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甜瓜种质资源遗传多样性的分子基础与品种诊断技术研究

作　者: 王掌军
导　师: 刘生祥；王建设
学　校: 宁夏大学
专　业: 作物遗传育种
关键词: 甜瓜 遗传多样性 RAPD DAMD SRAP 杂种优势
分类号: S652
类　型: 硕士论文
年　份: 2005年
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内容摘要


本试验对甜瓜扩增的RAPD—PCR、DAMD-PCR和SRAP—PCR反应体系进行了优化,以甜瓜DNA为模板.筛选出了甜瓜多态性分析的14条RAPD引物、9条DAMD-PCR引物和10个SRAP引物组合。利用3种分子标记分别研究了甜瓜种质资源的遗传多样性,根据每种标记分布所获得的数据绘制了54份甜瓜种质的聚类图。同时,根据54份甜瓜种质问相似性分析得到遗传差异矩阵,预测了可能存在杂种优势的组合。得到下列结果: 1 对三种标记对甜瓜种质多态性扩增所获得数据应用STATISTICA统计软件计算种质间遗传差异并进行聚类。14个RAPD引物、9个DAMD引物、10个SRAP引物组合三种分子标记显示了54份甜瓜种质的遗传距离在0.03～0.53(平均遗传差异距离为0.253)、0.03～0.52(平均为0.270)、0.08～0.79(平均为0.375),三种分子标记分别将54份甜瓜种质资源为2大类:Ⅰ类,即与其它种质相距较远的一类;Ⅱ类,可再分为2个亚类,Ⅱ—1,即薄皮甜瓜(香瓜和菜瓜),Ⅱ—2,即厚皮甜瓜(网纹的、无纹的和哈密瓜)。 2 三种标记中都存在一些具有高效区分54份甜瓜种质的引物,14个RAPD引物中有5个区分率在40%以上,9个DAMD引物中有4个区分率在30%以上,10个SRAP引物组合中有4个区分率在50%以上。它们在甜瓜分类学与育种学研究上,将有助于甜瓜种质资源的高效鉴定:在甜瓜种子生产上,将有助于高效鉴定种子真伪与纯度。 3 三种标记分析结果表明:甜瓜类内(香瓜与香瓜、网纹与网纹、无网纹与无网纹、哈密瓜与哈密瓜)遗传差异相对较小,而类间(薄皮与厚皮(网纹、无网纹和哈密瓜)、网纹与无网纹、网纹与哈密瓜、无网纹与哈密瓜)遗传差异相对较大。以往甜瓜育种一般在类内种质间配组,而对类间配组不够重视,因此,认为今后甜瓜育种的突破依赖与类间杂种优势的挖掘和利用程度。

全文目录


1． 引言  8-17
  1．1． 分子标记的发展  8-11
    1．1．1． 分子标记的特点  8
    1．1．2． 分子标记的种类及原理  8-11
  1．2． 分子标记在甜瓜遗传育种研究中的应用  11-16
    1．2．1． 分子标记与甜瓜起源及分类研究  11-14
    1．2．2． 甜瓜分子遗传图谱构建  14-15
    1．2．3． 甜瓜目的基因定位与分子标记辅助育种  15
    1．2．4． 杂种优势分析与预测  15-16
  1．3． 分子标记技术应用的差异比较  16
  1．4． 本试验的目的及意义  16-17
2． 材料与方法  17-21
  2．1． 供试材料  17
  2．2． 主要试剂及仪器设备  17
  2．3． 基因组DNA提取方法  17-18
  2．4． RAPD反应体系  18
    2．4．1． RAPD随机引物  18
    2．4．2． RAPD反应体系扩增与电泳  18
  2．5． DAMD反应体系  18-19
    2．5．1． DAMD引物  18
    2．5．2． DAMD反应体系扩增与电泳  18-19
  2．6． SRAP引物组合反应体系  19
    2．6．1． SRAP引物组合  19
    2．6．2． SRAP反应体系扩增与电泳  19
    2．6．3． 聚丙烯酰胺凝胶电泳  19
  2．7 数据统计与分析  19-21
3． 结果与分析  21-60
  3．1． 甜瓜种质资源DNA质量检测及含量测定  21
  3．2． 利用RAPD标记分析甜瓜种质资源的遗传多态性  21-35
    3．2．1． RAPD随机引物扩增鉴定甜瓜种质资源  22-31
    3．2．2． 利用RAPD标记分析甜瓜种质资源的遗传多态性  31-35
  3．3． 利用DAMD标记分析甜瓜种质资源的遗传多态性  35-48
    3．3．1． DAMD反应体系的优化  35-37
    3．3．2． DAMD引物筛选  37
    3．3．3． 小卫星DNA核心序列引物扩增鉴定甜瓜种质资源  37-44
    3．3．4． 利用DAMD标记分析甜瓜种质资源的遗传多态性  44-48
  3．4． 利用SRAP标记分析甜瓜种质资源的遗传多样性  48-56
    3．4．1． SRAP引物组合扩增、鉴定甜瓜种质资源  48-54
    3．4．2． 利用SRAP标记分析甜瓜种质资源的遗传多样性  54-56
  3．5． 三种分子标记在甜瓜种质资源多态性分析方面的结果比较  56-60
4． 讨论  60-63
  4．1． 三种分子标记分析结果的稳定性与技术的优越性  60-61
  4．2． 三种标记在甜瓜种质资源 DNA高效诊断技术研究方面的评价  61
  4．3． 甜瓜种质资源遗传多态性与杂种优势  61-63
5． 结论  63-64
参考文献  64-69
致谢  69-70
附录  70-71

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中图分类: > 农业科学 > 园艺 > 瓜果园艺 > 甜瓜
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