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KIT基因与荣昌猪毛色相关性研究

作　者: 潘红梅
导　师: 张家骅；王金勇
学　校: 西南大学
专　业: 基础兽医学
关键词: KIT基因荣昌猪毛色 PCR-SSCP 焦磷酸测序
分类号: S828
类　型: 硕士论文
年　份: 2006年
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内容摘要

通常人们对白毛色猪肉较为偏爱。自中世纪以来，人们就开始对白色家猪进行选育，在选育过程中，通常将有杂色斑点的白猪淘汰。但由于毛色形成的原因极为复杂，隐性杂毛色等位基因较多，所以经过近100年的努力，人们仍无法将无斑点白猪的基因型固定下来。KIT基因对猪的白毛色的形成起起非常重要的作用，为了阐明荣昌猪白毛色形成的分子机制，本研究以荣昌猪(包括全白色和其他各种类型毛色)、杜洛克、大白和长白猪为实验动物，以编码肥大细胞生长因子受体的KIT基因为候选基因，通过聚合酶链式反应单链构象多态性分析(PCR-SSCP)和焦磷酸测序(pyrosequencing)，研究KIT基因的多态性和KIT基因的突变比例，分析KIT基因和荣昌猪毛色的相关性，为猪毛色遗传定向选育奠定基础。结果：(1)通过PCR-SSCP方法检测了105头不同毛色类型的荣昌猪、30头杜洛克、40头长白和10头大白每一个体的KIT基因多态性。结果发现，相同品种中不同个体都得到相同的KIT基因条带，其中长白和大白有同样的4条带，而荣昌猪和杜洛克为相同的2条带。 (2)选择具有不同带型的样品，对其KIT基因17、18内含子进行双向测序，结果发现大白和长白猪17内含子第一核苷酸处发生了G→A的替换突变，18内含子内发生了4碱基的剪接突变，而荣昌猪和杜洛克上都没有发现这两种突变。 (3)从PCR-SSCP检测过的样品中，选择10头荣昌猪进行焦磷酸测序，获得不同毛色类型的荣昌猪KIT基因内含子17的第一核苷酸处G→A突变比例都为0％，再次证实荣昌猪不存在G→A的突变。 (4)对26头长白猪和4头大白猪的焦磷酸测序结果发现，白色猪种中不同个体G→A的突变比例差异较大，说明表型为全白的猪种不一定全为显性白基因型，很多个体中存在不同类型的杂合隐性基因。 (5)对杜洛克进行PCR—SSCP检测和焦磷酸测序结果都证明在其KIT基因的17、18内含子中均没有突变产生。结论：(1)荣昌猪与长白、大白猪虽然在毛色上十分相似，但荣昌猪的白毛色可能不属于显性白毛色，推测它们的白色属于两种不同的毛色遗传体系，遗传本质上存在极大的差异。 (2)KIT基因的G→A的突变和AGTT缺失可能不是导致白毛色产生的唯一决定性突变，也许在KIT基因的其他区域还存在别的未被发现的决定性突变位点，这可能是导致荣昌猪白毛色形成的原因。另外，影响黑色素形成的基因较多，各基因间存在互作，这可能也是影响

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