学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

青梅有效部位防治高尿酸血症和痛风的作用及机制研究

作　者: 夏道宗
导　师: 张英；吕圭源
学　校: 浙江大学
专　业: 食品安全
关键词: 高尿酸血症 痛风 高尿酸血症肾病 青梅 有效部位 绿原酸同系物 抗氧化特性 安全性评价
分类号: R285.5
类　型: 博士论文
年　份: 2010年
下　载: 760次
引　用: 4次
阅　读: 论文下载
 

内容摘要


高尿酸血症和痛风已成为现代生活的文明病之一。近年来应用天然产物治疗高尿酸血症和痛风的报道越来越多。我国是青梅（Prunus mume Sieb.et Zucc.）的原产地,虽拥有七千年梅文化的悠久历史,但长期以来主要停留在精神层面,对梅制品的研发投入不足,青梅产业正遭遇严峻的发展瓶颈。本课题组在对青梅进行探索性研究时发现,部分青梅提取物具有显著的抗痛风功效。本研究正是基于这种背景提出的,选用浙江萧山青梅中的大叶青为原料,通过响应面法优化梅果和梅核中总酚和总黄酮的提取工艺,测定青梅不同提取部位中的特征性酚类化合物及抗氧化活性;研究所有青梅提取物（青梅果实+非果部分）的体外降尿酸作用,对筛选出的有效部位进一步研究其安全性,体内降尿酸、抗痛风及防治高尿酸血症肾病的作用及机制。现将主要研究结果归纳如下:（1）青梅（梅果、梅核）中含有较多的酚类和黄酮类化合物。本研究首次报道,从梅果中检出了新绿原酸和隐绿原酸两种绿原酸同系物,从梅核中检出了新绿原酸、绿原酸和隐绿原酸三种绿原酸同系物。（2）所有青梅果实提取物对DPPH·、ABTS·+OH·和O2·-均具有显著的清除作用,并且呈浓度依赖关系。青梅提取物具有较强的还原力,且在生物体系（大鼠脑匀浆体系、红细胞体系和全血体系）中均表现出良好的抗氧化性。（3）梅核醇提物乙酸乙酯相（PMS-E）和梅花醇提物正丁醇相（PF-B）体外对黄嘌呤氧化酶（XO）表现出较强的抑制作用;雌、雄小鼠经口急性毒性最大耐受量均大于12.0 g/kg,属于实际无毒类。在大鼠30天喂养试验中,给予PMS-E和PF-B后未出现中毒症状,最大无作用剂量为3.0 g/kg。（4）在三种小鼠高尿酸血症模型中,PMS-E和PF-B均表现出较强的降尿酸和XO活性抑制能力。本研究采用饲料中添加酵母,同时口服腺嘌呤的诱导方式,建立了理想的大鼠高尿酸血症肾病模型。PF-B对高尿酸血症肾病大鼠血清、肝脏中XO活性及肝脏中腺苷脱氨酶活性的抑制均明显强于PMS-E。中高剂量PMS-E和PF-B均可使高尿酸血症肾病大鼠血清、肝脏和肾脏中MDA、GSSG含量和过氧化氢酶活性出现不同程度的下降,使GSH含量和SOD活性出现不同程度的升高。此外,PMS-E和PF-B对尿酸性肾病大鼠病变的肝脏和肾脏组织有显著改善作用。（5）不同剂量PF-B均可显著降低痛风性关节炎大鼠血液中白细胞数量,以及关节周围肿胀组织中NO和IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α、PGE2等炎症因子和细胞因子,以及单胺类递质（DA、5-HT）的水平,且呈剂量依赖关系。PF-B在多种炎症和疼痛动物模型中,均表现出良好的抗炎镇痛作用。（6）人体试食试验初步研究结果显示,以梅花醇提物为功能性成分制成的胶囊和口服液在治疗高尿酸血症和痛风方面有较好的效果。综上所述,可知青梅是植物多酚和黄酮类化合物的优良资源,其提取物具有良好的清除自由基和抗氧化活性。在所有青梅提取物中,PF-B不仅多酚和黄酮含量最高,而且在高尿酸血症和痛风的治疗方面,其效果都是最好的,并推断PF-B中的主要药效成分应该是黄酮类化合物。以青梅花为原料,研究和开发防治高尿酸血症和痛风的膳食补充剂、保健食品、医药中间体和天然药物前景广阔,理论和实践意义重大。

全文目录


致谢  5-6
摘要  6-8
ABSTRACT  8-11
缩略词表  11-13
目录  13-23
第一章 绪论  23-56
  1.1 高尿酸血症和痛风的研究现状  23-39
    1.1.1 概述  23-25
    1.1.2 高尿酸血症和痛风的流行病学  25-29
      1.1.2.1 国外痛风的流行病学研究现状  26-28
      1.1.2.2 国内痛风的流行病学研究现状  28-29
    1.1.3 高尿酸血症和痛风的临床表现  29-30
    1.1.4 痛风的诊断  30-32
      1.1.4.1 ARA标准  31
      1.1.4.2 Holmes标准(1985年)  31-32
    1.1.5 高尿酸血症和痛风的治疗  32-38
      1.1.5.1 西医治疗策略  32-35
      1.1.5.2 中药对高尿酸血症和痛风的现代治疗  35-36
      1.1.5.3 天然产物对高尿酸血症的治疗  36-37
      1.1.5.4 天然产物对痛风性关节炎的治疗  37-38
    1.1.6 高尿酸血症与痛风动物模型研究状况  38-39
  1.2 氧化应激与高尿酸血症和痛风  39
  1.3 饮食与高尿酸血症和痛风  39-42
  1.4 青梅研究与开发利用现状  42-54
    1.4.1 青梅的资源分布  42-43
    1.4.2 青梅的化学成分  43-47
      1.4.2.1 主要营养成分  44
      1.4.2.2 有机酸类化合物  44-45
      1.4.2.3 多酚类化合物  45
      1.4.2.4 挥发性成分  45-46
      1.4.2.5 糖苷类成分  46
      1.4.2.6 萜类成分  46
      1.4.2.7 脂类物质  46
      1.4.2.8 生物碱类  46-47
      1.4.2.9 其他化学成分  47
    1.4.3 青梅的药理作用与生物学功能  47-52
      1.4.3.1 抗氧化作用  47-48
      1.4.3.2 调节酸碱平衡,保持体液弱碱性  48
      1.4.3.3 抑菌作用  48-49
      1.4.3.4 抗肿瘤作用  49
      1.4.3.5 抗疲劳作用  49-50
      1.4.3.6 驱虫作用  50
      1.4.3.7 解毒作用  50
      1.4.3.8 对平滑肌作用  50
      1.4.3.9 抗过敏作用  50-51
      1.4.3.10 改善肠胃功能  51
      1.4.3.11 延缓衰老,保持美容  51
      1.4.3.12 改善血液流动性  51
      1.4.3.13 抗病毒、抗炎作用  51-52
      1.4.3.14 改善记忆作用  52
      1.4.3.15 抑制胆固醇的生物合成  52
    1.4.4 青梅资源的开发利用现状  52-54
      1.4.4.1 在食品工业中的应用  52-53
      1.4.4.2 在临床和医药中的应用  53
      1.4.4.3 当前存在的主要问题  53-54
  1.5 本文的立题依据与研究内容  54-56
    1.5.1 立题依据和研究目的  54-55
    1.5.2 研究内容  55-56
第二章 青梅中总酚和总黄酮的提取工艺研究  56-82
  2.1 材料与方法  56-59
    2.1.1 实验原料  56
    2.1.2 实验试剂  56
    2.1.3 仪器设备  56-57
    2.1.4 实验方法  57-59
      2.1.4.1 绿原酸标准曲线的制作  57
      2.1.4.2 芦丁标准曲线的制作  57
      2.1.4.3 青梅中总酚和总黄酮的提取及含量测定  57-58
      2.1.4.4 总酚提取工艺的响应面法优化  58
      2.1.4.5 总黄酮提取工艺的响应面法优化  58-59
  2.2 结果与讨论  59-80
    2.2.1 绿原酸和芦丁的标准曲线回归方程  59-60
    2.2.2 不同提取条件对梅果、梅核总酚得率的影响  60-65
    2.2.3 梅果总酚提取的响应面分析结果  65-70
      2.2.3.1 试验分析和回归方程的建立  65-67
      2.2.3.2 响应曲面和等高线分析  67-70
      2.2.3.3 优化后的工艺参数  70
    2.2.4 梅核总酚提取的响应面分析结果  70-74
      2.2.4.1 试验分析和回归方程的建立  70-71
      2.2.4.2 响应曲面和等高线分析  71-72
      2.2.4.3 优化后的工艺参数  72-74
    2.2.5 梅果总黄酮提取的响应面分析结果  74-76
      2.2.5.1 试验分析和回归方程的建立  74-75
      2.2.5.2 响应曲面和等高线分析  75
      2.2.5.3 优化后的工艺参数  75-76
    2.2.6 梅核总黄酮提取的响应面分析结果  76-80
      2.2.6.1 试验分析和回归方程的建立  76-79
      2.2.6.2 响应曲面和等高线分析  79-80
      2.2.6.3 优化后的工艺参数  80
  2.3 本章小结  80-82
第三章 青梅提取物中酚类化合物及抗氧化特性研究  82-111
  3.1 材料与方法  84-90
    3.1.1 实验原料  84
    3.1.2 实验试剂  84-85
    3.1.3 仪器设备  85
    3.1.4 实验方法  85-90
      3.1.4.1 青梅提取物中总酚和总黄酮含量测定  85
      3.1.4.2 青梅提取物中三种绿原酸类化合物的定量分析  85-86
      3.1.4.3 清除DPPH·能力的测定  86
      3.1.4.4 清除ABTS~(·+)能力的测定  86
      3.1.4.5 清除OH·能力的测定  86-87
      3.1.4.6 清除O_2~(·-)能力的测定  87
      3.1.4.7 清除NO能力的测定  87
      3.1.4.8 亚铁离子螯合能力的测定  87-88
      3.1.4.9 还原力的测定  88
      3.1.4.10 抑制脂质过氧化能力的测定  88-89
      3.1.4.11 抑制红细胞氧化溶血能力的测定  89
      3.1.4.12 全血体系总抗氧化能力试剂盒(T-AOC)法  89
      3.1.4.13 数据处理  89-90
  3.2 结果与讨论  90-108
    3.2.1 梅果和梅核提取物分级产物中的黄酮和酚类物质含量  90
    3.2.2 HPLC定量分析方法及标准图谱  90-92
    3.2.3 青梅提取物中绿原酸类化合物的组成及含量  92-94
    3.2.4 清除DPPH·的能力  94-96
    3.2.5 清除ABTS~(·+)的能力  96-97
    3.2.6 清除OH·的能力  97-99
    3.2.7 清除O_2~(·-)的能力  99-100
    3.2.8 清除NO的能力  100-101
    3.2.9 亚铁离子螯合能力  101-102
    3.2.10 还原力  102-104
    3.2.11 抑制脂质过氧化的能力  104-106
    3.2.12 抑制红细胞氧化溶血的能力  106-107
    3.2.13 总抗氧化能力  107-108
  3.3 本章小结  108-111
第四章 青梅提取物降尿酸作用的体外筛选及安全性评价  111-129
  4.1 材料与方法  111-115
    4.1.1 实验原料  111-112
    4.1.2 实验动物  112
    4.1.3 实验试剂  112
    4.1.4 仪器设备  112-113
    4.1.5 实验方法  113-115
      4.1.5.1 青梅提取物对黄嘌呤氧化酶活性的体外抑制作用  113
      4.1.5.2 小鼠急性经口毒性试验  113-114
      4.1.5.3 大鼠30天喂养实验  114-115
      4.1.5.4 数据处理  115
  4.2 结果与分析  115-128
    4.2.1 对黄嘌呤氧化酶活性的抑制  115-116
    4.2.2 急性经口毒性试验结果  116-117
    4.2.3 大鼠30天喂养试验结果  117-128
      4.2.3.1 一般情况  117
      4.2.3.2 摄食状况及生长发育情况  117
      4.2.3.3 对试验大鼠脏器指数的影响  117
      4.2.3.4 对血液学指标的影响  117-126
      4.2.3.5 对血液生化指标的影响  126
      4.2.3.6 病理组织学观察结果  126-128
  4.3 本章小结  128-129
第五章 青梅提取物防治小鼠高尿酸血症的实验研究  129-148
  5.1 材料与方法  129-132
    5.1.1 实验原料  129-130
    5.1.2 实验动物  130
    5.1.3 实验试剂  130
    5.1.4 仪器设备  130
    5.1.5 实验方法  130-132
      5.1.5.1 碱性磷钨酸盐测定血清中尿酸水平方法的建立  130-131
      5.1.5.2 PMS-E和PF-B对氧嗪酸钾致小鼠高尿酸血症的影响  131
      5.1.5.3 PMS-E和PF-B对尿酸致小鼠高尿酸血症的影响  131
      5.1.5.4 PMS-E和PF-B对酵母膏致小鼠高尿酸血症的影响  131-132
      5.1.5.5 数据处理  132
  5.2 结果与分析  132-146
    5.2.1 尿酸标准曲线及回归方程  132-133
    5.2.2 PMS-E和PF-B对高尿酸血症小鼠的影响  133-146
      5.2.2.1 对氧嗪酸钾致小鼠高尿酸血症的影响  133-137
      5.2.2.2 对尿酸致小鼠高尿酸血症的影响  137-141
      5.2.2.3 对酵母膏致小鼠高尿酸血症的影响  141-146
  5.3 本章小结  146-148
第六章 青梅提取物防治大鼠高尿酸血症肾病及机制研究  148-180
  6.1 材料与方法  148-152
    6.1.1 实验原料  148-149
    6.1.2 实验动物  149
    6.1.3 实验试剂  149
    6.1.4 仪器设备  149-150
    6.1.5 实验方法  150-152
      6.1.5.1 酵母颗粒饲料的制备  150
      6.1.5.2 大鼠高尿酸血症肾病模型的建立  150
      6.1.5.3 标本采集和指标观察  150
      6.1.5.4 PMS-E和PF-B对大鼠高尿酸血症肾病的治疗作用及机制研究  150-152
      6.1.5.5 数据处理  152
  6.2 结果与讨论  152-178
    6.2.1 大鼠高尿酸血症肾病模型制作  152-154
      6.2.1.1 一般观察  152
      6.2.1.2 血清生化指标  152-153
      6.2.1.3 体重及主要脏器指数  153-154
    6.2.2 PMS-E和PF-B对高尿酸血症肾病大鼠的影响  154-178
      6.2.2.1 一般观察  154-155
      6.2.2.2 体重及主要脏器指数  155-156
      6.2.2.3 血清尿酸、肌酐、尿素氮水平  156-158
      6.2.2.4 大鼠尿尿酸浓度及24 h尿酸总排泄量  158-159
      6.2.2.5 血清总蛋白、白蛋白含量和白球比  159
      6.2.2.6 血清、肝脏中黄嘌呤氧化酶和腺苷脱氨酶的活性  159-162
      6.2.2.7 血清中氧化应激参数和抗氧化酶活性  162-163
      6.2.2.8 血清脂质水平和动脉硬化指数  163-166
      6.2.2.9 肝脏中氧化应激参数和抗氧化酶活性  166-167
      6.2.2.10 肾脏中氧化应激参数和抗氧化酶活性  167-170
      6.2.2.11 肾脏组织的一般病理学观察  170-171
      6.2.2.12 肾脏组织的尿酸盐特殊染色观察  171-177
      6.2.2.13 肾脏组织的电镜学观察  177-178
  6.3 本章小结  178-180
第七章 青梅提取物防治大鼠痛风性关节炎及抗炎镇痛的机制研究  180-205
  7.1 材料与方法  181-187
    7.1.1 实验原料  181
    7.1.2 实验动物  181
    7.1.3 实验试剂  181-182
    7.1.4 仪器设备  182
    7.1.5 实验方法  182-187
      7.1.5.1 尿酸钠结晶诱导大鼠痛风性关节炎  182-184
      7.1.5.2 对腹腔毛细血管通透性的影响(腹腔染料渗出法)  184
      7.1.5.3 角叉菜胶致大鼠足肿胀  184-185
      7.1.5.4 二甲苯致小鼠耳肿胀  185
      7.1.5.5 大鼠棉球肉芽肿增生  185
      7.1.5.6 醋酸致小鼠扭体反应  185-186
      7.1.5.7 温浴致小鼠疼痛反应(小鼠热水缩尾法)  186
      7.1.5.8 热板致小鼠疼痛反应  186
      7.1.5.9 数据处理  186-187
  7.2 结果与讨论  187-203
    7.2.1 PF-B对大鼠痛风性关节炎的影响  187-197
      7.2.1.1 大鼠体重  187-188
      7.2.1.2 关节肿胀度  188-189
      7.2.1.3 大鼠步态的观察  189
      7.2.1.4 大鼠血液中白细胞数量的变化  189-191
      7.2.1.5 肿胀组织中炎症因子与细胞因子的测定  191
      7.2.1.6 外周疼痛介质——单胺类递质的测定  191-192
      7.2.1.7 血清和肿胀组织中NO浓度的测定  192-193
      7.2.1.8 大鼠关周软组织的一般病理学观察  193-197
      7.2.1.9 大鼠关周软组织的电镜观察  197
    7.2.2 PF-B的抗炎作用  197-200
      7.2.2.1 对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响  197-198
      7.2.2.2 对角叉菜胶致大鼠足肿胀的影响  198
      7.2.2.3 对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响  198-199
      7.2.2.4 对大鼠棉球肉芽肿增生的影响  199-200
    7.2.3 PF-B的镇痛作用  200-203
      7.2.3.1 对醋酸致小鼠扭体反应的影响  200
      7.2.3.2 对温浴致小鼠疼痛反应的影响  200-201
      7.2.3.3 对热板致小鼠疼痛反应的影响  201-203
  7.3 本章小结  203-205
    7.3.1 梅花醇提物正丁醇相(PF-B)对大鼠痛风性关节炎的影响  203-204
    7.3.2 梅花醇提物正丁醇相(PF-B)的抗炎作用  204
    7.3.3 梅花醇提物正丁醇相(PF-B)的镇痛作用  204-205
第八章 梅花提取物治疗高尿酸血症和痛风性关节炎的人体试食试验初步研究  205-214
  8.1 资料与方法  205-208
    8.1.1 以梅花醇提物(PF)为原料的胶囊和口服液的制备方法  205
    8.1.2 高尿酸血症  205-206
      8.1.2.1 诊断标准  205-206
      8.1.2.2 病例选择标准  206
      8.1.2.3 实验用药及服法  206
      8.1.2.4 观察指标及疗效判定标准  206
    8.1.3 (间歇期)痛风性关节炎  206-208
      8.1.3.1 诊断标准  206-207
      8.1.3.2 病例选择标准  207
      8.1.3.3 治疗方法  207
      8.1.3.4 实验室观察指标  207-208
  8.2 结果与讨论  208-213
    8.2.1 PF治疗高尿酸血症的人体试食试验  208
    8.2.2 PF治疗间歇期痛风性关节炎的人体试食试验  208-213
      8.2.2.1 治疗前后痛风发作频率的比较  208-209
      8.2.2.2 治疗前后血清尿酸水平的变化  209-210
      8.2.2.3 治疗前后血浆NO水平的变化  210-211
      8.2.2.4 治疗前后红细胞中SOD活性的变化  211
      8.2.2.5 治疗前后血浆脂质过氧化物(LPO)的变化  211-212
      8.2.2.6 治疗前后血脂水平的变化  212-213
  8.3 本章小结  213-214
第九章 结论与展望  214-219
  9.1 主要结论  214-217
  9.2 主要创新成果  217
  9.3 展望  217-219
参考文献  219-233
攻读博士学位期间的成果  233

相似论文

  1. 痛风清解汤治疗急性痛风性关节炎的临床观察,R259
  2. 痛风方治疗急性痛风性关节炎（湿热蕴结证）的临床观察,R259
  3. 转基因水稻对肉仔鸡饲用安全性研究,S831.5
  4. CoQ10对禽痛风蛋鸡肾脏保护作用的初步研究,S858.31
  5. 不结球白菜种子老化衰变生理基础的研究,S634.3
  6. 引发对茎用莴苣高温下幼苗生长和抗氧化特性的影响,S636.2
  7. 蜂胶提取物的体外抑菌和安全性评价的初步研究,R285
  8. 抗痛风胶囊对痛风性关节炎的治疗作用及机制,R259
  9. 氯雷他定治疗儿童哮喘的疗效与安全性评价,R725.6
  10. JAK/STAT途径对BmNPV的感染应答及家蚕作为痛风药物筛选动物模型的研究,R965
  11. 青岛市男性痛风患者膳食摄入及饮食习惯调查研究,R151
  12. SLC2A9基因第八外显子137A/G位点多态性与糖尿病合并高尿酸血症的关系,R587.1
  13. 环氧化酶-2抑制剂联合小剂量秋水仙碱治疗急性痛风性关节炎的疗效观察,R589.7
  14. 营运客车正面碰撞车身结构安全性仿真与评价,U467.14
  15. 不同钙源的高钙日粮诱发青年蛋鸡痛风的机理研究,S858.31
  16. 关于高尿酸血症患者易患泌尿系结石的临床分析,R589.7
  17. 远方教授中西医结合治疗痛风性肾病经验总结,R692.9
  18. 新疆哈萨克族高尿酸血症与糖脂代谢的关系,R589
  19. 瑞舒伐他汀钙对高尿酸血症大鼠CRP，IL-6和TNF-α的影响,R589.7
  20. 急性子化学成分及品质评价研究,R284
  21. 五味子鲜果的初步研究,R284

中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药药理学 > 中药实验药理
© 2012 www.xueweilunwen.com