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人工进化丙型肝炎病毒（HCV）C和E1区噬菌体展示文库的构建及初步筛选

作　者: 赵甫涛
导　师: 贾战生；李瑾革
学　校: 第四军医大学
专　业: 内科学
关键词: DNA改组定向进化肝炎病毒丙型噬菌体展示技术
分类号: R373
类　型: 硕士论文
年　份: 2006年
下　载: 75次
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内容摘要

丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus，HCV)是引起慢性肝脏疾病的主要原因之一，并与肝硬化和肝癌的发生密切相关。全世界约有1.7亿HCV感染者，HCV的感染越来越引起人们的重视。HCV基因序列的高度变异性，主要表现为病毒各种基因型、亚型及准种变异的存在和免疫逃避现象，使病毒得以逃避宿主免疫系统的作用而造成病毒的持续感染，因而难以治疗及预防。HCV没有理想的细胞模型，除黑猩猩外也没有方便的动物模型，这使HCV致病机制及疫苗的研究遇到了极大的困难。 DNA改组(DNA shuffling)技术，通过基因在分子水平上的重组，改变基因原有核苷酸序列，创造新基因，并定向筛选具有预期性状的突变体，赋予表达产物以新的功能。它是一项全新的体外人工进化模式，是迄今为止所知道的最有效的分子进化技术。噬菌体展示技术(phage display technique，PDT)是利用丝状噬菌体外壳蛋白来展示外源多肽的新技术。它使随机肽库和编码他们的DNA序列联系起来，通过和特异性的靶分子(抗体、酶、细胞表面受体等)进行结

全文目录

缩略语表  6-8
中文摘要  8-11
英文摘要  11-15
前言  15-17
文献回顾  17-45
  一、丙型肝炎病毒研究进展  17-32
    1 丙型肝炎的流行现状  17-18
    2 HCV颗粒的形态特征  18
    3 HCV的基因型和基因亚型  18-19
    4 HCV基因组的结构和功能  19-27
    5 HCV的变异性  27-28
    6 HCV的发病机制  28-32
  二、DNA改组技术  32-40
    1 基本原理  32-33
    2 技术路线  33-34
    3 特点  34-35
    4 改进与发展  35-36
    5 在疫苗研制中的应用  36-38
    6 展望  38-40
  三、噬菌体展示技术  40-45
    1 基本原理  40
    2 主要的噬菌体表面展示系统  40-42
    3 主要的表达载体  42-43
    4 噬菌体展示文库的筛选  43-45
实验研究部分  45-70
  一、丙型肝炎病毒C和E1区的DNA改组  45-54
    1 材料  45-48
    2 方法  48-49
    3 结果  49-51
    4 讨论  51-54
  二、人工进化丙型肝炎病毒C和E1区噬菌体展示文库的构建  54-62
    1 材料  54-57
    2 方法  57-58
    3 结果  58-60
    4 讨论  60-62
  三、人工进化丙型肝炎病毒C和E1区噬菌体展示文库的初步筛选  62-70
    1 材料  62-63
    2 方法  63-65
    3 结果  65-67
    4 讨论  67-70
小结  70-71
参考文献  71-80
个人简历和研究成果  80-81
致谢  81

人工进化丙型肝炎病毒（HCV）C和E1区噬菌体展示文库的构建及初步筛选

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