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SABC法对伪狂犬病毒鄂A株在仔猪体内的定位研究

作　者: 郏自明
导　师: 周诗其
学　校: 华中农业大学
专　业: 基础兽医学
关键词: 伪狂犬病毒鄂A株 SABC法仔猪定位病理变化
分类号: S852.65
类　型: 硕士论文
年　份: 2005年
下　载: 135次
引　用: 2次
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内容摘要

本试验所用的阳性组织是人工感染伪狂犬病的仔猪病料,阴性组织是经乳胶凝集试验(LAT)检测PRV为阴性的健康仔猪组织,运用免疫组织化学法,对多种组织石蜡切片染色观察,并对同一组织进行H.E.染色。研究伪狂犬病毒鄂A株在仔猪体内的分布规律、靶器官和靶细胞、病毒分布的部位与病理组织学变化之间的关系。试验所用的第一抗体为兔抗伪狂犬病毒鄂A株的IgG。用纯化之后的伪狂犬病毒对4只健康家兔进行免疫接种,所得抗血清经葡聚糖G-200纯化,制得兔抗伪狂犬病毒的IgG,经双向琼脂扩散试验证明具有特异性。第一抗体的最佳工作浓度定为1:600。经SABC法染色观察,研究结果表明,PRV-Ea侵入仔猪体内后,在肺、大脑、小脑、脊髓、脊神经节、淋巴结、扁桃体、胸腺、脾、肝、肾、肾上腺、胃、肠等组织内均发现有阳性细胞,尤在肺、神经组织和淋巴组织内为多,且主要侵害上皮细胞、神经细胞和淋巴细胞。病毒存在于被感染细胞的细胞质和细胞核内,以细胞质为主。所设免疫反应特异性对照实验,均未见到阳性细胞。 H.E.染色观察显示,病理组织学变化主要表现为间质性肺炎和出血性肺炎、典型的非化脓性脑炎、神经节炎等;淋巴结、扁桃体和脾脏等组织内淋巴细胞坏死、数目减少;有阳性反应的细胞,特别是阳性上皮细胞呈现不同程度的肿胀、变性、增生等病理变化。两种不同染色结果揭示病毒存在的部位和所发生的病理变化之间存在着紧密的相关性,伪狂犬病毒鄂A株可直接对肺、神经组织、淋巴组织造成损伤。

全文目录

摘要  6-7
Abstract  7-8
前言  8-13
  1．猪伪狂犬病的流行现状  8-9
  2．国内外研究概况、水平和发展趋势  9-12
    2．1 病原  9
    2．2 发病机制  9
    2．3 病理变化  9-10
    2．4 诊断方法  10-11
    2．5 免疫组织化学对伪狂犬病毒抗原定位的研究概况  11-12
  3．本研究的主要内容  12-13
材料与方法  13-17
  1 材料  13-14
    1．1 伪狂犬病阳性猪的组织  13
    1．2 伪狂犬病阴性猪的组织  13
    1．3 免疫用兔  13
    1．4 病毒  13
    1．5 主要试剂  13
    1．6 主要仪器  13-14
  2．方法  14-17
    2．1 兔抗 PRV-Ea抗体的制备  14-15
    2．2 切片制作  15
    2．3 兔抗 PRV-Ea抗体工作浓度的确定  15
    2．4 SABC染色  15-16
    2．5 染色对照  16
    2．6 SABC染色判断标准  16
    2．7 H．E．染色  16
    2．8 结果记录  16-17
结果  17-20
  1．兔抗 PRV-Ea抗体的制备与工作浓度的确定  17
  2． SABC法染色结果  17-18
  3． H．E染色结果  18-20
讨论  20-25
  1． PRV-Ea株在仔猪体内的分布规律  20-21
  2．病毒分布与病理变化之间的关系  21-22
  3． SABC法染色用于诊断 PRV的评价  22
  4． SABC法染色质量的控制  22-23
  5．制备兔抗 PRV-Ea时应注意的问题  23-25
结论  25-26
参考文献  26-31
致谢  31-32
附图Ⅰ  32-40
附图Ⅱ  40-46
附录  46

SABC法对伪狂犬病毒鄂A株在仔猪体内的定位研究

内容摘要

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