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epo及epo受体与人胃癌之间关系的实验研究

作　者: 刘飞德
导　师: 陈凛
学　校: 中国人民解放军军医进修学院
专　业: 普通外科学
关键词: 胃肿瘤 Epo Epo受体人重组Epo 鸡胚绒毛尿囊膜(CAM) 动物模型治疗
分类号: R735.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2004年
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内容摘要

血管生成被认为是肿瘤发生的重要表现，它作为肿瘤生态系统中的一个重要因素参与、影响肿瘤的生物学行为。促红细胞生成素(erythropoietin，Epo)是促进红细胞生成的必须因子，促进红细胞生成曾经被认为是Epo的唯一生理功能，然而，新近的研究发现，Epo及其受体在多种非造血器官来源的恶性肿瘤中表达，它可以通过调节宿主细胞信号传导通路来发挥很多其他的功能，如促进肿瘤血管生成，抑制细胞凋亡，保护细胞对抗缺氧，在肿瘤进展过程中它可能是一种促血管生成性的因子。本研究旨在探讨Epo及Epo受体与人胃癌之间的关系及其临床意义。目的：检测人胃癌组织中Epo受体的表达情况及肿瘤微血管密度，探讨Epo受体表达与胃癌血管生成及肿瘤生物学形为之间的关系及临床意义；建立人胃癌鸡胚移植模型，将人重组Epo作用于鸡胚移植瘤，观测人重组Epo对鸡胚移植胃癌生长的影响作用，并探讨其作用机制。方法：实验1：应用免疫组化方法检测了50例原发性胃癌及相应正常组织石蜡切片中Epo受体表达情况，通过抗CD31抗原染色计算肿瘤间质微血管密度，探讨胃癌中Epo受体表达与血管生成硕士学位论文中文摘要及胃癌生物学形为之间的关系。实验2:引进SGC一7 901做细月包涪养，并将其接种到鸡胚上建立人胃癌鸡胚移植模型，实验组将人重组EPo作用于鸡胚移植胃癌，对照组给予PBS缓冲液，结合显微摄像及图像分析系统、解刹显微镜下大体观测、原位铺片血管计数、移植瘤称重及组织病理学检测，观察人重组EPo作用下移植瘤的生长及血管生成情况，探讨人重组EPo对鸡胚移植胃癌生长的影响及其作用机制。结果:实验1:胃癌组织微血管密度(MvD，microvesseldens 1 ty)明显高于正常对照组织(25.17士13.02 vs lx.61士4.40，P<0.01)，其与肿瘤分化情况(P>.05)无关，而与肿瘤大小、侵润深度、淋巴结转移、远处转移、P一TNM分期密切相关;在胃癌组织中检测到高水平的EPO受体表达，而在正常胃私膜上皮细胞中耘卸寸到;EPo受体表达与MVD高度牙目关(P<0 .001)，随着EP。受体表达增加，胃癌MVD也明显增加;四期胃癌病人较其他期病人有更高的血管生成程度，EPo受体在胃癌细胞的表达水平与胃癌病人的血管生成情况及病情进展高度相关。实验2:成功建立了人胃癌鸡胚移植模型，移植瘤组织学特点与人胃癌相似;人重组EPO能够显著促进移植瘤的血管生成及肿瘤生长。在人重组Epo作用下，肿瘤血管生成增加，实验组肿瘤周围血管较对照组明显要粗而多，实验组:40.1肚2.n，对照组:30.85士1.93，血管密度明显高于对照组，二者之间差异显著(P<0.01);对移植瘤进行称重，实验组重量为0.1 048士0.00559，对照组为0.0727士0.00589，实验组瘤体重量明显高于对照组，二者差异显著(P<0 .01)。组织学检查提示实验组瘤细胞分布密集，瘤体内新生血管丰富;对照组瘤细胞分布稀疏，瘤体内新生血管较少。结论:血管生成与胃癌关系密切，MVD是衡量胃癌细胞侵袭转 3硕士学位论文中文摘要移能力和判断患者预后的一个有用指标;EPo受体表达水平与胃癌患者的血管生成程度和病情进展高度相关，EPo在胃癌发生发展过程中可能是一种内源性的促进肿瘤血管生成的因子;成功构建人胃癌鸡胚移植模型;人重组EPo显著促进鸡胚移植胃癌血管生成及肿瘤生长，临床上癌性贫血的患者能否应用人重组EPo值得商榷。

全文目录

缩略词表  6-7
中文摘要  7-10
英文摘要  10-15
第一部分胃癌中Epo受体表达与血管生成的关系及临床意义  15-38
  前言  15-17
  材料和方法  17-23
    1 、病例来源及标本采集  17
    2 、主要仪器和试剂  17-18
    3 、免疫组化染色步骤  18-21
    4 、结果判断及统计方法  21-23
  结果  23-29
    1 、免疫组化染色结果  23
    2 、 MVD与各临床病理指标间的关系  23-28
    3 、 EPO受体表达与MVD的关系  28-29
  讨论  29-56
  参考文献  56-38
第二部分人重组EPO对鸡胚移植胃癌生长的影响作用  38-54
  前言  38-40
  材料和方法  40-43
    1 、主要仪器和试剂  40-41
    2 、操作程序  41-43
      2.1 、细胞培养与传代  41
      2.2 、鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)的制备  41
      2.3 、瘤细胞接种与实验分组  41-42
      2.4 、人重组EPO干预  42
      2.5 、原位观测、取材及制备石蜡切片  42
      2.6 、统计学处理  42-43
  结果  43-47
    1 、移植瘤原位观测  43
    2 、移植瘤周围血管计数  43-44
    3 、移植瘤大小比较  44-45
    4 、移植瘤组织学检察  45-47
  讨论  47-54
    1 、人胃癌鸡胚移植模型的建立  47-48
    2 、 rhEPO对鸡胚移植胃癌生长的促进作用  48-50
    3 、 EPO与肿瘤  50-54
结论  54-70
参考文献  70-62
文献综述  62-76
致谢  76-78
附图  78-80

epo及epo受体与人胃癌之间关系的实验研究

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