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哈萨克羊和中国美利奴羊DRB1基因SSCP多态性与细粒棘球蚴病遗传抗性的关联分析

作　者: 温青娜
导　师: 贾斌
学　校: 石河子大学
专　业: 动物遗传育种与繁殖
关键词: 绵羊 包虫病 MHC-DRB1 PCR-SSCP
分类号: S826
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
下　载: 23次
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内容摘要


细粒棘球蚴病(Cystic Echinococcosis, CE)又称包虫病,是由细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus, E.g)的幼虫(续绦期)寄生在各种中间宿主(人和食草动物如牛、羊)的肝脏、肺脏等器官内发育为包囊引起的一种人畜共患病。新疆是我国重要的畜牧业生产基地,包虫病已经成为新疆最严重的一种危害人类健康的地方流行病,给新疆畜牧业生产造成很大损失。近年来,世界各国对包虫病的研究已经深入到细胞和分子水平,并取得了很大成就,其发病率已明显下降,但要从根本上控制和消灭这种疾病却非常困难。主要组织相容性复合物(major histocompatibility complex,MHC)是由紧密连锁、高度多态的基因位点所组成的复合体,广泛存在于脊椎动物中。MHC分子主要与外来抗原相结合并将这些抗原递呈给T淋巴细胞,最终引起机体的免疫反应,因此,MHC与许多疾病的抗性、易感性、免疫应答以及生产性能都有密切关系。MHC作为疾病的抗性和易感性的候选基因,已经成为当今分子免疫遗传的研究热点之一。本研究通过对哈萨克羊和中国美利奴羊(新疆军垦型)的MHC-DRB1基因多态性进行研究,并探讨MHC-DRB1基因与包虫病的相关性,为利用标记辅助选择选育绵羊抗病新品种以及进一步研究MHC的抗病机理打下前期基础,试验结果如下：1.采用巢式PCR-SSCP对200只哈萨克羊和205只中国美利奴羊(其中各有100只和105只绵羊感染了包虫病)的MHC-DRB1第2外显子进行多态性研究,实验结果表明,哈萨克羊和中国美利奴羊的MHC-DRB1基因第2外显子均存在丰富的多态性,两品种绵羊均检测出15个等位基因,基因型分别有37和41种。2.对哈萨克羊和中国美利奴羊包虫病阴性羊和阳性羊的MHC-DRB1等位基因频率和基因型频率分别进行比较分析,结果显示哈萨克羊中等位基因B、H和F(P<0.01)与细粒棘球蚴病抗性相关；基因型FF和GH(P<0.05)与细粒棘球蚴病抗性相关；等位基因K和G(P<0.01)与细粒棘球蚴病易感性相关；基因型GG(P<0.01)和KK(P<0.05)与细粒棘球蚴病易感性相关。中国美利奴羊群体中等位基因D(P<0.05)与细粒棘球蚴病抗性相关；基因型LG(P<0.05)与细粒棘球蚴病抗性相关；等位基因K(P<0.05)与细粒棘球蚴病易感性相关；基因型GF(P<0.05)与细粒棘球蚴病易感性相关。3.χ2适合性检验结果表明,哈萨克羊和中国美利奴羊检测群体的MHC-DRB1基因第2外显子的SSCP带型均未达至Hardy-Weinberg平衡(P<0.01)。4.对两绵羊品种部分基因型进行克隆测序,结果表明MHC-DRB1基因外显子2存在多位点碱基突变,大部分导致了氨基酸的变异。

全文目录


中文摘要  5-6
Abstract  6-7
目录  7-9
本文部分缩写的中英文对照  9-10
前言  10-11
第一篇 文献综述  11-20
  1 包虫病的研究进展  11-14
    1.1 包虫病的种类与分布  11-12
    1.2 病原学  12
    1.3 生活史  12-13
    1.4 包虫病的防治  13-14
  2 MHC的研究  14-19
    2.1 MHC基因的结构、特点  15-17
    2.2 MHC的遗传特征  17
    2.3 绵羊MHC-DRB1基因多态性的研究进展  17-18
    2.4 MHC多态性与家畜抗病性研究概况  18-19
  3 本研究的目的和意义  19-20
第二篇 实验研究  20-46
  第一章 哈萨克羊DRB1基因SSCP多态性与细粒棘球蚴病遗传抗性的关联分析  20-37
    1 材料和方法  20-26
      1.1 实验材料  20
      1.2 试验方法  20-26
    2 结果与分析  26-33
      2.1 哈萨克羊血液提取.基因组DNA  26
      2.2 MHC-DRB1第2外显子的扩增结果  26
      2.3 PCR-SSCP检测结果  26-27
      2.4 哈萨克羊MHC-DRB1基因多态性与包虫病的抗性或易感性分析  27-29
      2.5 Hardy-Weinberg的χ2适合性平衡检验结果  29-30
      2.6 哈萨克羊部分基因型克隆测序结果与分析  30-33
    3. 小结与讨论  33-37
      3.1 巢式PCR的应用  33
      3.2 PCR-SSCP检测方法  33-35
      3.3 哈萨克羊MHC-DRB1多态性与细粒棘球蚴病遗传抗性的关联分析  35-37
  第二章 中国美利奴羊(新疆军垦型)DRB1基因SSCP多态性与细粒棘球蚴病遗传抗性的关联分析  37-46
    1 材料和方法  37
      1.1 实验材料  37
      1.2 实验方法  37
    2 结果与分析  37-44
      2.1 中国美利奴羊血液提取基因组DNA  37
      2.2 中国美利奴羊MHC-DRB1第2外显子的扩增结果  37-38
      2.3 PCR-SSCP检测结果  38
      2.4 中国美利奴羊MHC-DRB1基因多态性与包虫病的抗性或易感性分析  38-41
      2.5 Hardy-Weinberg的χ2适合性平衡检验结果  41-42
      2.6 中国美利奴羊部分基因型克隆测序结果与分析  42-44
    3. 小结与讨论  44-46
全文结论  46-47
参考文献  47-53
附录  53-57
  1 常用溶液的配制  53-55
  2. 常用试剂的配制  55
  3. 克隆中的试剂和培养基的配制  55-57
致谢  57-58
作者简介  58
硕士期间发表的论文  58-59
导师评阅表  59

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中图分类: > 农业科学 > 畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂 > 家畜 > 羊
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