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四种中药对小鼠细胞环加氧酶基因及EP4受体基因表达的影响

作　者: 邓婕慧
导　师: 何光源
学　校: 华中科技大学
专　业: 生物化工
关键词: 炎症环加氧酶 EP4受体人参皂甙(Rb1、Re和Rg1) 隐丹参酮
分类号: R285
类　型: 硕士论文
年　份: 2004年
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内容摘要

非甾类抗炎药(NSAIDs)通过对动物体内前列腺素生成的限速酶环加氧酶活性的抑制,起消炎止痛和抗癌作用。本论文以小鼠RAW264.7细胞株为试验材料,应用RT-PCR技术,研究了4种中药(人参皂甙Rb1、Re和Rg1和隐丹参酮)对环加氧酶(cyclooxygenase,COX)及其催化产物PGE2(prostaglandin E2)的受体EP4表达活性的影响,获得了如下结果。1)通过脂多糖(LPS)刺激6小时诱导小鼠RAW264.7细胞环加氧酶表达后,用人参皂甙Rb1、Re和Rg1和隐丹参酮分别刺激18个小时,提取细胞总RNA进行RT-PCR,除扩增出COX-2 cDNA片断外,还扩增出一类新的未知序列的环加氧酶类物质COX-3。Rb1特异性抑制该基因的表达活性,而人参皂甙Re和Rg1和隐丹参酮则对COX-3不起作用。上述4种药物对COX-2的表达均不产生影响。2)换用新的引物进行定量RT-PCR,同时扩增EP4受体和β-actin的cDNA片断,发现隐丹参酮和Rg1完全抑制EP4的表达活性,Rb1和Re对EP4受体的活性抑制分别为62%和39%。再用相同浓度的Rb1处理已经由LPS刺激表达环加氧酶的细胞,发现在最初的1小时内,Rb1能促进EP4的表达,但从第2小时开始,EP4的表达量开始下降,该过程一直持续到大约第24小时。3)人参皂甙Rb1通过一类新的环加氧酶起作用,其作用机理与传统的COX-2特异性抑制剂不同,它可能在新型非甾类抗炎药的研究中具有潜在的应用价值。

全文目录

摘要  4-5
Abstract  5-8
1 绪论  8-22
  1.1 环加氧酶结构及其功能  9-10
  1.2 环加氧酶与NSAIDs  10-15
  1.3 人参皂甙与丹参酮  15-20
  1.4 COX-3的发现及其抑制剂研究进展  20-22
2 细胞培养条件优化  22-29
  2.1 实验材料  22-23
  2.2 实验方法  23-25
  2.3 结果与讨论  25-29
3 人参皂甙及丹参酮对环加氧酶表达的影响  29-37
  3.1 实验材料  29
  3.2 实验方法  29-32
  3.3 实验结果与讨论  32-37
4 人参皂甙及丹参酮对EP4受体表达的影响  37-43
  4.1 实验设计  37
  4.2 材料与方法  37-38
  4.3 结果和讨论  38-43
5 总结与展望  43-46
致谢  46-47
参考文献  47-53
附录1 攻读硕士学位期间发表的论文目录  53

四种中药对小鼠细胞环加氧酶基因及EP4受体基因表达的影响

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