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抗MHC Ⅱ单克隆抗体对猪外周血混合淋巴细胞培养的影响

作　者: 方东林
导　师: 曹利平
学　校: 浙江大学
专　业: 外科学
关键词: 抗MHC II单克隆抗体小型猪混合淋巴细胞培养细胞增殖
分类号: R392
类　型: 硕士论文
年　份: 2006年
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内容摘要

目的观察不同浓度抗MHCⅡ单克隆抗体对猪外周血混合淋巴细胞的影响。方法应用混合淋巴细胞反应(MLR)模型，建立对照组，观察不同浓度抗MHCⅡ单克隆抗体预处理供体外周血淋巴细胞，并进一步加入受体淋巴细胞培养，用MTT方法检测MLR中淋巴细胞增殖的影响。进一步行CFSE染色后上流式细胞仪检测抗体浓度为10ug／ml时对照组与实验组对淋巴细胞增殖率，观察抗MHCⅡ单克隆抗体对MLR中淋巴细胞增殖的影响。结果培养48小时MTT方法检测1 ug／ml、5 ug／ml、10ug／ml、50ug／ml、100ug／ml不同浓度的抗体对淋巴细胞增殖抑制率平均分别为27.6％、40.9％、65.1％、66.9％、62.9％(P＜0.01与对照组比较)。培养72小时其抑制率进一步提高，有时间依赖性。当抗体浓度为10ug／ml或以上时获得混合淋巴细胞培养最高的抑制率。进一步行CFSE染色后上流式细胞仪检测抗体浓度为10ug／ml时对照组与实验组淋巴细胞增殖率平均分别为72.12％和14.87％(P＜0.01)。结论MLR模型中抗MHCⅡ单克隆抗体能抑制淋巴细胞增殖活化，并且有一适宜的抗体浓度。

全文目录

中文摘要  4-6
英文摘要  6-8
一、前言  8-9
二、材料与方法  9-13
  (一) 试剂、仪器与实验动物  9-10
    1.主要生化试剂与仪器  9-10
    2.实验动物  10
  (二) 方法  10-13
    1.外周血分离单个核细胞  10-11
    2.供体猪淋巴细胞的处理  11
    3.受体猪淋巴细胞的处理  11
    4.混合淋巴细胞的培养  11-12
    5.MTT显色法观察抗MHC Ⅱ单克隆抗体对混合淋巴细胞培养抑制作用的观察  12
    6.CFSE染色后用流式细胞仪观察抗MHC Ⅱ单克隆抗体对混合淋巴细胞培养抑制作用的观察  12
    7.CFSE染色  12-13
  (三) 统计学处理  13
三、结果  13-17
  (一) MTT显色法观察抗MHC Ⅱ单克隆抗体对混合淋巴细胞培养抑制作用的影响  13-14
  (二) 用MTT显色法进一步观察抗MHC II单克隆抗体对混合淋巴细胞培养细胞增殖抑制效应与浓度和时间的关系  14-16
  (三) 流式细胞仪分析淋巴细胞增殖抑制情况  16-17
四、分析与讨论  17-20
五、结论  20-21
六、参考文献  21-24
附:文献综述  24-34
致谢  34

抗MHC Ⅱ单克隆抗体对猪外周血混合淋巴细胞培养的影响

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