学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

全反式维甲酸对高糖所致大鼠肾小球系膜细胞增殖的影响

作　者: 李莹屏
导　师: 刘春
学　校: 石河子大学
专　业: 内科学
关键词: 糖尿病肾病高糖系膜细胞全反式维甲酸
分类号: R587.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
下　载: 9次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

目的：糖尿病肾病(Diabetic nephropathy, DN)是糖尿病(Diabetes mellitus, DM)常见慢性并发症之一,也是导致终末期肾病(End-stagerenal disease, ESRD)的主要原因。DN早期病理改变为肾小球系膜细胞(mesangial cells, MCs)数增多,细胞外基质(extracellular matrix, ECM)积聚,基底膜增厚。因此寻求一种早期干预的药物来阻止肾功能进展非常重要。炎症反应是DN发生、发展的重要机制。实验发现全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)对系膜增生性肾小球肾炎的动物模型有保护作用,而且可能是通过抗炎机制起作用。MCs存在维甲酸受体家族的所有亚型,本实验据此观察ATRA是否对DN有保护作用。方法:肾小球系膜细胞分别培养于低糖、高糖环境中12h、24h、48h、72h,采用倒置相差显微镜下观察法、MTT比色法观察系膜细胞的增殖情况；在引起增殖的时间段内,体外培养的大鼠MCs,加入不同浓度的ATRA(0、10-8、10-7、10-6mol/L),采用MTT比色法观察系膜细胞12h、24h、48h后的增殖情况；ELISA法测定细胞上清液中Ⅳ型胶原的含量。结果:1、高糖对MCs的增殖呈现时间依赖性,24h时增殖效果最明显,与对照组相比,OD值显著的增大(P<0.01)；作用72h时,高糖组OD值低于对照组,高糖抑制MCs增殖。MCs在高糖刺激12、24、48h下存活率分别为138.26%、191.84%、132.16%,由此可见在48h时间段内高糖促进MCs增生。ATRA有抑制高糖所致MCs增殖作用,并呈剂量时间依赖性。2、高糖使系膜细胞上清液中Ⅳ型胶原含量较正对照组增加,ATRA干预可减少高糖所致系膜细胞Ⅳ型胶原含量的增加。ATRA作用高糖环境中的MCs,随ATRA浓度的增高及作用时间的延长,各浓度组与高糖组比较,在ATRA浓度为10-7、10-6mol/L时,12、24、48h差异均有统计学意义(P<0.01), ATRA明显抑制了MCs的增生。同一时点ATRA各浓度组之间存在明显剂量效应负相关(r48 h=-0.488, P=0.047); ATRA各时间点均以10-6mol/L浓度抑制作用最强。结论：1.高糖在一定时段内具有刺激系膜细胞增殖的作用,ATRA对高糖所致MCs增殖具有抑制作用,且随ATRA剂量增大,刺激时间的延长,抑制作用增强。2.高糖使系膜细胞上清液中Ⅳ胶原分泌增多,并呈时间依赖性。ATRA能够降低Ⅳ型胶原的含量,且随ATRA剂量的增大,作用时间的延长,其作用增强。3.ATRA对DN起到早期保护作用。

全文目录

摘要  6-7
Abstract  7-8
英文缩略词表  8-9
前言  9-12
材料与方法  12-18
  1. 材料  12-14
    1.1 细胞株  12
    1.2 细胞培养试剂  12
    1.3 细胞实验试剂  12
    1.4 细胞培养常用玻璃器皿及耗材  12
    1.5 主要仪器  12-13
    1.6 主要试剂配制  13-14
  2. 方法  14-17
    2.1 肾小球系膜细胞复苏  14
    2.2 系膜细胞传代培养  14
    2.3 系膜细胞冻存  14
    2.4 MTT法检测高糖对大鼠肾小球系膜细胞的作用  14-15
    2.5 MTT测定ATRA对高糖所致大鼠肾小球系膜细胞增殖的影响  15-16
    2.6 上清液的提取及Ⅳ型胶原检测  16-17
  3. 统计学处理  17-18
结果  18-22
  1. 系膜细胞形态学观察  18-19
  2. 高糖对肾小球系膜细胞作用的时效变化  19
  3. ATRA对高糖培养大鼠系膜细胞增殖的影响  19-20
  4. 细胞上清液中Ⅳ型胶原含量的变化  20-22
讨论  22-25
结论  25-26
参考文献  26-29
文献综述  29-36
  参考文献  33-36
致谢  36-37
作者简历  37
在校期间发表的文章  37-38
导师评阅表  38

全反式维甲酸对高糖所致大鼠肾小球系膜细胞增殖的影响

内容摘要

全文目录

相似论文