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紫外线减毒柔嫩艾美耳球虫YL株虫苗的制备及预防效果研究

作　者: 刘蕾
导　师: 于三科
学　校: 西北农林科技大学
专　业: 预防兽医学
关键词: 鸡柔嫩艾美耳球虫紫外线致弱免疫效果
分类号: S858.31
类　型: 硕士论文
年　份: 2008年
下　载: 44次
引　用: 1次
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内容摘要

鸡球虫病是一种呈全球性分布的原虫病,其发病率可高达50%～70%,死亡率为20%～30%,严重者高达80%,每年全世界因球虫病造成的经济损失超过30亿美元。虽然使用抗球虫药这种传统方法在球虫防治中发挥了积极的作用,但是球虫耐药株的不断出现、公众对药物残留的恐惧以及新药研究的缺乏,使得活疫苗接种在不久的将来会成为控制球虫病的主要措施。因此,我们开展了本项研究,并取得如下结果:(1)对E. tenella YL株进行以紫外线照射为主的6种方法进行致弱,然后将这6种方法致弱的和未照射的E. tenella YL株孢子化卵囊,分别经口接种8日龄无球虫感染的健康尼克红小公雏,剂量为1×10~5个/羽,对肠道病变记分、每克粪便卵囊数(OPG)、平均增重、死亡率、血便排放情况等几项指标进行测定,研究其致病性。结果显示:未照射的球虫卵囊对鸡体的影响较大,症状和病理变化严重,且有死亡现象,死亡率在5%以上。而照射后的球虫卵囊对鸡体的影响显著减轻,试验组鸡未出现死亡现象,但镜检时查出大量卵囊,其中方法5致弱的卵囊对鸡的致病性最弱,其相对增重率和盲肠病变记分等都较其他照射方法有明显减轻。(2)用6个不同方法照射致弱的E. tenella YL株虫苗免疫雏鸡,筛选免疫保护效果最好的致弱方法。结果显示:用方法5致弱的鸡E. tenella YL株的孢子化卵囊免疫鸡,鸡的日平均体重曲线呈稳定上升趋势,产生的卵囊总量少于其它试验组和阳性对照组,OPG值曲线也较其它组低且稳定,且该组鸡的组织病理变化也较其它试验组和阳性对照组轻。(3)用最佳致弱方法制得的紫外线致弱虫苗免疫雏鸡,筛选免疫保护效果最好的免疫剂量。结果显示:免疫剂量为8 000个/羽时,相对增重率较其它组高,而OPG值、组织病理学变化比其它组轻。(4)用最佳致弱方法制得的紫外线致弱虫苗免疫雏鸡,筛选免疫保护效果最好的免疫日龄。结果显示:9日龄首免时,相对增重率和成活率较其它组高,而OPG值和盲肠病变记分较其它组轻。(5)用最佳致弱方法制得的紫外线致弱虫苗免疫雏鸡,利用非特异性酯酶(ANAE)染色法,显示该虫苗免疫后鸡体内淋巴器官T细胞的数量变化,为鸡球虫疫苗的免疫机制提供组织学基础。结果显示:免疫组的胸腺、脾、盲肠扁桃体等器官的T细胞数量均高于对照组,但各器官T细胞数量增加高峰期和峰值是有差别的。其中胸腺的高峰期最早,出现在2免后第7天,峰值为118个/100μm~2;其次为盲肠扁桃体,出现在2免后第10天,峰值为64个/100μm~2;脾脏的高峰期出现最晚,在2免后第14天,峰值为83个/100μm~2。

全文目录

摘要  4-5
Abstract  5-11
文献综述  11-31
  第一章鸡球虫及其免疫学研究进展  11-31
    1.1 鸡球虫的概况  11-15
      1.1.1 鸡E.tenella 及其生活史  11-14
      1.1.2 E.tenella 的致病性研究  14
      1.1.3 E.tenella 的鉴别与诊断  14-15
    1.2 鸡球虫的免疫机理研究进展  15-22
      1.2.1 鸡球虫病免疫学研究历史回顾  15
      1.2.2 鸡球虫病免疫机理  15-22
    1.3 球虫疫苗的研究概况  22-30
      1.3.1 活卵囊疫苗  22-27
      1.3.2 鸡球虫基因工程疫苗  27-30
    1.4 展望  30-31
试验研究  31-65
  第二章鸡E.TENELLA YL 株紫外线致弱虫苗的制备及致病性研究  31-37
    2.1 材料  31-32
      2.1.1 试验动物  31
      2.1.2 试验虫株  31
      2.1.3 酶和试剂  31
      2.1.4 主要仪器与设备  31-32
    2.2 方法  32-34
      2.2.1 E.tenella YL 株卵囊的复苏与分离纯化  32-33
      2.2.2 E.tenella YL 株卵囊紫外线照射致弱  33
      2.2.3 致病性研究  33-34
    2.3 结果  34-35
      2.3.1 临床症状观察结果  34
      2.3.2 增重变化  34-35
      2.3.3 OPG 值统计结果  35
      2.3.4 盲肠病变记分结果  35
    2.4 讨论  35-36
    2.5 小结  36-37
  第三章鸡E.TENELLA YL 株紫外线照射最佳致弱方法的确定  37-46
    3.1 材料  37
      3.1.1 试验动物  37
      3.1.2 试验虫株及虫苗  37
    3.2 方法  37-38
      3.2.1 试验动物及分组  37
      3.2.2 判断指标  37-38
    3.3 结果  38-45
      3.3.1 临床症状观察结果  38
      3.3.2 OPG 值测定结果  38-40
      3.3.3 各组鸡的日平均体重测定结果  40
      3.3.4 病理切片观察结果  40-45
    3.4 讨论  45
    3.5 小结  45-46
  第四章鸡E.TENELLA YL 株紫外线致弱虫苗最佳免疫剂量的确定  46-55
    4.1 材料  46
      4.1.1 试验动物  46
      4.1.2 试验虫株及虫苗  46
    4.2 方法  46-47
      4.2.1 试验动物及分组  46
      4.2.2 判定指标  46-47
    4.3 结果  47-53
      4.3.1 临床症状观察结果  47
      4.3.2 OPG 值测定结果  47-48
      4.3.3 各组鸡的日平均体重测定结果  48-49
      4.3.4 病理切片观察结果  49-53
    4.4 讨论  53-54
    4.5 小结  54-55
  第五章鸡E.TENELLA YL 株紫外线致弱虫苗最佳免疫日龄的确定  55-59
    5.1 材料  55
      5.1.1 试验动物  55
      5.1.2 试验虫株及虫苗  55
    5.2 方法  55-56
      5.2.1 试验动物及分组  55
      5.2.2 判断指标  55-56
    5.3 结果  56-57
      5.3.1 临床症状观察结果  56
      5.3.2 增重变化  56
      5.3.3 OPG 值结果  56-57
      5.3.4 盲肠病变记分情况  57
    5.4 讨论  57-58
    5.5 小结  58-59
  第六章鸡E.TENELLA YL 株紫外线致弱虫苗免疫雏鸡后T 细胞的变化  59-65
    6.1 材料  59-60
      6.1.1 试验动物  59
      6.1.2 试验虫株及虫苗  59
      6.1.3 固定液  59
      6.1.4 孵育液  59-60
    6.2 方法  60
      6.2.1 试验动物及分组  60
      6.2.2 非特异性酯酶染色法  60
      6.2.3 细胞计数及数据处理  60
    6.3 结果  60-63
      6.3.1 免疫后胸腺T 细胞数量变化  60-61
      6.3.2 免疫后脾T 细胞数量变化  61
      6.3.3 免疫后盲肠扁桃体T 细胞数量变化  61-62
      6.3.4 免疫后试验组几种器官T 细胞数量变化  62-63
    6.4 讨论  63-64
      6.4.1 ANAE 染色法  63
      6.4.2 关于球虫疫苗免疫后几种器官T 细胞数量变化  63-64
    6.5 小结  64-65
结论  65-66
参考文献  66-75
致谢  75-76
作者简介  76

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