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曲古菌素A抑制人结肠癌HCT-116细胞株生长及其机制的实验研究

作　者: 张玲
导　师: 陈卫昌
学　校: 苏州大学
专　业: 消化内科
关键词: 曲古菌素A 结肠癌 DMTF1 CyclinD1 Bid 乙酰化H3
分类号: R735.35
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的:探讨曲古菌素A(trichostatin A ,TSA)对人结肠癌细胞株HCT-116生长的影响及可能的作用机制。方法:(1)将TSA作用于结肠癌细胞系HCT-116细胞,CCK8法检测吸光度值,计算对照组和各实验组细胞的生长抑制率。(2)应用流式细胞仪(FCM)研究TSA对人结肠癌HCT-116细胞周期和凋亡的影响;(3)Western Blot检测DMTF1、CyclinD1、Bid、乙酰化H3的蛋白表达水平变化。结果:(1)CCK8法显示各浓度(75ng/ml、150ng/ml、300ng/ml、600ng/ml)组TSA均可抑制HCT-116细胞的生长,实验组与对照组及各实验组之间差别均有统计学意义(P<0.05),并呈时间和剂量依赖性。(2)流式细胞仪检测发现HCT-116细胞经TSA作用48小时后可见细胞周期S期明显抑制,且随着浓度的增加HCT-116细胞周期G0/G1期比例增加,S期细胞比例下降,具有统计学意义(P<0.05)。不同浓度的TSA(75ng/ml、150ng/ml、300ng/ml、600ng/ml)作用结肠癌HCT-116细胞48h后,凋亡率分别为(4.6±0.55)%、(37.06±7.89)%、(71.2±5.55)%、(75.93±3.28)%,各TSA组细胞凋亡率均明显高于对照组(P<0.05)。(3)Western Blot显示不同浓度TSA作用于结肠癌HCT-116细胞48h后,细胞中的DMTF1、Bid、乙酰化H3蛋白表达上调,而CyclinD1表达下降。结论:(1)TSA能明显抑制体外培养的人结肠癌HCT-116细胞生长,并呈时间和剂量依赖性;(2)TSA能诱导细胞凋亡并使细胞周期阻滞于G0/G1期;(3)TSA对结肠癌HCT-116细胞生长的抑制作用可能与阻滞细胞周期、诱导凋亡、下调CyclinD1表达和上调DMTF1、Bid、乙酰化H3表达有关。

曲古菌素A抑制人结肠癌HCT-116细胞株生长及其机制的实验研究

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