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黑龙江省瓜类白粉病菌生理小种鉴定及其多样性分析

作　者: 魏尊苗
导　师: 栾非时
学　校: 东北农业大学
专　业: 蔬菜学
关键词: 瓜类 白粉病 生理小种 RAPD分析 IGS-RFLP分析
分类号: S436.42
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要


白粉病是瓜类作物广泛发生的一种世界性病害,温室及露地均可发生,由于为害瓜类作物的白粉病菌生理小种分化快,所以明确当地白粉病菌生理小种及其地理分布对引进抗源材料,开展抗病育种及防治等方面均具有重要意义。应用分子标记辅助育种可提高选择效率,加快新抗病品种的培育。本实验比较了三种不同纯化保存白粉病菌的方法,结果显示,活体保存法保存时间最长约为3个月,离体打孔法保存时间最短约为1个月,MS添加激素IAA叶碟保存法可大约保存1.5个月,最适合子叶生根的激素IAA浓度为1.5mg/l。三种方法各有利弊,应根据需要选择合适的保存方法。2010年采集黑龙省不同生态区不同设施内的甜瓜、黄瓜、南瓜、西瓜等瓜类白粉病病菌17份,利用国际通用的瓜类白粉病鉴定标准对其进行生理小种鉴定,根据13个鉴别寄主的抗感反应,初步确定黑龙江省瓜类白粉病菌存在3个生理小种,即单囊壳白粉菌(Podosphaera xanthii)的生理小种1和生理小种N1,还有一个新生理小种,其中优势小种是生理小种1。对其中部分白粉病菌进行RAPD分析,从119个随机引物中筛选出10个条带清晰重复性好的引物,扩增得到157个位点,其中多态性位点为138个,多态性位点频率为97.89%,说明黑龙江省葫芦科作物白粉菌有丰富的遗传多样性。利用NTSYS-PC软件进行数据分析,结果表明:供试菌株之间遗传相似系数的变化幅度为0.52-0.75,根据遗传相似系数用类平均法(UPGMA)对其聚类,以遗传相似系数0.60为阈值,供试菌株可区分为4个类群。同是生理小种1的菌株部分聚到了同一类,新生理小种与部分生理小种1菌株聚到同一类,同是生理小种N1的两个菌株未聚到同一类;相同地理来源或相同寄主来源的白粉菌也未聚到一类。初步确定瓜类白粉病菌群体基因型与致病性之间不形成对应关系,与菌株地理来源、寄主来源及设施类型亦无明显直接关系。应用通用引物对部分黑龙江省瓜类白粉病菌进行转录单位间隔区(IGS)分析,结果表明,不同菌株的IGS区存在长度异质性和数量多态性。应用MspⅠ, AsuⅠ, Hinp1Ⅰ3个限制性内切酶对IGS扩增产物进行酶切(IGS-RFLP),不同菌株的酶切位点不同,电泳后产生多样性丰富的图谱,成为菌株特有的DNA指纹,实验所用的3个限制性内切酶都可以有效地将供试菌株加以鉴别,但未发现不同小种间的特异性标记。利用NTSYS-PC软件对IGS1-RFLP酶切图谱进行数据分析,各菌株之间遗传相似系数的变化幅度为0.46-0.80,说明白粉菌间有丰富的遗传多样性,以遗传相似系数0.60为阈值,供试菌株可区分为3个类群,初步确定瓜类白粉病菌群体基因型与致病性之间不形成对应关系,与菌株地理来源、寄主来源及设施类型亦无明显直接关系。

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中图分类: > 农业科学 > 植物保护 > 病虫害及其防治 > 园艺作物病虫害及其防治 > 蔬菜病虫害 > 瓜类病虫害
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