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阿斯匹林、姜黄素对人HT-29、SW480细胞中β-catenin、COX-2及PGE2的影响

作　者: 陈公安
导　师: 赵逵
学　校: 遵义医学院
专　业: 消化内科
关键词: 阿斯匹林 姜黄素 环氧合酶-2 β-连接蛋白 结肠癌细胞 前列腺素E2
分类号: R735.35
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要


目的：探讨阿斯匹林、姜黄素对体外培养的人结肠癌HT-29、SW480细胞株β-catenin、COX-2及PGE2等基因表达的影响,为临床结肠癌的治疗提供理论和实验依据。方法：采用噻畔蓝(MTT)比色法检测阿斯匹林、姜黄素对体外培养的人结肠癌HT-29、SW480细胞生长增殖的影响,利用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测药物作用后肿瘤细胞PGE2蛋白质水平表达变化,利用实时定量PCR (Real-time PCR)检测药物处理后HT-29、SW480细胞中COX-2和β-catenin等基因mRNA水平表达变化,利用蛋白免疫印迹(Western-blot)检测药物处理肿瘤细胞后COX-2和β-catenin蛋白质水平的表达变化。结果：阿斯匹林对HT-29的IC50为7.9mM,对SW480的IC50为8.12mM,姜黄素对HT-29的IC50为19.27gM,对SW480的IC50为49.5μM；姜黄素对SW480细胞株分别作用12h、24 h、24 h、48h和60h后其表现的细胞抑制率分别为11.89±0.241、37.99±0.076、64.21±0.034、70.46±0.029和57.82±0.099,姜黄素对HT-29细胞株分别作用12h、24 h、24 h、48h和60h后其表现的细胞抑制率分别为18.044±0.216、22.58±0.063、57.10±0.050、77.83±0.034和74.88±0.015,阿斯匹林对HT-29细胞株分别作用12h、24 h、24 h、48h和60h后其表现的细胞抑制率分别为24.07±0.204、25.82±0.210、54.36±0.027、63.00±0.023、69.99±0.009均表现出一定的时效关系；在mRNA表达水平,姜黄素处理6h、12h和24h后,与空白对照相比,HT-29细胞株COX-2表达水平是其0.6、0.56和0.91倍,β-catenin表达水平则为其0.4、0.95和0.48倍,差异有显著意义(p<0.05)；阿斯匹林处理6h、12h和24h后,与空白对照相比,HT-29细胞株COX-2表达水平是其0.79、0.52和0.57倍,β-catenin表达水平则为其0.81、0.66和0.95倍,P<0.05,差异有显著意义(p<0.05)；姜黄素处理6h、12h和24h后,与空白对照相比,SW480细胞株COX-2表达水平是其0.62、0.31和0.11倍,β-catenin表达水平则为其0.89、0.51和0.48倍,P<0.05,差异有显著意义(p<0.05)；阿斯匹林处理6h、12h和24h后,与空白对照相比,SW480细胞株COX-2表达水平是其0.63、0.35和0.1倍,β-catenin表达水平则为其0.81、0.79和0.79倍,差异有显著意义(p<0.05)在蛋白质水平,阿斯匹林分别处理6h、12h和24h后HT-29细胞株中中PGE2合成水平分别为15.89095μg/L、26.0316μg/L和59.20192μg/L,姜黄素处理组则分别为18.44981μg/L、40.05791μg/L和86.0225μg/L,而阴性对照组则为29.19226μg/L、57.90828μg/L和110.7913μg/L；用药组和对照组相比,P<0.05,差异有统计学意义。阿斯匹林处理SW480细胞株6h、12h和24h后细胞中PGE2水平分别为55.12671μg/L、78.06162μg/L和143.6441μg/L,姜黄素处理SW480细胞株6h、12h和24h后细胞中PGE2水平分别为23.2832μg/L、31.3388pg/L和525.17865μg/L,阴性对照组则分别为61.93492μg/L、85.39108pg/L和170.1176μg/L,P<0.05,差异有统计学意义。相对于阴性对照的COX-2/β-actin0.371±0.075、0.39±0.059和0.339±0.049相比,阿斯匹林分别处理HT-29细胞12h、24h、36h后COX-2蛋白与β-actin比值分别为0.352±0.053、0.302±0.083和0.194±0.092；而姜黄素处理组分别0.219±0.087、0.382±0.069、0.185±0.079,P<0.05,差异均有显著意义(p<0.05)。相对于阴性对照的β-catenin/β-actin的0.314±0.084、0.235±0.069和0.372±0.088,阿斯匹林分别处理HT-29细胞12h、24h、36h后β-catenin蛋白与β-actin比值分别为0.285±0.098、0.225±0.092和0.362±0.089；姜黄素处理组分别0.256±0.079、0.219±0.095和0.215±0.083,P<0.05,差异均有显著意义(p<0.05)。药物处理SW480细胞中,相对于阴性对照的β-catenin/β-actin的0.258±0.064、0.236±0.084和0.223±0.079,阿斯匹林分别处理细胞12h、24h、36h后β-catenin蛋白与β-actin比值分别为0.206±0.078、0.144±0.079和0.062±0.079；姜黄素处理组分别0.251±0.097、0.216±0.095和0.141±0.059,P<0.05,差异均显著。结论：姜黄素和阿司匹林均可呈时间和剂量依赖性地抑制体外培养的结肠癌HT-29细胞和SW480细胞的生长增殖；姜黄素可通过抑制(?)COX-2、β-catenin(?)勺表达,降低PGE2的含量抑制HT-29细胞的生长增殖；姜黄素可通过抑制β-catenin的表达,降低PGE2的含量,抑制SW480细胞的生长增殖；阿斯匹林可通过抑制COX-2.β-catenin的表达,降低PGE2的含量抑制HT-29细胞的生长增殖；阿斯匹林可通过抑制β-catenin的表达,降低PGE2的含量,抑制SW480细胞的生长增殖。

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主要中英文缩略词  4-6摘要  6-9Abstract  9-12前言  12-14材料与方法  14-22结果  22-36讨论  36-39结论  39-40参考文献  40-43综述  43-49  参考文献  47-49致谢  49-50作者简介  50

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 消化系肿瘤 > 肠肿瘤 > 结肠肿瘤
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