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大Y染色体和精子DNA损伤与人类辅助生殖结局关系的研究

作　者: 聂洪川
导　师: 卢光琇
学　校: 中南大学
专　业: 生殖工程
关键词: 大Y染色体 供精者 精子DNA碎片 体外受精胚胎移植 供精人工授精
分类号: R714.8
类　型: 博士论文
年　份: 2011年
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内容摘要


目的：大Y染色体是否会对生殖有不良影响,一直存在争议。本文第一部分通过对大Y染色体供精者和对照组大样本研究,分析其精液标本用于辅助生殖后的临床反馈信息,来全面研究大Y染色体与其妊娠结局的关系。精子染色质是遗传信息的载体,其结构的完整性对于正常受精、胚胎发育与成功妊娠非常重要,但精子的染色质结构完整性检测对临床的参考价值,目前观点不一致。本文第二部分的研究目的是通过近年来出现的精子染色质结构分析技术,来研究精子DNA损伤和辅助生殖结局的关系,从而评估精子DNA损伤对生殖的影响。方法：本研究分为两个部分。第一部分收集本院精子库从2004年1月到2008年1月间共1186名合格供精者的进行辅助生殖后的临床反馈资料,并统计分析不同组别间的妊娠结局差异。其中采用694个供精者(含53个大Y)标本行供精人工授精的治疗,492个供精者(含22个大Y)标本行供精试管婴儿的治疗。在供精人工授精部门,总共有13089个治疗周期,获得了2885个妊娠：其中大Y组经过1112个治疗周期后获得了238个妊娠,分娩210人,28个(11.8%)胚胎丢失,1个(0.47%)先天畸形；而对照组经过11977个治疗周期后获得了2647个妊娠,分娩2295人,352个(13.3%)胚胎丢失,12个(0.51%)先天畸形。在试管婴儿部门,总共经过2619个治疗周期后获得了1587例妊娠：其中大Y组经过104个周期后获得了72例妊娠,分娩69次,3例胚胎丢失(4.2%),1例(1.11%)先天畸形；而在对照组经过2515个治疗周期后获得了1647例妊娠,分娩1518次,156例(10.3%)胚胎丢失,16例(0.82%)先天畸形。第二部分第一章,在严格控制非精子因素的情况下,收集本院148对接受IVF-ET助孕治疗的夫妇的受精率、优质胚胎率、妊娠结局等信息,与其精子的常规参数、正常形态率、顶体酶活性、精子染色质结构分析、色霉素A3(CMA3,用于检测精子染色质包装质量)进行统计分析,并比较精子染色质结构分析在IVF-ET后获得妊娠与未获得妊娠患者间的差异；第二部分第二章,收集人类精子库的93名供精者精液,采用精子染色质结构分析技术测定其精子DNA碎片化水平,并统计分析精子DNA碎片化水平与供精者生育指数间的关系。结果：在第一部分,无论是AID,还是供精IVF-ET,采用大Y染色体供精者精液进行助孕后的胚胎丢失率、先天畸形率分别为与对照组统计学无差异,且供精者生育指数亦无差别,因此认为大Y染色体与不良妊娠无关。在第二部分第一章,接受IVF-ET治疗的148对夫妇其受精率与精子的DFI值、CMA3阳性率等均无关,仅与精子的密度有关；优质胚胎率与与DFI值和CMA3阳性率呈显著的负相关,与其他参数无关；在获得临床妊娠组与未获得临床妊娠组之间,其DFI值分别为11.65%士6.34%和18.24%±6.99%,P<0.01；CMA3阳性率分别为33.82%士13.07%和39.04%+16.69%,P<0.05。优质胚胎率在受孕组为66.68%+22.38%,而未受孕组为53.75%+24.95%,两组P<0.05；受精率在受孕组为65.73+21.04%,而未受孕组为51.46±26.76%,两组P<0.01。在第二部分第二章,总共有93名供精者,供精者的DFI值与其生育指数呈负相关(r=-0.324,p=0.002)。结论：大Y染色体属于正常的多态,可能与不良妊娠结局无关,由此可以在门诊遗传咨询时减轻大Y染色体携带者的思想负担,同时也可以让精子库的医生接纳大Y染色体携带者作为供精者。精子染色体结构的完整性与男性生育能力密切相关,且DFI值与IVF-ET中的优质胚胎率显著相关,因此可以在采取辅助生殖技术前检测精子的DNA损伤状况,对于异常者可尝试口服药物来治疗从而提高辅助生殖的安全性和成功率。

全文目录


摘要  4-7
ABSTRACT  7-12
中英文缩略词对照表  12-13
第一章 大Y染色体与辅助生殖妊娠结局的关系研究  13-31
  前言  13-15
  研究对象和方法  15-21
    一、研究对象  15-20
    二、研究方法  20-21
    三、统计学方法  21
  结果  21-27
    (一) 供精人工授精结局  23
    (二) 供精试管婴儿结局  23
    (三) 各组间结局的比较  23-27
  讨论  27-31
第二章 精子DNA损伤与辅助生殖结局的关系  31-62
  第一节 精子DNA损伤对体外受精-胚胎移植结局的影响  31-51
    前言  31-33
    研究对象与方法  33-41
      一 主要的仪器与试剂  33-34
      二 精液常规分析与巴氏染色  34-35
      三 精子染色体结构分析  35-39
      四 精子染色质包装质量检测(CMA3染色法)  39-40
      五 精子顶体酶的检测方法  40-41
    结果  41-46
      研究对象的一般资料  41
      体外受精与胚胎移植的基本情况  41-42
      精子参数与IVF-ET的结局之间的关系  42-46
    讨论  46-51
  第二节、供精者精子DNA损伤与供精者生育能力的关系研究  51-62
    前言  51-52
    研究对象  52-55
    精子染色体结构分析  55-58
    统计学方法  58
    结果  58-59
    讨论  59-62
附录 图表  62-65
参考文献  65-77
综述  77-102
  参考文献  91-102
致谢  102-103
攻读学位期间成果  103-104
个人简历  104

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中图分类: > 医药、卫生 > 妇产科学 > 产科学
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