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酸马奶酒中两株产抑菌物质乳酸菌培养基优化与抑菌物质的提取

作　者: 翟光超
导　师: 贺银凤
学　校: 内蒙古农业大学
专　业: 农产品加工及贮藏工程
关键词: 酸马奶酒乳酸菌培养基优化抑菌活性物质
分类号: TS252
类　型: 硕士论文
年　份: 2005年
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引　用: 1次
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内容摘要

本实验研究的对象是从酸马奶酒中分离到的两株乳酸菌,即菌株 H1-1( Enterococcus faecalis ) 和菌株 H1-2 ( Leuconostoc mesenteroides subsp. dextranrum),它们的代谢产物对食品中易污染的单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes)有较强的抑制作用。研究了两株菌代谢产生抑菌活性物质的培养基条件、抑菌活性物质的提取与纯化以及抑菌活性物质粗品在巴氏杀菌乳防腐保藏中的应用。实验结果表明,菌株 H1-1产抑菌活性物质的最佳培养基为 1%氮源(胰蛋白胨:植质蛋白胨为 1:1),3%葡萄糖,0.5%酵母浸膏,培养基 pH 为 6.5;菌株 H1-2产抑菌活性物质的最佳培养基为 1%氮源(胰蛋白胨:植质蛋白胨为 3:1),1%葡萄糖,0.5%酵母浸膏,培养基 pH 为 6.5。两株菌的发酵液经过盐析、凝胶柱层析分离、电泳,菌株 H1-1的活性峰电泳呈现 3 条蛋白带,分子量分别为 33,800Da、40,100Da 和42,800Da 左右;菌株 H1-2 的活性峰电泳呈现 2 条蛋白带,分子量分别为 22,700Da 和23,200Da 左右。将菌株 H1-1 和 H1-2 的抑菌物质粗品,按不同的添加量添加到巴氏杀菌乳中,保藏实验显示两株菌的抑菌物质粗品可以抑制巴氏杀菌乳中的微生物生长,延缓巴氏杀菌乳的 pH 值下降速度,从而延长巴氏杀菌乳的品质保藏期限。

全文目录

1 引言  6-13
  1.1 酸马奶酒的营养及保健功效  6-7
  1.2 国内外酸马奶酒的研究进展  7-9
  1.3 生物防腐剂概述  9-13
  1.4 课题研究的目的及意义  13
2 材料与方法  13-20
  2.1 材料  13-14
    2.1.1 试验菌株  13
    2.1.2 标准菌株  13
    2.1.3 培养基  13-14
    2.1.4 试剂  14
    2.1.5 主要仪器  14
  2.2 试验方法  14-20
    2.2.1 供试菌株培养基的优化改进  14-16
      2.2.1.1 供试菌株的培养与抑菌活性物质的收集  14
      2.2.1.2 抑菌活性的测定  14-15
      2.2.1.3 培养基的优化改进  15-16
        2.2.1.3.1 氮源单因素试验  15
        2.2.1.3.2 碳源单因素试验  15
        2.2.1.3.3 增殖因子单因素试验  15
        2.2.1.3.4 正交试验  15-16
    2.2.2 抑菌活性物质的提取与纯化  16-19
      2.2.2.1 抑菌活性物质的提取  16-17
        2.2.2.1.1 硫酸铵的分级盐析  16
        2.2.2.1.2 盐析沉淀物的透析脱盐  16-17
        2.2.2.1.3 透析脱盐物质的浓缩  17
      2.2.2.2 抑菌活性物质的纯化  17-19
        2.2.2.2.1 CM—52 柱层析分离  17
        2.2.2.2.2 SephadexG—25 凝胶柱分离  17-18
        2.2.2.2.3 SephadexG—100凝胶柱分离  18
        2.2.2.2.4 电泳  18-19
    2.2.3 抑菌活性物质粗品在乳品防腐保藏中的应用研究  19-20
      2.2.3.1 菌落总数的测定  19
      2.2.3.2 pH 值测定  19-20
      2.2.3.3 煮沸试验  20
      2.2.3.4 感官指标评定  20
3 结果与分析  20-32
  3.1 供试菌株培养基的优化改进结果  20-24
    3.1.1 单因素氮源试验结果  20-21
    3.1.2 单因素碳源试验结果  21
    3.1.3 单因素增殖因子试验结果  21-22
    3.1.4 培养基优化正交试验结果  22-24
  3.2 抑菌物质的提取与纯化结果  24-29
    3.2.1 硫酸铵的分级盐析结果  24-25
    3.2.2 透析脱盐物质的浓缩结果  25
    3.2.3 CM—52 柱层析分离结果  25-26
    3.2.4 SephadexG—25 凝胶柱分离结果  26-27
    3.2.5 SephadexG—100凝胶柱分离结果  27-28
    3.2.6 电泳结果  28-29
  3.3 抑菌活性物质粗品在乳品防腐保藏中的应用研究结果  29-32
    3.3.1 菌落总数测定结果  29-30
    3.3.2 pH 值测定结果  30-31
    3.3.3 煮沸试验结果  31-32
    3.3.4 感官指标评定结果  32
4 讨论  32-35
5 结论  35-36
致谢  36-37
参考文献  37-40
附录  40-42
作者简介  42

酸马奶酒中两株产抑菌物质乳酸菌培养基优化与抑菌物质的提取

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