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应用分子检测技术对养殖对虾病毒性疾病流行情况的初步研究

作　者: 王明森
导　师: 王洪光
学　校: 青岛科技大学
专　业: 药剂学
关键词: 养殖对虾对虾病毒病凡纳滨对虾 WSSV 流行情况脊尾白虾肝胰腺斑节对虾中国明对虾刀额新对虾虾池亲虾杆状病毒白斑综合症病毒日本对虾 virus 核酸酶中国对虾 Penaeus 桃拉综合征病毒
分类号: S945.46
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

全文目录

第一章综述  9-24
  1.1 对虾病毒种类及性质  10-11
    1.1.1 杆状病毒科  10
    1.1.2 细小病毒科  10
    1.1.3 呼肠孤病毒科  10
    1.1.4 虹彩病毒科  10
    1.1.5 小 RNA 病毒科  10-11
    1.1.6 弹状病毒科  11
    1.1.7 被膜病毒科  11
  1.2 对虾病毒的传播途径和防治  11-13
    1.2.1 水平传播  11
    1.2.2 垂直传播  11-12
    1.2.3 对虾病毒病的防治  12-13
  1.3 对虾病毒病诊断方法的研究  13-16
    1.3.1 组织病理学诊断  13
    1.3.2 免疫学技术  13-14
    1.3.3 核酸技术  14-15
    1.3.4 组织培养技术  15-16
  1.4 对虾流行病学调查和病症学的初步诊断  16-21
    1.4.1 了解养殖环境和病害情况  16
    1.4.2 现场症状观察及初步诊断  16-18
    1.4.3 水产动物病毒调查中的核酸样品的采集  18-19
    1.4.4 水产动物病毒调查中的核酸样品的保存  19-21
    1.4.5 六种常见对虾病毒性疾病的诊断方法  21
  1.5 流行病调查的主要研究方法  21-22
    1.5.1 流行学调查样品获得途径和处理方法  21-22
    1.5.2 流行病调查的主要研究方法  22
  1.6 结语及前景分析  22-24
第二章分子检测技术中核酸采集工具的初步设计  24-31
  2.1 采样探针的原理  24-25
    2.1.1 核酸与玻璃载体的非共价键固定  24
    2.1.2 优化核酸固定程度的方法  24-25
  2.2 采样玻璃针的初步设计  25-26
    2.2.1 材料与方法  25-26
      2.2.1.1 玻璃针的氨基硅烷化  25
      2.2.1.2 醛基修饰玻璃针的制备  25
      2.2.1.3 玻璃针采集样品与检测  25-26
  2.3 结果与分析  26-30
    2.3.1 不同模板处理方式对采样针采样效果的影响  26-27
    2.3.2 不同DNA 洗脱方式对玻璃针采样效果的影响  27
    2.3.3 使用不同的裂解液对采样效果的影响  27-28
    2.3.4 氨基化玻璃针与醛基修饰玻璃针提取核酸效果的对比  28-29
    2.3.5 采用玻璃针提取核酸方法与TIANGEN 试剂盒提取DNA 的效果对比  29-30
  2.4 讨论  30-31
第三章三种对虾病毒的病理学观察  31-37
  3.1 材料与方法  31-34
    3.1.1 实验用对虾样品  31
    3.1.2 试剂和材料  31
    3.1.3 石蜡切片和 H.E.染色  31-33
    3.1.4 电镜切片的制备  33-34
  3.2 结果  34-36
    3.2.1 感染WSSV 病毒对虾样品的光镜组织病理学研究  34
    3.2.2 感染 IHHNV 病毒对虾样品的光镜组织病理学研究  34-35
    3.2.3 感染 HPV 病毒对虾样品的光镜组织病理学研究  35
    3.2.4 细胞病理学观察  35-36
  3.3 讨论  36-37
第四章 PCR 方法对我国沿海地区传染性皮下及造血组织坏死病毒检测  37-49
  4.1 材料与方法  38-41
    4.1.1 采样点分布及所采集样品  38-39
    4.1.2 样品采集方法  39
    4.1.3 核酸的提取  39-40
    4.1.4 IHHNV 的检测  40
    4.1.5 PCR 产物的纯化  40-41
    4.1.6 测序结果与全序列比对  41
  4.2 结果  41-47
    4.2.1 样品采集点分布、采集方法分析  41-42
    4.2.2 凝胶电泳及测序结果分析  42-44
    4.2.3 IHHNV 阳性样品在不同地区分布情况  44-45
    4.2.4 各种虾品种的 IHHNV 带毒差异  45-46
    4.2.5 养殖对虾在不同月份携带 IHHNV 的状况比较  46-47
  4.3 讨论  47-49
第五章 PCR 方法对我国沿海地区白斑综合症病毒的检测  49-56
  5.1 WSSV 的命名和分类  49-50
  5.2 材料与方法  50
    5.2.1 生物样品的采集  50
    5.2.2 样品采集方法  50
    5.2.3 核酸的提取  50
    5.2.4 WSSV 的检测  50
    5.2.5 PCR 产物的纯化  50
    5.2.6 测序结果与全序列比对  50
  5.3 结果  50-55
    5.3.1 样品采集点分布、采集方法分析  50
    5.3.2 凝胶电泳及测序结果分析  50-53
    5.3.3 WSSV 阳性样品在不同地区分布情况  53
    5.3.4 各种虾品种携带WSSV 病毒的差异  53-55
  5.4 讨论  55-56
第六章 PCR 方法对我国沿海地区肝胰腺细小病毒的检测  56-62
  6.1 材料和方法  56-57
    6.1.1 生物样品的采集  56
    6.1.2 样品采集方法  56
    6.1.3 核酸的提取  56-57
    6.1.4 HPV 的检测  57
    6.1.5 PCR 产物的纯化  57
    6.1.6 测序结果与全序列比对  57
  6.2 结果分析  57-61
    6.2.1 凝胶电泳及测序结果分析  57-58
    6.2.2 PCR 检测结果分析  58-61
  6.3 讨论  61-62
第七章 RT-PCR 法对我国沿海地区桃拉综合征病毒和黄头病病毒的检测  62-67
  7.1 材料与方法  62-64
    7.1.1 生物样品的采集  62
    7.1.2 样品采集方法  62-63
    7.1.3 总 RNA 的提取  63
    7.1.4 RT-PCR 检测引物  63-64
    7.1.5 RT—PCR  64
  7.2 结果与分析  64-66
    7.2.1 部分样品的RT-PCR 检测结果  64-65
    7.2.2 样品的RT-PCR 检测结果  65-66
  7.3 讨论  66-67
全文结论  67-68
参考文献  68-73
附录1  73-74
附录2  74-75
附录3  75-76
致谢  76-77
发表的学术论文  77-78

应用分子检测技术对养殖对虾病毒性疾病流行情况的初步研究

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