨论  57-59
第二章高效液相色谱法测定雷公藤中雷公藤内酯醇的含量  59-65
  1 仪器与试药  59
  2 方法与结果  59-64
    2.1 色谱条件  60
    2.2 对照品贮备液的制备  60-61
    2.3 供试品溶液的制备  61
    2.4 线性关系的考察  61
    2.5 精密度试验  61
    2.6 稳定性试验  61-62
    2.7 重复性试验  62
    2.8 回收率试验  62-63
    2.9 样品含量测定  63-64
  3. 结果与讨论  64-65
第三章结果与讨论  65-66
参考文献  66-69
致谢  69-70
综述  70-75
  参考文献  73-75
作者简历  75

雷公藤药材HPLC特征图谱研究

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