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健膝壮骨方对大鼠骨性关节炎软骨细胞凋亡及其调控基因P53、Bcl-2表达作用的影响

作　者: 王政光
导　师: 章建华
学　校: 浙江中医药大学
专　业: 中医学
关键词: 健膝壮骨方膝骨性关节炎软骨细胞凋亡 P53、Bcl-2 实验研究
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

目的观察健膝壮骨方对大鼠骨关节炎的疗效,初步探讨其治疗骨关节炎的作用机理,为将其研发为中药新药提供实验基础。方法用随机数字表法将60只大鼠分成正常组(A)10只和手术组50只,将手术组制造膝骨性关节炎模型。造模方法：采用改良Hulth法制造大鼠膝骨性关节炎模型,将手术组随机数字法分为模型对照组(B)、壮骨关节丸对照组(C)、健膝壮骨方高剂量组(D)、健膝壮骨方中剂量组(E)、健膝壮骨方低剂量组(F)5组。于造模7天后,给药组按高、中、低剂量组每日灌服健膝壮骨方浸膏稀释液5ml,剂量相当于成药分别为8g、4g、2g,壮骨关节丸对照组每日予壮骨关节丸水溶液5ml灌服,相当于成药2g,正常组和模型组分别给予5ml生理盐水灌服。分别在治疗后1个月和2各月处死一半动物,取股骨内侧髁软骨,检测各组软骨细胞凋亡及其调控基因P53、Bcl-2的表达情况。结果实验表明壮骨关节丸对照组、健膝壮骨方高剂量组、健膝壮骨方中剂量组、健膝壮骨方低剂量组各组均在一定程度上转变了软骨细胞凋亡亢进的趋势,在下调P53过度表达以及调高受抑制的Bcl-2蛋白表达方面均优于模型对照组,治疗组与对照组之间有显著性差异(P<0.05)。结论软骨细胞凋亡是导致骨性关节炎发病的重要机制之一,健膝壮骨方能很好的转变软骨细胞凋亡亢进的趋势,这种作用可能与影响P53、Bcl-2的表达有关,从而在一定程度上保护软骨细胞,对骨关节炎的发展有预防和延缓作用。

全文目录

摘要  5-6
Abstract  6-7
前言  7-9
一、材料与方法  9-13
  (一) 实验材料  9
    1. 实验动物  9
    2. 实验药品  9
    3. 主要试剂  9
    4. 实验器材  9
  (二) 实验方法  9-12
    1. 动物选择与分组  9-10
    2. 药物的制备  10
      2.1 处方  10
      2.2 制法  10
    3. 实验动物造模  10
    4. 分组给药  10
    5. 观察指标  10-12
      5.1 免疫组化染色检测软骨P53、Bcl-2基因蛋白表达  10-11
      5.2 软骨TUNEL法检测细胞凋亡的表达  11-12
  (三) 统计方法  12-13
二、结果  13-16
  (一) 健膝壮骨方对OA大鼠软骨细胞凋亡的影响  13
  (二) 健膝壮骨方对OA大鼠基因蛋白P53表达的影响  13-14
  (三) 健膝壮骨方对OA大鼠基因蛋白Bcl-2表达的影响  14-16
三、分析与讨论  16-25
  (一) 现代医学对骨关节炎的认识  16-17
  (二) 祖国医学对骨关节炎的认识  17
  (三) 膝骨性关节炎动物模型的建立  17-19
  (四) 中医药对骨关节炎的作用机理  19-20
  (五) 健膝壮骨方的组方分析  20-22
  (六) 健膝壮骨方对OA大鼠软骨细胞凋亡的影响  22-23
  (七) 健膝壮骨方对OA大鼠基因蛋白P53、Bcl-2表达的影响  23-25
结论  25-26
参考文献  26-28
附图  28-37
致谢  37-38
附  38-44
  文献综述  38-44
    参考文献  42-44

健膝壮骨方对大鼠骨性关节炎软骨细胞凋亡及其调控基因P53、Bcl-2表达作用的影响

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