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共轭亚油酸对小鼠肝脏生脂与脂解基因表达的影响

作　者: 陈会敏
导　师: 伍晓雄
学　校: 华中农业大学
专　业: 基础兽医学
关键词: 小鼠共轭亚油酸半定量PCR 脂类代谢基因表达
分类号: S816
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

共轭亚油酸(conjugated linoleic acid, CLA)是含有共轭双键的不饱和脂肪酸,有多种几何异构体和位置异构体。CLA最先在经研磨过的牛肉粒中被发现。多年的研究发现,CLA具有降低脂肪含量、减轻体重、抗癌、抗动脉粥样硬化、增强免疫力,改善胰岛素抵抗等多种生理功能,现被誉为“21世纪的新型营养素”。虽然CLA现已经成为各国研究人员研究的重点,但有关其调控机制仍然不清楚。本文的主要工作分以下几个方面：1二十四只雌性云南昆明小鼠随机分为两组,试验组和对照组分别饲喂含1%CLA和1%大豆油的日粮。每周称重一次,记录小鼠体增重情况。试验表明,试验组小鼠体增重降低,提示CLA能增强小鼠脂肪代谢。2采集血样,分析各组的小鼠血糖(GLU)、胆固醇(CHO)、甘油三脂(TG)、低密度脂蛋白(LDL)和高密度脂蛋白(HDL)的浓度。结果表明,试验组小鼠血清中LDL、CHO、TG、GLU水平极显著低于对照组小鼠(P<0.01)；试验组小鼠血清中HDL水平极显著高于对照组(P<0.01)。试验表明,CLA可能通过影响GLU、CHO、TG、LDL、HDL浓度的途径影响脂质代谢。3采集小鼠肝脏,提取肝脏总RNA,经RT-PCR反应合成cDNA第一链。设计相应的引物进行半定量PCR,应用凝胶成像系统和Bandscan软件对结果进行分析。结果表明,GAPDH在试验组和对照组小鼠中表达稳定；试验组生脂基因PPARγ和FAS表达极显著低于对照组(P<0.01)；试验组脂解基因HSL和TGH表达明显高于对照组,差异极显著(P<0.01)。结果表明,CLA能够促进脂肪代谢,提示CLA对脂肪代谢的影响可能是通过调控脂肪代谢相关基因来实现的。本研究可为后续研究奠定基础,也为将来研究CLA调控脂肪代谢机制提供依据。

全文目录

摘要  6-7
ABSTRACT  7-9
缩略语表  9-10
1 文献综述  10-21
  1.1 CLA的结构  10-11
  1.2 CLA的来源  11-12
  1.3 CLA的主要生理功能及应用  12-15
    1.3.1 抗癌作用  13
    1.3.2 抗动脉粥样硬化作用  13-14
    1.3.3 抗Ⅱ型糖尿病作用  14
    1.3.4 降低体脂沉积  14-15
  1.4 CLA与脂肪代谢  15-17
  1.5 肝脏中参与脂肪代谢的酶与基因  17-21
    1.5.1 PPARγ与脂肪代谢  18-19
    1.5.2 FAS与脂肪代谢  19
    1.5.3 HSL与脂肪代谢  19-20
    1.5.4 TGH与脂肪代谢  20-21
2 研究目的与意义  21-22
3 材料与方法  22-29
  3.1 材料  22-23
    3.1.1 饲料与实验动物  22
    3.1.2 主要试剂及试剂盒  22
    3.1.3 主要仪器设备  22-23
    3.1.4 PCR引物  23
  3.2 方法  23-29
    3.2.1 小鼠的饲养和管理  23
    3.2.2 样品的采集与处理  23
    3.2.3 血清中葡萄糖、总胆固醇、甘油三酯浓度的测定  23-25
    3.2.4 血清中低密度脂蛋白(LDL)和高密度脂蛋白(HDL)浓度的测定  25-26
    3.2.5 RNA的分离和RT-PCR检测  26-28
    3.2.6 数据处理  28-29
4 结果与分析  29-35
  4.1 小鼠血清各指标的变化  29
  4.2 小鼠体增重情况  29-30
  4.3 小鼠肝脏RNA检测  30-31
  4.4 小鼠肝脏生脂与脂解基因表达水平  31-35
    4.4.1 内参基因GAPDH循环数的确定  31
    4.4.2 HSL循环数的确定  31
    4.4.3 PPARγ循环数的确定  31-32
    4.4.4 TGH表达水平  32
    4.4.5 FAS表达水平  32-33
    4.4.6 PPARγ表达水平  33
    4.4.7 HSL表达水平  33-35
5 讨论  35-39
小结  39-40
参考文献  40-47
致谢  47-48
研究生个人简历  48

共轭亚油酸对小鼠肝脏生脂与脂解基因表达的影响

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