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人类β-防御素在牙髓组织中的免疫组化研究

作　者: 王丽丽
导　师: 王青
学　校: 山东大学
专　业: 口腔临床医学
关键词: 人类β-防御素成牙本质细胞牙髓牙根发育免疫组化
分类号: R781.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

防御素是植物界以及动物界广泛存在的一类内源性阳离子抗微生物多肽,具有广泛的杀菌活性、细胞毒性和免疫趋化作用。其结构富含精氨酸,并含有二硫键连接和位置保守的半胱氨酸残基。人类防御素(human defensins)根据防御素分子内半胱氨酸的位置和连接方式分为两大类α-防御素和β-防御素(HBD)两种。研究发现人类α-防御素主要分布于肠道和子宫阴道中；β-防御素多分布于皮肤、呼吸道上皮和口腔黏膜上皮等部位,作为机体的第一道免疫防线参与机体的免疫防御体系。目前发现β-防御素有多种亚型,较为人们熟悉的有四种,即HBD-1～HBD-4。最近研究发现牙髓成牙本质细胞中存在微量的HBD,这提示成牙本质细胞除了参与牙本质基质的合成外,还可能参与牙髓的免疫防御系统。目前有关HBD在人牙髓组织中表达与分布、在牙髓组织损伤修复以及牙髓发育中的作用的研究报道较少,国内亦尚未见报道。本实验采用免疫组化方法观察HBD在人牙髓中的定位和分布情况,从而进一步了解该因子在牙髓组织生理、病理状态下所起的作用。目的1、研究人类HBD-1和HBD-4在正常、深龋及炎症牙髓中的表达及其意义。2、观察在恒牙牙根发育过程中HBD-1和HBD-4在牙髓中的表达和分布情况,探讨HBD-1和HBD-4在恒牙牙根发育过程中的意义。方法1.采用SP免疫组化染色法,对正常、深龋及牙髓炎各组牙髓组织中的HBD-1和HBD-4两个因子的表达进行组织学定位,并通过Image pro-plus 5.1图象分析软件对牙髓中的阳性染色进行平均光密度值(optical density, OD)测定。用磷酸缓冲液(phosphatic buffer solution, PBS)代替一抗作为阴性对照。采用SPSS13.0统计学软件对各组数据进行相应的统计学分析。2.按恒牙牙根发育的八个阶段,将牙髓组织分为两组：第1组为根尖孔未闭合组,第2组为根尖孔闭合组。用常规SP免疫组化法对两组牙髓进行HBD-1和HBD-4的染色。测定OD值,采用SPSS13.0统计学软件对数据进行单因素方差分析。结果1、在人牙髓组织中,HBD-1和HBD-4集中表达在牙髓成牙本质细胞的胞核和胞浆中。2、HBD-1在正常、深龋和炎症组均呈中度阳性表达,三组相互间无显著差异(P>0.05)。3、HBD-4在深龋和牙髓炎组中的表达与正常组相比均显著增强(P<0.01),且炎症组较深龋组表达也显著性增强(P<0.01)。4、冠髓HBD-1的表达在根尖孔未闭合组呈阳性,与根尖孔闭合组无显著差异(P>0.05)。在根尖孔未闭合组,HBD-1在冠部和颈部牙髓成牙本质细胞中成阳性表达,且表达无显著差异；在根部成牙本质细胞中未见其阳性表达。5、HBD-4在根尖孔未闭合组冠部和颈部牙髓成牙本质细胞突起中呈弱阳性表达,在根部成牙本质细胞突起中见其阳性染色显著强于冠部和颈部染色。结论1、HBD-1在牙髓中呈固有性表达,参与了牙髓天然免疫系统的构建。2、HBD-4在深龋、牙髓炎症中表达的变化,提示HBD-4参与深龋、牙髓炎炎症发展过程中的免疫防御反应。3.HBD-1和HBD-4在人正常发育的牙髓组织中,随着牙根的逐渐发育而呈现不同特征的表达,因而参与牙髓的发育过程中的防御体系的构建。

全文目录

中文摘要  5-7
ABSTRACT  7-10
符号说明  10-12
前言  12-14
实验一人类β-防御素在人正常、深龋及炎症牙髓中的表达  14-26
  材料方法  14-18
  结果  18-20
  讨论  20-25
  小结  25-26
实验二恒牙牙根发育过程中β-防御素在牙髓中的表达  26-32
  材料方法  26-27
  结果  27-29
  讨论  29-31
  小结  31-32
附图  32-40
参考文献  40-46
致谢  46-47
攻读硕士学位期间发表的文章目录  47-48
学位论文评阅及答辩情况表  48

人类β-防御素在牙髓组织中的免疫组化研究

内容摘要

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