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形态标记与AFLP分子标记在“黄海一号”中国对虾遗传选育应用中的初步研究

作　者: 刘欣
导　师: 李健；潘鲁青
学　校: 中国海洋大学
专　业: 水产养殖
关键词: 中国对虾 形态标记 AFLP分子标记 性状相关
分类号: S917.4
类　型: 硕士论文
年　份: 2007年
下　载: 230次
引　用: 1次
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内容摘要


通过遗传改良提高中国对虾的生长、抗病力等经济性状是对虾养殖的主要突破点。形态学标记(Morphological marker)具有易于识别和掌握、简单直观等优点,在遗传研究和品种选育上有重要的应用价值。分子标记(Molecular marker)突破了表现型的局限性,具有稳定性高、受环境条件的影响较小、信息含量高等特点。“黄海1号”是2004年经国家水产原良种审定委员会审定的中国对虾养殖新品种,但对其体型特征尚未作过系统研究。选取120尾第八代“黄海一号”中国对虾,测量其体长等13个数量性状指标,计算相关系数,采用通径分析的方法计算了以“黄海一号”中国对虾各个性状为自变量,体重作依变量的通径系数及相关指数。结果表明,体重和第一、六腹节长和头胸甲长、宽等性状的相关系数全部达到极显著(P < 0.01);头胸甲长对体重的直接作用最大,是影响中国对虾体重的主要因素;其他性状对体重的直接影响较小,主要通过其他性状进行间接影响。多元回归分析建立了体长、第一腹节长、尾节长和第一腹节高等性状对体重的回归方程为:y=-79.269+0.840x1+17.725x2+3.510x3+3.713x4+7.442x5。回归分析、相关分析和通径分析结果表明,头胸甲长是影响体重的最关键因素,为中国对虾选种提供了理论依据和理想的测度指标。在以“黄海一号”中国对虾为试材,优化AFLP技术体系及集群分离分析的研究中,对AFLP分子标记技术从引物的筛选、PCR反应条件等方面进行了优化,优化后的体系稳定、快捷、灵敏。按照改进的技术体系,利用11对AFLP引物组合检测了“黄海一号”中国对虾第8代选育群体基因组DNA的多态性,结果表明,AFLP标记表现出较高的多态检测效率,11对引物共产生700余条带,平均每对引物组合检测到20.8个多态标记。同时,进行分子标记与经济性状的相关分析,研究结果表明,3个AFLP标记与体长存在显著相关,这些AFLP标记的研究为中国对虾的分子标记辅助选择提供了理论参考,为进一步将与经济性状有关的基因进行定位、克隆奠定了基础。

全文目录


摘要  4-5
Abstract  5-10
第一章 前言（文献综述）  10-31
  第一节 对虾遗传育种研究现状  11-17
    1 对虾遗传学研究现状  12-14
      1.1 群体遗传学  12-13
      1.2 数量遗传学  13
      1.3 分子遗传学  13-14
    2 对虾的育种学研究进展  14-17
      2.1 杂交育种  14-15
      2.2 选择育种  15
      2.3 细胞工程育种  15-16
      2.4 分子标记辅助育种  16
      2.5 基因工程育种  16-17
  第二节 遗传标记技术在对虾遗传学研究中的应用  17-29
    1 遗传标记的种类  17-22
      1.1 形态学标记  17-18
      1.2 细胞学标记  18
      1.3 生化标记  18-19
      1.4 分子标记  19-22
    2 AFLP 分子标记技术概述  22-23
      2.1 AFLP 的基本原理  22-23
      2.2 AFLP 的技术流程及关键  23
    3 AFLP 分子标记技术在水生生物中的应用  23-29
      3.1 遗传多样性与系统发育上的研究应用  24-25
      3.2 构建高密度遗传图谱  25-27
      3.3 基因定位及克隆  27
      3.4 品系鉴定及分子标记辅助育种  27-29
      3.5 AFLP 应用前景展望  29
  第三节 本论文的研究目的及意义  29-31
第二章 中国对虾“黄海1 号”第八代选育群体几个主要数量性状的相互关系研究  31-40
  0 引言  31-32
  1 材料与方法  32-34
    1.1 实验材料  32
    1.2 形态指标及测量  32-33
    1.3 统计分析方法  33-34
  2 结果与分析  34-37
    2.1 各性状的表型参数估计值（统计量）  34
    2.2 各性状间的相关系数  34
    2.3 多元回归方程的建立  34-37
  3 讨论  37-40
    3.1 回归方程  37-38
    3.2 各性状的通径分析  38-39
    3.3 影响中国对虾“黄海一号”体重的主要数量性状的确定  39-40
第三章 中国对虾“黄海一号”AFLP 分析的条件优化  40-52
  引言  40-41
  1 材料与方法  41-47
    1.1 试验材料  41
    1.2 主要溶液配制  41-42
    1.3 实验方法  42-47
  2 结果与讨论  47-52
    2.1 高质量模板 DNA 的提取  47
    2.2 模板 DNA 的酶切  47-48
    2.3 PCR 体系建立  48-52
第四章“黄海一号”中国对虾生长相关分子标记的初步筛选  52-65
  引言  52
  1 材料与方法  52-54
    1.1 试验材料  52
    1.2 数据测量与统计分析  52-53
    1.3 基因组 DNA 的提取  53
    1.4 AFLP 反应体系及扩增程序  53
    1.5 AFLP 分析  53
    1.6 特异片段的回收及再扩增  53-54
  2 结果  54-61
    2.1 表形性状统计分析  54
    2.2 AFLP 引物的筛选  54-56
    2.3 AFLP 多态标记检测结果  56-59
    2.4 生长相关的分子标记  59-60
    2.5 生长相关分子标记的回收克隆及测序结果  60-61
  3 讨论  61-65
参考文献  65-73
致谢  73-74

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