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落叶松—杨栅锈菌生理小种鉴定

作　者: 刘春梅
导　师: 曹支敏
学　校: 西北农林科技大学
专　业: 森林保护学
关键词: 落叶松-杨栅锈菌 生理小种 反应型 IGS
分类号: S763.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2007年
下　载: 75次
引　用: 2次
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内容摘要


落叶松-杨栅锈菌（Melampsora larici-populina Kleb.）又称青杨叶锈病,广泛分布于世界各杨树栽植区,可危害青杨派,黑杨派及其杂交杨,甚至胡杨等多种杨树,是杨树锈病中分布最广,危害最大的一种病害,在我国主要分布于东北、西北、华北及西南地区。本论文主要对来自全国7个省市一定地域、不同年份、不同批次的15个落叶松-杨栅锈菌菌系进行了鉴别寄主反应型测定和IGS分析,得出如下结论:（1）通过鉴别寄主反应型测定以及潜育期、产孢量观察,进一步明确了落叶松-杨栅锈菌在我国的生理小种分化。初步将供试的15个菌系中的13个归为4个生理小种,Th053、Sb和Cj052归1号生理小种CMLP1;Ts06、Gl051、Hb05-1和Sb052归2号生理小种CMLP2;Qh063、Gl052、Hdao和Sb051归3号生理小种CMLP3;Bq和Qh061归5号生理小种CMLP5;By05-3和Zs暂单独划为一个致病类型。（2）IGS1扩增结果表明,所有供试的15个菌系IGS1的目的条带约1Kb均在同一位置,大小没有差异,供试菌系的IGS1高度保守,小种内、小种间没有差异。此研究更进一步证明了我国落叶松-杨栅锈菌确实存在着生理小种分化和变异,且菌株间的DAN多态性与菌株的地理来源没有明显的相关性,各菌株的致病性与DNA多态性之间也没有明显的相关性。

全文目录


摘要  4-5
ABSTRACT  5-8
第一章 文献综述  8-19
  1.1 落叶松-杨栅锈菌的生物学特性  8-9
  1.2 落叶松-杨栅锈菌的寄主范围及分布  9-10
  1.3 落叶松-杨栅锈菌生理小种分化国内外研究现状  10
  1.4 分子标记技术及其在落叶松-杨栅锈菌研究中的应用  10-17
    1.4.1 分子标记概念  10
    1.4.2 分子标记技术在真菌分类研究中的应用  10-16
      1.4.2.1 限制性片断长度多态性  11
      1.4.2.2 随机扩增多态性DNA  11-12
      1.4.2.3 扩增片断长度多态性  12-13
      1.4.2.4 微卫星技术  13
      1.4.2 5 核算序列分析  13-16
    1.4.3 分子标记在落叶松-杨栅锈菌研究中的应用  16-17
  1.5 落叶松-杨栅锈菌的寄主抗病性研究  17-19
    1.5.1 抗病性测定方法  17
    1.5.2 不同派系杨树抗锈性表现  17-18
    1.5.3 杨树抗锈性机制  18-19
第二章 立题依据和研究内容  19-20
  2.1 立题依据  19
  2.2 研究内容  19-20
第三章 落叶松-杨栅锈菌生理小种鉴定  20-25
  3.1 试验材料  20-21
    3.1.1 供试菌系  20
    3.1.2 供试繁殖寄主  20
    3.1.3 供试鉴别寄主  20-21
  3.2 试验方法  21-22
    3.2.1 供试菌样的采集及繁殖方法  21
    3.2.2 试验菌种的单孢子堆分离、扩繁及保存  21
    3.2.3 试验鉴别寄主的培养  21
    3.2.4 各菌系的寄主反应型测定  21-22
  3.3 结果与分析  22-24
  3.4 讨论  24-25
第四章 落叶松-杨栅锈菌的IGS 分析  25-37
  4.1 试验材料、仪器设备及试剂  25-26
    4.1.1 试验材料  25
    4.1.2 IGS 试验所用仪器设备及试剂  25-26
  4.2 电泳方法  26-27
  4.3 落叶松-杨栅锈菌DNA 的提取与检测  27-29
    4.3.1 DNA 的提取  27
    4.3.2 DNA 提取的注意事项  27-28
    4.3.3 DNA 的检测  28-29
      4.3.3.1 DNA 纯度检测及含量计算  28
      4.3.3.2 DNA 的琼脂糖凝胶电泳检测  28-29
  4.4 PCR 扩增  29-34
    4.4.1 引物合成  29
    4.4.2 IGS 区段的PCR 扩增  29-34
      4.4.2.1 扩增体系的建立  29-32
      4.4.2.2 落叶松-杨栅锈菌IGS 片段的扩增  32-33
      4.4.2.3 扩增产物的电泳检测  33
      4.4.2.4 结果与分析  33-34
  4.5 讨论  34-37
    4.5.1 IGS 片段的扩增  34-35
    4.5.2 落叶松-杨栅锈菌基因组DNA 的提取  35-37
参考文献  37-44
致谢  44-45
作者简介  45

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