学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

血管内皮生长因子B及其变位剪切体在肝细胞癌中的表达及意义

作　者: 王瞿辉
导　师: 王毅军
学　校: 天津医科大学
专　业: 外科学
关键词: 肝细胞癌血管内皮生长因子B mRNA RT-PCR
分类号: R735.7
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 16次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

肝细胞癌是临床上最常见的恶性肿瘤之一,其发病率和在肿瘤相关死亡中占据的比例均很高,严重威胁着人类的健康,因此,肝癌的防治成为肿瘤研究的重要课题。血管生成贯穿于肿瘤的发生、发展及转移的全过程,是一个复杂的多步骤过程,受多种内、外源性因子调节。HCC是典型的多血管肿瘤,丰富而又扭曲的血管是肝癌的重要特征,血管生成已经成为目前肝癌研究的热点。VEGF与肝癌血管形成密切相关,其家族包括：VEGF-A、VEGF-B、VEGF-C、VEGF-D、VEGF-E、胎盘生长因子和VEGF-F等7个成员以及各自的变位剪切体。VEGF-A被公认为是体内最强的一种血管生成促进因子,其在HCC发生发展过程中的作用及意义已经受到各国学者的关注。VEGF-B是该家族的另一成员,实验已证实其与受体VEGFR-1结合后有促进血管生成的作用,而肝细胞癌又是典型的多血管肿瘤,为研究VEGF-B及其变位剪切体在肝癌中的作用,本实验采用实时荧光定量PCR技术检测VEGF-B、及其变位剪切体VEGF-B 167及VEGF-B186 mRNA在肝细胞癌组织中的表达并研究其与临床资料的相关性。目的：探讨不同肝组织中VEGF-B及其两个变位剪切体VEGF-B167、VEGF-B186 mRNA的表达并评估其临床意义。方法：收取98例肝癌者标本：包括肝癌组织(T)98份、癌旁小于1 cm处组织(NO)21份、癌旁1 cm处组织(N1)21份、癌旁2 cm处组织(N2)98份、癌旁3 cm处组织(N3)85份；乙肝肝硬化组织32例(LC)；慢性乙型肝炎肝组织(HV)5例；正常肝组织(NL)(取自手术治疗的肝血管瘤瘤旁组织)24例。提取总RNA后逆转录cDNA,应用荧光定量PCR法检测总VEGF-B、VEGF-B167及VEGF-B186 mRNA的表达量,以管家基因GAPDH为对照,2-△△CT法计算目的基因相对表达量,与患者的临床病理资料做相关性分析,结合随访资料做生存分析,并应用COX回归模型分析影响患者预后的危险因素。结果：总VEGF-B及VEGF-B186在各组组织中的表达无统计学差异,而VEGF-B167在各组中的表达量差异有统计学意义(P=0.005),LC组最低,中位数为0.440,NL组最高,中位数为1.368；肝癌组VEGF-B 167表达水平(1.312)明显高于HV(0.526)和LC组(0.440),并且从癌旁N3到肝癌T的表达量有递增趋势。肝细胞癌组中有门静脉瘤栓组的表达量高于无门静脉瘤栓组；有瘤栓合并转移组高于有瘤栓无转移组,且VEGF-B 167 mRNA在两组中的表达量有明显差异(P=0.044)。依据VEGF-B表达高低,将肝癌患者分组,VEGF-B167低表达组患者的总体生存率较高表达组和无差异组有升高趋势(P=0.097),而VEGF-B167低表达组患者术后无瘤生存率明显高于其他两组(P=0.023)。肝癌组织中总VEGF-B、VEGF-B167及VEGF-B 186的表达与患者性别、年龄、病毒感染、肝硬化、Child-Pugh’s分级、AFP值、肿瘤数目、肿瘤大小、血管侵犯、TNM分期及肿瘤分化之间相关性无统计学意义。COX回归分析发现,Child-pugh分级(P=0.001)、肿瘤数目(P=0.020)、肿瘤直径(P<0.001)、血管侵犯(P=0.003)、TNM分期(P=0.047)、肿瘤分化(P=0.043)为影响生存时间的危险因素；而Child-pugh分级(P=0.022)、肿瘤数目(P=0.014)、肿瘤直径(P=0.006)、血管侵犯(P=0.019)、TNM分期(P=0.025)是影响无瘤生存时间的危险因素。未发现总VEGF-B、VEGF-B167、VEGF-B186是影响患者生存时间和无瘤生存时间的危险因素。结论：VEGF-B参与了肝癌的发生发展过程,VEGF-B167在此过程中的作用较VEGF-B186更重要；VEGF-B167高表达促进门静脉瘤栓形成和肿瘤转移；VEGF-B167低表达患者预后较好,术后总生存率和无瘤生存率较高。

全文目录

中文摘要  4-6
Abstract  6-8
目录  8-10
符号说明  10-11
前言  11-14
  研究现状、成果  11-13
  研究目的、方法  13-14
1 对象和方法  14-19
  1.1 临床标本  14
  1.2 临床病理资料采集  14
  1.3 实验仪器  14-15
  1.4 试剂及耗材的来源、配制  15-16
  1.5 mRNA的提取  16-17
  1.6 逆转录反应  17
  1.7 引物设计合成  17-18
  1.8 实时荧光定量PCR反应条件优化及PCR扩增反应  18
  1.9 统计学方法  18-19
2 研究结果  19-36
  2.1 总RNA的提取  19
  2.2 各基扩增结果  19-26
  2.3 VEGF-B及两个变位剪切体VEGF-B167、VEGF-B186 mRNA在各组肝组织中的表达  26-28
  2.4 VEGF-B mRNA表达水平与临床病理参数的相关性  28-31
  2.5 VEGF-B mRNA表达量与肝癌转移的关系  31
  2.6 生存期分析  31-35
  2.7 肝癌患者生存和无瘤生存预后因素分析  35-36
3 讨论  36-42
结论  42-43
参考文献  43-47
发表论文和参加科研情况说明  47-48
附录  48-55
综述肿瘤血管生成与VEGF-B  55-66
  综述参考文献  62-66
致谢  66

血管内皮生长因子B及其变位剪切体在肝细胞癌中的表达及意义

内容摘要

全文目录

相似论文