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丝素蛋白增强可注射磷酸钙骨水泥的性能及细胞相容性研究

作 者: 干旻峰
导 师: 杨惠林
学 校: 苏州大学
专 业: 骨外科学
关键词: 丝素蛋白 磷酸钙 抗压强度 凝固时间 可注射性 人骨髓间充质干细胞 细胞相容性
分类号: R318.08
类 型: 硕士论文
年 份: 2008年
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内容摘要


第一部分丝素蛋白增强可注射磷酸钙骨水泥的性能研究[目的]评价含不同质量分数(weight%,wt%)丝素蛋白(Silk Fibroin,SF)及不同液固比制备的复合磷酸钙骨水泥的抗压强度凝固时间。探索一种适合于椎体后凸成形术的新型可注射材料。[方法]模拟体液(37±0.5℃、100%湿度)环境下,用生物力学测试仪及凝固时间测定仪(维卡针)测定:①含0.5wt%、1.0wt%、1.5wt%、2.0wt%、2.5 wt%及3.0wt%丝素蛋白的磷酸钙固相及单纯磷酸钙固相(对照组),与固化液按照0.400的液固比(ml/g)混合后各5个试件的抗压强度、初凝及终凝时间;②含2.0wt%丝素蛋白的磷酸钙固相与固化液按照液固比(ml/g)分别为0.350、0.375、0.400、0.425、0.450及0.475混合后各5个试件的抗压强度、初凝及终凝时间。[结果]随着丝素蛋白含量的增加,SF/CPC的抗压强度逐渐增加,但当丝素蛋白含量达3%时抗压强度反而降低,含1.0wt%、1.5wt%、2.0wt%、2.5wt%及3.0wt%丝素蛋白的SF/CPC与单纯CPC比较具统计学意义(p<0.05)。SF/CPC抗压强度随液固比降低而逐渐增加,但当液固比为0.350ml/g时抗压强度反而下降。随丝素蛋白含量增加,SF/ CPC初凝及终凝时间逐渐缩短。含1.0wt%、1.5wt%、2.0wt%、2.5wt%丝素蛋白的SF/CPC初凝时间与单纯CPC比较具统计学意义(p<0.05);含0.5wt%、1.0wt%、1.5wt%、2.0wt%、2.5wt%丝素蛋白的SF/CPC终凝时间与单纯CPC比较具统计学意义(p< 0.05)。SF/CPC初凝及终凝时间随液固比的降低而逐渐缩短。[结论]CPC固相中添加适量的丝素蛋白及选择合适的液固比,改善了CPC的性能,能使制备的SF/CPC复合材料获得满意的抗压强度同时又具有适宜的凝固时间,有望用于椎体后凸成形术。第二部分丝素蛋白增强可注射磷酸钙骨水泥的细胞相容性研究[目的]评价丝素蛋白增强可注射磷酸钙骨水泥的细胞相容性,为进一步体内实验提供依据。[方法]应用密度梯度离心法分离人骨髓间充质干细胞(hBMSCs),条件培养基优化分离培养,流式细胞仪检测人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)的表面标记。浸提法制备SF/CPC复合材料及CPC的浸提液。用MTT法测定SF/CPC及CPC浸提液培养hBMSCs的活力,绘制生长曲线、计算第1d、3d、5d、7d的相对增值率并进行毒性分级;流式细胞仪检测SF/CPC及CPC浸提液培养的hBMSCs第4d的细胞周期及倍体情况;扫描电镜(SEM)观察SF/CPC复合材料与hBMSCs共培养后第1d、3d、5d、7d细胞的粘附及增殖情况。[结果]密度梯度离心法能分离出纯度较高的hBMSCs。流式细胞仪检测hBMSCs高表达CD 29、CD 44及CD105,低表达CD34及CD45。第1d、3d、5d、7dSF/CPC及CPC浸提液培养的hBMSCs具良好的活力,其毒性分级均为0或1级;流式细胞仪检测见两组细胞均为二倍体细胞,未见异倍体细胞,两组G0/G1期、S期、G2/M期及细胞增殖指数(proliferation index,PI)未见明显差异(p>0.05);扫描电镜见hBMSCs在SF/CPC复合材料上能粘附、生长,并随时间增殖。[结论]hBMSCs与SF/CPC具有良好的细胞相容性,可以行体内的相关实验。

全文目录


中文摘要  3-5
Abstract  5-9
引言  9-11
第一部分 丝素蛋白增强可注射磷酸钙骨水泥的性能研究  11-22
  材料与方法  11-13
  结果  13-17
  讨论  17-20
  参考文献  20-22
第二部分 丝素蛋白增强可注射磷酸钙骨水泥的细胞相容性研究  22-35
  材料与方法  22-26
  结果  26-29
  讨论  29-32
  参考文献  32-35
结论  35-36
附图  36-39
复合磷酸钙骨水泥研究进展  39-49
攻读硕士学位期间公开发表论文及参译著作  49-50
英文缩写词表(LIST OF ABBREVIATIONS)  50-51
致谢  51

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中图分类: > 医药、卫生 > 基础医学 > 医用一般科学 > 生物医学工程 > 一般性问题 > 生物材料学
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