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高保真DNA聚合酶介导的复合分子“开/关”技术平台在Y染色体识别中的应用

作　者: 周翠兰
导　师: 李凯；廖端芳
学　校: 南华大学
专　业: 药理学
关键词: 单核苷酸多态性 SNP敏感性分子开关高保真DNA聚合酶硫化修饰 Y染色体
分类号: R346
类　型: 硕士论文
年　份: 2006年
下　载: 38次
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内容摘要

目的：研究SNP敏感性纳米级复合分子开关在Y染色体识别中的应用。方法：选择性别表型正常者为研究对象，肘正中静脉采血5ml，加0.5ml肝素抗凝，-20℃保存备用。采用酚／氯仿法提取基因组DNA，0.8％琼脂糖凝胶电泳鉴定，紫外分光光度仪测定OD260／280值，分管保存备用。根据Y染色体基因序列及SNP信息，设计引物。实验分四步骤进行。首先采用X染色体特异性引物X1、Y染色体特异性引物Y02和Y染色体常染色体同源区引物Y2进行普通PCR对已知性别的样本进行检测，比较Taq酶与Pfu酶实验结果的差异；其次用实时定量PCR和分子开关，Y染色体特异性引物Y02和Y染色体常染色体同源区引物Y2，对已知性别的样本进行检测；第三用普通PCR，Y染色体M45(rs2032631)、M89(rs2032652)、M172(rs2032604)SNP位点引物，对已知性别的样本进行检测，比较Taq酶与Pfu酶实验结果的差异；最后用反向巢式PCR对Y染色体M45(rs2032631)、M89(rs2032652)、M172(rs2032604)SNP位点进行检测，比较Taq酶与Pfu酶实验结果的差异。实验者保持单盲，利用Y02引物对临床性别表型正常的40个DNA样本进行检测。结果：使用X染色体特异性引物X1、Y染色体特异性引物Y02和Y染

全文目录

一、主要英文缩略语索引  4-5
二、中文摘要  5-7
三、英文摘要  7-9
四、正文  9-35
  (一) 前言  9-12
  (二) 实验材料  12-13
  (三) 实验方法  13-19
  (四) 实验结果  19-29
  (五) 讨论  29-31
  (六) 结论  31-32
  (七) 参考文献  32-35
五、综述  35-42
六、硕士期间发表论文  42-43
七、致谢  43

高保真DNA聚合酶介导的复合分子“开/关”技术平台在Y染色体识别中的应用

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