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表没食子儿茶素没食子酸酯降血糖作用及其机制初步探讨

作　者: 祝宇铭
导　师: 丁红；王竹
学　校: 新疆医科大学
专　业: 营养与食品卫生学
关键词: EGCG α-葡萄糖苷酶抑制剂 2型糖尿病
分类号: R285
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
下　载: 73次
引　用: 2次
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内容摘要

目的:研究表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）体外α-葡萄糖苷酶抑制活性及体内的降血糖作用,初步探讨在降血糖方面的作用机制。方法:①分别以麦芽糖和PNPG为底物,采用葡萄糖氧化酶法和PNPG法,测定EGCG酶活抑制率及半数抑制浓度(IC₅₀)值。再以麦芽糖为底物,建立离体小肠评价体系;测定其在该反应体系下的酶活抑制率及半数抑制浓度(IC₅₀)值。以阿卡波糖作为阳性对照药,比较不同底物及酶源对EGCG抑制酶活的影响。按照Lineweaver-Burk作图法,判断抑制作用类型。体外实验与十五种中草药比较对α-葡萄糖苷酶抑制活性大小。②采用高脂高糖饲料连续10周喂养,诱导产生糖调节受损大鼠模型。以阿卡波糖作为阳性对照,通过口服葡萄糖耐量实验,观测空腹血糖、餐后血糖、胰岛素水平、血清总胆固醇和甘油三酯的变化,并计算胰岛素抵抗指数。用剂量分别为0.2、0.7和1.0 g/kg.d连续灌胃3天,进行麦芽糖负荷实验。并以20、50、200mg/kg.d三个剂量对大鼠连续灌胃6周,分别于灌胃第2和4周进行麦芽糖耐量实验,以观测EGCG对大鼠空腹血糖及餐后血糖的影响。实验结束时,处死大鼠取其肝脏、肾脏、心脏和脂肪等,分别计算各脏器指数;同时,测定空腹血糖、血清总胆固醇、甘油三酯、高密度和低密度脂蛋白胆固醇、肝糖原、肌糖原和肌酐等指标。结果:①本研究最终确定酶浓度为0.5mg/ml和麦芽糖浓度为0.06mol/L为体外和离体小肠酶最适反应体系;测定EGCG对两种底物的IC₅₀值分别为0.150 mg/ml和2.594mg/ml;对离体小肠酶的IC₅₀值为0.837mg/ml。并且是酵母α-葡萄糖苷酶的非竞争抑制剂,其Km=0.1518mol/L, Ki=0.4003mg/ml;其在体外的α-葡萄糖苷酶抑制活性强于十五种中草药。②短期改善糖调节受损大鼠的餐后血糖及糖耐量作用不明显,第2周时,观测保护效果。实验结束时,表没食子儿茶素没食子酸酯的中、高剂量组（50、200mg/kg.d）的大鼠空腹血糖、血清总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇、肝糖原、肌酐和肝肾重量均有不同程度的降低,体内的高密度脂蛋白胆固醇有所升高。结论:表没食子儿茶素没食子酸酯在体外具有一定的α-葡萄糖苷酶抑制活性,可降低血糖和改善糖耐量。其作用机制可能与部分发挥α-葡萄糖苷酶抑制活性有关。

全文目录

摘要  7-8
ABSTRACT  8-10
前言  10-12
材料与方法  12-20
  1. 材料  12-14
    1.1 实验动物与饲料  12-13
    1.2 主要试剂  13
    1.3 试剂配制  13-14
    1.4 主要仪器  14
  2. 方法  14-20
    2.1 体外的AGI 活性评价  14-16
    2.2 离体小肠 AGI 活性评价  16
    2.3 EGCG 抑制作用类型的确定  16
    2.4 EGCG 与十五种中草药提取液体外的AGI 活性比较  16
    2.5 体内降血糖作用评价  16-19
    2.6 质量控制  19
    2.7 统计学处理  19-20
结果  20-35
讨论  35-43
小结  43-44
致谢  44-45
参考文献  45-51
综述  51-58
攻读硕士学位期间发表的学术论文  58-59
导师评阅表  59

表没食子儿茶素没食子酸酯降血糖作用及其机制初步探讨

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