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体外胃癌间质成纤维细胞模型的建立和生物学特性初步研究

作　者: 张浩
导　师: 毕建威
学　校: 第二军医大学
专　业: 普通外科学
关键词: 胃癌成纤维细胞原代培养细胞模型
分类号: R735.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2007年
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内容摘要

目的:原代培养和鉴定胃间质成纤维细胞,构建体外的胃癌间质成纤维细胞模型,并初步分析其生物学特性。方法:将胃癌细胞系MKN-45的培养上清液加入HGMF中培养,使其发生转化,用光镜、电镜观察其形态改变,MTT法检测其生长情况,免疫细胞化学测定其PCNA、bcl-2、MMP-9、TN表达变化,RT-PCR检测其端粒酶活性,并分析其蛋白结合能力以及条件培养基对MKN-45细胞生长的影响。结果:完成人胃癌间质成纤维细胞的原代分离和培养,胃癌间质成纤维细胞模型转化的HGMF出现多核和畸形核,细胞群体倍增时间较亲代细胞缩短(P<0.05),染色体众数略有增加,分裂指数增高(P<0.05),PCNA、bcl-2、MMP-9、TN表达增强(P<0.001)。端粒酶活性增高(P<0.001),蛋白质合成能力增强(P<0.001),条件培养基促进MKN-45细胞生长(P<0.05)。结论:在体外构建胃癌间质成纤维细胞模型可较好地模拟体内胃癌微环境中成纤维细胞的功能状态,具有肿瘤间质成纤维细胞的某些特性,包括较亲代细胞增殖快,核型发生变化,存活能力增强,可以表达并分泌促进胃癌细胞生长与侵袭的因子。

全文目录

摘要  4
Abstract  4-6
英文缩写  6-8
中文摘要  8-13
英文摘要  13-18
前言  18-21
第一部分胃粘膜成纤维细胞的原代培养、鉴定和培养条件的优化  21-34
  材料与仪器  21-24
  方法  24-29
  结果  29-31
  讨论  31-34
第二部分体外胃癌间质成纤维细胞模型建立及生物学特性初步研究  34-51
  材料与仪器  34-37
  方法  37-43
  结果  43-48
  讨论  48-51
全文总结  51-52
参考文献  52-57
综述肿瘤相关成纤维细胞研究进展  57-77
  参考文献  70-77
在校期间发表论文  77-78
致谢  78

体外胃癌间质成纤维细胞模型的建立和生物学特性初步研究

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