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初步探讨用2BS细胞系建立BACE研究的细胞模型

作　者: 朱云艳
导　师: 刘建源；毛泽斌
学　校: 北京生物制品研究所
专　业: 免疫学
关键词: 阿尔茨海默氏病 BACE 细胞模型酶活性
分类号: R749.16
类　型: 硕士论文
年　份: 2006年
下　载: 85次
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内容摘要

阿尔茨海默氏病(Alzheimer’s disease，AD)是衰老相关的神经退行性疾病。由于它严重影响老年人的身体健康和生活质量，给家庭和社会造成沉重的负担，因此对AD的研究成为当今社会老年病研究的热点。对其致病机理的研究及开发治疗性药物和疫苗即成为AD研究的重点。目前，普遍被认同的AD致病机理是Aβ蛋白在脑中的积累形成淀粉样斑块，造成神经元细胞损伤。Aβ是由APP(淀粉样前体蛋白)酶解产生的，而BACE正是APP加工过程中的关键酶。BACE的重要作用使其成为当前AD治疗性药物研究的靶点。治疗性药物或疫苗开发出来，都需要进行安全性和有效性的评价，而有效性评价中一项重要的内容就是建立细胞模型，那么建立用于BACE研究的细胞模型将具有重要的意义。目前，用于BACE研究的细胞模型多为神经元细胞，细胞培养有相当的难度，转基因动物模型不但价格昂贵且无法在传代过程中保持稳定的基因型。有研究表明：衰老神经元细胞中BACE活性升高。如果我们采用比较容易培养的2BS细胞可以达到同样的研究目的，即BACE在衰老2BS细胞中的表达变化与在神经元中的表达变化具一致性，那么这一细胞模型对于今后BACE的一些功能性研究及针对BACE的药物筛选及研究将有重要的意义。 1．2BS复制衰老模型的建立及衰老相关的生物学指标的检测首先，需要验证BACE与衰老这一生理过程存在怎样的联系。我们以2BS细胞为研究对象，将其进行1：2传代建立了衰老模型，并取不同代次细胞，通过镜下形态学特点的观察，MTT法，SA-β-gal染色，流式细胞仪检测细胞周期验证了细胞的衰老。通过镜下观察，发现58代细胞具备复制衰老的细胞特征：胞体变大，细胞变

全文目录

中文摘要  3-6
英文摘要  6-9
英文缩略语表  9-10
引言  10-12
第一部分 2BS复制衰老细胞模型的建立及衰老相关的生物学指标的检测  12-20
  概述  12-13
  材料  13-14
  方法  14-15
  结果  15-19
  结论  19-20
第二部分氧化因素作用下2BS细胞,Hela细胞的抗凋亡能力比较及氧化因素对Hela细胞中BACE蛋白表达的影响  20-33
  概述  20-21
  材料  21-22
  方法  22-24
  结果  24-32
  结论  32-33
第三部分 BACE在衰老和年轻的2BS细胞中的表达  33-55
  概述  33-34
  材料  34-37
  方法  37-45
  结果  45-53
  结论  53-55
第四部分衰老和年轻2BS细胞中BACE蛋白活性的测定  55-63
  概述  55-57
  材料  57-58
  方法  58-59
  结果  59-62
  结论  62-63
讨论  63-73
结束语  73-74
综述  74-95
参考文献  95-106
附录  106-108
致谢  108

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