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Angiopoietin-1对高糖培养内皮细胞连接相关蛋白的影响
作 者: 胡尽香
导 师: 杨亦彬
学 校: 遵义医学院
专 业: 内科学
关键词: 高糖 内皮细胞 细胞连接蛋白 促血管生成素-1
分类号: R363
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
下 载: 2次
引 用: 0次
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内容摘要
目的:观察高糖培养人脐静脉内皮细胞连接相关蛋白(occludin、VE-cadherin和connexin40)的表达变化,探讨Ang-1对高糖环境下这些内皮细胞连接相关蛋白的影响。方法:将体外培养的人脐静脉内皮细胞随机分为正常组(5.5 mmol/L葡萄糖),甘露醇组(5.5 mmol/L葡萄糖+24.5 mmol/L甘露醇),高糖组(30 mmol/L葡萄糖),Ang-1干预组(30mmol/L葡萄糖+0.25mg/L Ang-1),用相应的培养基培养24h、48h后收集细胞,分别用实时定量聚合酶链反应(Real-Time PCR)检测各组脐静脉内皮细胞occludin、VE-cadherin和connexin 40 mRNA的表达,免疫荧光、免疫组化方法检测各组脐静脉内皮细胞occludin、VE-cadherin和connexin 40蛋白的表达。结果:(1)正常组和甘露醇组细胞均有occludi、VE-cadherin和connexin 40 mRNA的表达,但两组间无明显统计学差异(P>0.05);高糖组细胞occludin、VE-cadherin和connexin 40 mRNA的表达均较正常组下调(P<0.01),并呈时间依赖性(24h vs 48h,P<0.05);Ang-1干预组细胞occludin、VE-cadherin和connexin 40 mRNA的表达虽低于正常组(P<0.05),却较高糖组表达上调(P<0.05),(2)免疫荧光和组化显示occludin、VE-cadherin和connexin 40主要表达于胞膜和胞浆,正常组和甘露醇组细胞均有表达,但两组间无明显统计学差异(P>0.05);高糖组细胞occludin、VE-cadherin和connexin 40蛋白表达均较正常组下调(P<0.01),并呈时间依赖性(24h vs 48h,P<0.05);Ang-1干预组细胞occludin、VE-cadherin和connexin 40蛋白表达虽低于正常组(P<0.05),却较高糖组表达上调(P<0.05),(3)细胞occludin、VE-cadherin和connexin蛋白表达水平彼此呈正相关。结论:高糖培养内皮细胞连接相关蛋白occludin、VE-cadherin和connexin 40表达呈时间依赖性下调;外源性给予Ang-1,可上调occludin、VE-cadherin和connexin 40的表达,改善高糖对内皮细胞连接的损伤。
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全文目录
英文缩略词表 5-6中文摘要 6-7Abstract 7-9前言 9-11材料与试剂 11-13实验方法 13实验方法 13-20结果 20-33讨论 33-37结论 37-38参考文献 38-42综述 42-52 参考文献 48-52致谢 52-53附图 53-60作者简介 60
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中图分类: > 医药、卫生 > 基础医学 > 病理学 > 病理生理学
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