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鸡肝微粒体细胞色素P450的初步研究

作　者: 杨海峰
导　师: 江善祥
学　校: 南京农业大学
专　业: 基础兽医学
关键词: 细胞色素P450 活性评价肝微粒体酶诱导鸡
分类号: S859.7
类　型: 硕士论文
年　份: 2006年
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内容摘要

本文采用体外微粒体酶生化测定和体内探针药物代谢法评价了鸡肝微粒体细胞色素P450酶系活性，探讨了苯巴比妥和地塞米松对鸡肝微粒体CYP450的诱导作用。 1 鸡肝微粒体细胞色素P450酶系活性检测方法的建立 12只60日龄依莎公鸡颈静脉放血处死，应用差速离心法提取肝微粒体，Bradford法测定肝微粒体蛋白含量，紫外分光光度法测定CYP450酶系活性。结果显示：肝微粒体蛋白含量为11.32±1.43mg·g^-1，细胞色素P450含量为0.71±0.08nmol·mg^-1，NADPH-细胞色素C还原酶活力为3.01±0.26nmol·mg^-1·min^-1，氨基比林-N-脱甲基酶（AND）活力为2.36±0.18nmol·mg^-1·min^-1，红霉素-N-脱甲基酶（ERND）活力为1.21±0.11nmol·mg^-1·min^-1，苯胺-4-羟化酶（AH）活力为0.25±0.03nmol·mg^-1·min^-1。结果表明本实验所建立的鸡肝微粒体细胞色素P450活性的检测方法灵敏可靠，可用于CYP450的系统研究。 2 探针药物安替比林静注在鸡体内的药动学研究健康鸡12只，一次静脉注射CYP450探针药物安替比林20mg·kg^-1，反相高效液相色谱法（RP-HPLC）法测定血浆中安替比林的浓度，进行药代动力学研究。结果显示：血浆中安替比林在0.1～30μg·mL^-1浓度范围内，药物峰面积与浓度线性关系良好（r=0.9995），最低检测限为0.1μg·mL^-1，低、中、高浓度(0.5、5.0、20μg·mL^-1)的血浆标准品的相对回收率分别为93.44％、95.88％、97.21％，日内和日间变异系数小于5％。安替比林静注后药-时数据符合二室开放模型，主要药动学参数为：CL=0.041±0.01L·kg^-1·min^-1，T_1／2β=29.35±6.57min，AUC=503.25±92.34(μg·mL^-1)·min。结果表明：本实验所建立的安替比林血药浓度测定的RP-HPLC法简便、快速、灵敏、准确、可靠，可用于安替比林消除动力学模型的研究。安替比林静注后在鸡体内分布和消除均较快，所得药动学参数可为探针药物法评价鸡CYP450活性提供理论依据。 3 苯巴比妥和地塞米松对鸡细胞色素P450的诱导作用研究采用体外肝微粒体酶生化测定和体内探针药物（安替比林）代谢的方法，研究苯巴比妥（PB）和地塞米松（DEX）对鸡细胞色素P450（CYP450）有无诱导作用。将

全文目录

中文摘要  6-8
英文摘要  8-10
缩略符号  10-11
引言  11-12
第一章文献综述  12-35
  1 细胞色素P450概述  12-15
  2 影响CYP450活性的因素  15-22
  3 CYP450与药物代谢  22-23
  4 CYP450的研究方法  23-24
  5 CYP450研究的应用前景  24-26
  6 禽类CYP450研究进展  26-28
  参考文献  28-35
第二章鸡肝微粒体细胞色素P450活性检测方法的建立  35-46
  1 材料与方法  35-39
  2 结果  39-42
  3 讨论  42-43
  4 结论  43
  参考文献  43-46
第三章探针药物安替比林静注在鸡体内的药动学研究  46-59
  1 材料与方法  46-49
  2 结果  49-54
  3 讨论  54-55
  4 结论  55-56
  参考文献  56-59
第四章苯巴比妥和地塞米松对鸡细胞色素P450诱导作用的研究  59-72
  1 材料与方法  59-62
  2 结果  62-67
  3 讨论  67-69
  4 结论  69
  参考文献  69-72
全文结论  72-73
致谢  73-74
攻读硕士学位期间发表的论文  74

鸡肝微粒体细胞色素P450的初步研究

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