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蓖麻毒素的分离提取及活性研究
作 者: 高杉
导 师: 侯太平
学 校: 四川大学
专 业: 农药学
关键词: 蓖麻毒素 提取分离 LD50 高原鼠兔 灭洞率
分类号: S565.6
类 型: 硕士论文
年 份: 2007年
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内容摘要
本研究以蓖麻毒素灭鼠为目的,以小白鼠活性实验为筛选指标,研究了从蓖麻种子中分离蓖麻毒蛋白的方法,实现了对蓖麻毒素的最优提取,并利用得到的蓖麻籽粗提物对小白鼠进行灭鼠试验,来模拟高原鼠兔的灭鼠效果评价。最终在野外大面积应用实验中,取得了比较满意的效果。以蓖麻籽为原料,通过选用不同物质做浸提剂,单独研究了各种浸提剂对蓖麻毒素的最佳提取方法,在综合对各浸提剂在其最佳提取条件下的提取蓖麻毒素的效果后,最终确定,0.2mol/L的磷酸缓冲液在对去皮蓖麻籽的质量体积比为1:3(g/ml)时,浸提24小时后,所得混合物4000rpm离心30min,小心除去油脂,以及离心所剩的渣滓,保留清液,在清液中加入(NH4)2SO4盐析剂到80%饱和度,盐析24小时,10000rpm离心30min,再经透析,真空干燥后所得蓖麻毒素(粗毒)产率最高,同时该提取方法还兼顾到蛋白的稳定性及整个提取流程的经济性,正是要寻找的最佳工艺路线。应用提取出的蓖麻毒素(粗毒)对小白鼠做活性实验,结果表明,蓖麻毒素对小鼠腹腔注射的LD50为7.971ug/kg,其主要药效成分为蓖麻毒素。蓖麻毒素使小白鼠中毒后无明显异常反应,不容易造成拒食现象,能够提高灭鼠效率。而小白鼠从腹腔注射后30h开始出现死亡,直到96h后均有死亡,说明本毒饵是高效、慢性灭鼠剂。针对川西北高原的主要害鼠—高原鼠兔,应用蓖麻毒素灭鼠剂进行了野外防治实验,在大面积实验中,该粗毒以1%浓度配制毒饵对高原鼠兔的校正灭效为85%以上。小区实验的灭效在90%左右。通过连续半个月的观察,未发现鹰等天敌出现二次中毒现象,对受试绵羊也无明显影响,禁牧期后,未发现对牲畜造成危害。这些都充分说明,蓖麻毒素灭鼠剂在应用中是具有安全保障的。上述研究结果说明,蓖麻毒素灭鼠剂作为一种新型的灭鼠剂,无二次中毒,对牛、羊等对非靶标生物未见明显危害,比较安全、无残毒,不造成环境污染。不失为一种优良的安全无公害灭鼠剂。
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全文目录
中文摘要 4-6 英文摘要 6-8 前言 8-11 第一章 蓖麻毒素的提取与分离 11-24 1. 材料与方法 11-14 1.1 实验材料 11 1.2 主要仪器与药品 11-12 1.3 实验方法 12-14 1.3.1 第一部分实验 浸提剂的选择及浸提条件的摸索 13 1.3.1.1 不同浸提剂的选择 13 1.3.1.2 浸提剂的最佳抽提时间的选择 13 1.3.1.3 浸提剂的最佳抽提体积的选择 13 1.3.2 第二部分实验 盐析剂的选择及最佳盐析条件的摸索 13-14 1.3.3 第三部分实验 最佳浸提条件下各浸提剂的蓖麻粗毒产率 14 2. 结果与分析 14-22 2.1 不同浸提剂灭鼠效果 14-15 2.2 最佳浸提时间的选择 15-17 2.3 最佳浸提体积的选择 17-19 2.4 盐析剂及最佳盐析条件的选择 19-21 2.5 最优条件下各浸提剂的蓖麻粗毒产率 21-22 3. 讨论 22-24 第二章 蓖麻毒素灭鼠剂的药效研究 24-33 1. 材料与方法 24-27 1.1 实验材料 24-25 1.2 主要仪器与药品 25 1.3 实验方法 25-27 1.3.1 灭鼠剂有效成分的确定 25 1.3.2 蓖麻毒素LD_(50)的测定 25-26 1.3.3 野外实验 26-27 1.3.3.1 时间、地点以及气候条件 26 1.3.3.2 防治对象 26 1.3.3.3 小区实验 26-27 1.3.3.4 大面积实验 27 1.3.3.5 灭鼠剂安全性实验 27 2. 结果与分析 27-31 2.1 灭鼠剂有效成分的确定 27-28 2.2 蓖麻毒素LD_(50)的测定 28 2.3 野外实验灭鼠效果 28-31 2.3.1 小区实验 29 2.3.2 大面积实验 29-30 2.3.3 安全性实验 30-31 3. 讨论 31-33 总结 33-35 文献综述 35-59 参考文献 59-66 在读期间发表文章 66-68 致谢 68
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中图分类: > 农业科学 > 农作物 > 经济作物 > 油料作物 > 蓖麻
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