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鸡大肠杆菌超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的基因检测及其感染的化学治疗

作　者: 匡秀华
导　师: 胡功政
学　校: 河南农业大学
专　业: 基础兽医学
关键词: 大肠杆菌超广谱 β-内酰胺酶耐药性聚合酶链式反应 TEM型
分类号: S858.31
类　型: 硕士论文
年　份: 2006年
下　载: 85次
引　用: 4次
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内容摘要

随着头孢菌素类药物如头孢曲松等在临床上的推广应用，细菌的耐药问题，尤其是产ESBLs的大肠杆菌的耐药问题更趋严重。2004年12月至2005年10月间，我们用NCCLS推荐的检测ESBLs方法对从河南省、河北省等地中分离出的23株临床菌的进行检测，及本实验室保存的标准不产酶菌用亚(MIC)浓度的药物诱导产ESBLs产生情况，用二倍稀释法检测产ESBLs菌株的MIC值，并用分子生物学方法对证实产ESBLs的大肠杆菌进行了耐药基因的初步分型。结合MIC测定结果，通过模拟大肠杆菌模型检测用于治疗产ESBLs菌的药物效果。试验结果表明，从临床分离菌中分离出23株致病菌，其中18株为大肠杆菌，5株为阴沟肠杆菌等。23株细菌均产BLA，其中产ESBLs菌有4株，且均为大肠杆菌，检出率为17.39％(4／23)；标准不产酶菌株经药物诱导后均能产BLA和ESBLs，临床产BLA的菌株用诱导后也能产ESBLs。诱导菌株与临床分离菌的AmpC酶检测均为阴性。标准不产酶菌株被诱导产酶前后对20种抗生素的MIC变化显著，由敏感变为耐药；临床菌株中产ESBLs对19种抗生素的耐药率为25％～100％，非产ESBLs菌对19种抗生素的耐药率低于产ESBLs菌株，碳青酶烯类药物亚安培南和美罗培南对两种菌株的敏感率均为100％；产ESBLs菌株对多种抗生素表现出多重耐药性和交叉耐药性；抗生素／β-内酰胺类联用及不同类别的抗生素联用均可明显提高产ESBLs菌对药物的抗菌活性。产酶菌株(包括临床分离和诱导产酶菌)用TEM型引物经PCR扩增均扩增出861bp特异性目的片断，用SHV型引物经PCR扩增均未扩增出目的片断；PCR产物经克隆后测序，对序列结果分析表明，诱导产酶菌主要为TEM-116型ESBLs；临床分离产酶菌主要为TEM-96型ESBLs。诱导菌中发现了两个新的亚型，暂命名为TEM-2V，TEM-3V，临床分离茵中发现了一个新的亚型，暂命名为TEM-4V。体内治疗实验表明，体内治疗实验表明，对产ESBLs菌，β-内酰胺类抗生素单用的治愈率与有效率为21.20％～42.48％，23.33％～46.67％；β-内酰胺类抗生素／β-内酰胺类抑制剂的治愈率和有效率为30％～65.60％，33.33％～66.67％；不同抗生素的联用的治愈率和有效率为64.32％～78.67％，66.67％～80.00％。体内治疗实验与体外MIC的测定结果一致，且取得了预期的治疗效果，为新药的开发提供了药理基础。

全文目录

中文摘要  6-7
文献综述  7-18
实验正文  18-56
  实验一鸡大肠杆菌 ESBLs的检测及耐药性分析  18-40
    引言  18-19
    材料  19
    方法  19-21
    结果  21-35
    讨论与分析  35-38
    小结  38-40
  实验二鸡大肠杆菌 ESBLs的基因型检测  40-51
    引言  40-41
    材料  41
    方法  41-44
    结果  44-49
    分析与讨论  49-50
    总结  50-51
  实验三产 ESBLs鸡大肠杆菌感染的治疗试验  51-56
    引言  51-52
    材料  52
    方法  52-53
    结果  53-55
    讨论与分析  55
    总结  55-56
参考文献  56-64
英文摘要  64-65
附录  65-79

鸡大肠杆菌超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的基因检测及其感染的化学治疗

内容摘要

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