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青蒿挥发油的提取及抗菌活性研究

作　者: 张丽勇
导　师: 陈珊
学　校: 东北师范大学
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: 青蒿 挥发油 提取方法 抗菌活性 气相色谱-质谱
分类号: R285
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要


青蒿学名黄花蒿(Artemisia annua L.),属菊科春黄菊族蒿属。是我国传统中药,具有很高的药用价值。性味苦、辛,微寒,归肝,有特殊香气。自古以来一直被流传作为药用,具有抗疟、抗病毒、抗肿瘤、抗心律失常、清热解暑等活性。青蒿挥发油属于青蒿活性成分,具有抗菌、平喘、解热、止咳等药理作用。研究工作分别采用索氏提取法和直接蒸馏法提取青蒿挥发油,研究了提取过程的优化条件。对两种方法得到的青蒿挥发油进行抗菌活性方面的比较,并进行气相色谱-质谱(GC-MS)分析,鉴定其成分及各组分的相对含量。研究结果表明：索氏提取法提取青蒿挥发油的优化条件是：料液比约为1：7.8,提取时间为3h。直接蒸馏法提取青蒿挥发油的优化条件是：料液比为1：7.4,蒸馏时间为5h。利用索氏提取法得到的青蒿挥发油,即青蒿油-1,对受试菌种均具有明显的抗菌活性。最低抑制浓度(MIC)分别为：黑曲霉(Aspergillus niger) MIC为1.25%,菌刺孢属(Mycocentrospora sp.) MIC为1.25%,青霉(Penicillium sp.) MIC为5%,马青霉(.Penicillium. marneffei) MIC为1.25%,北京棒状杆菌(Corynebacterium pekinense) MIC为2.5%,枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)MIC为1.25%,四联球菌(Micrococcus tetragenus)MIC为2.5%,普通变形杆菌(Proteus vulgaris) MIC为5%。抗真菌效果大于抗细菌效果。直接蒸馏法得到的青蒿挥发油,即青蒿油-2,对受试菌种最低抑制浓度(MIC)为：北京棒状杆菌(Corynebacterium diphtheriae)MIC 0.23%,枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis) MIC 0.23%,四联球菌(Micrococcus tetragenus) MIC 0.059%,普通变形杆菌(Proteus vulgaris) MIC 3.75%,对四联球菌抑菌效果最好。青蒿油-2对同样4种细菌的抗菌效果明显大于青蒿油-1。进行GC-MS分析,青蒿油-1中分离出55个峰,鉴定出48个化合物,青蒿油-2中分离出48个峰,鉴定出39个化合物,并测出各组分的相对含量。青蒿油-1的主要成分有烯类占26.49%,烷类占22.36%,吡喃和呋喃占28.05%,酚类1.09%,桉油精0.44%,酮类1.42%,醚类4.94%,有机酸类1.89%,噻嗪类1.79%,未鉴定成分占11.31%。其中酮类、醚类、有机酸类具有较强的抗真菌作用,共占总量的8.25%,可能与青蒿油-1抗真菌作用好于抗细菌作用有关。青蒿油-2的主要成分有烯类65.42%,桉油精1.73%,酚类1.66%,烷类7.38%,酮类0.14%,有机酸类0.17%,烃类0.97%,醇类0.95%,环戊并6.93%,醛类0.49%,酯类5.58%,未鉴定成分占8.58%。烯类是挥发油中重要的抗菌成分,青蒿油-2的抗菌作用好于青蒿油-1,可能与青蒿油-2的烯类含量远远高于青蒿油-1有关。

全文目录


摘要  4-5
Abstract  5-7
目录  7-9
引言  9-10
第一章 青蒿研究的基本状况  10-19
  1. 青蒿的形态特征及分布  10
  2. 种质资源  10-11
  3. 采收与加工  11
  4. 青蒿的化学成分  11-12
  5. 青蒿素的性质  12
  6. 青蒿药用成分的提取方法  12-14
  7. 青蒿素的药理作用  14-16
  8. 青蒿的主要临床应用  16-17
  9. 青蒿挥发油  17-18
  10. 青蒿应用的前景和问题  18
  11. 本论文的工作目的  18-19
第二章 青蒿的提取  19-26
  一、索氏提取法  19-22
    1. 实验材料和仪器  19
    2. 实验方法  19-20
    3. 实验结果与分析  20-22
    4. 讨论  22
  二、直接蒸馏法  22-26
    1. 实验材料和仪器  22-23
    2. 实验方法  23
    3. 实验结果和分析  23-25
    4. 讨论  25-26
第三章 青蒿挥发油抗菌活性的研究  26-41
  1. 实验材料和仪器  26
  2. 培养基  26
  3. 实验方法  26-29
    3.1 样品制备  26-27
    3.2 菌种接种  27
    3.3 培养基的制备  27
    3.4 滤纸片法测定青蒿挥发油的抑菌效果  27
    3.5 液体稀释法测定青蒿挥发油的抑菌效果  27-29
  4. 实验结果  29-41
第四章 青蒿挥发油GC-MS分析  41-46
  1. 实验方法  41
  2. 实验结果  41-46
结论  46-47
参考文献  47-51
后记  51

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