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慢性机械压力对MUC5AC表达的影响及信号转导机制
作 者: 吴砚樵
导 师: 周向东
学 校: 重庆医科大学
专 业: 内科学
关键词: 压力 黏蛋白类 表皮生长因子受体 细胞外信号调节MAP激酶类 气管 上皮细胞 大鼠
分类号: R56
类 型: 硕士论文
年 份: 2010年
下 载: 5次
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内容摘要
目的探讨慢性机械压力能否诱导气道上皮黏蛋白(Mucin) 5AC表达及其可能通过的信号通路。方法(1)气液相界面培养大鼠气道上皮细胞,给予不同程度慢性间断性机械压力刺激,并分别采用ELISA及PCR技术检测各组细胞中MUC5AC蛋白含量及转录水平的变化情况。(2)以未给予任何处理的细胞为空白对照,分别设立10cmH2O、20cmH2O、30cmH2O 3个压力水平的单纯压力组;表皮生长因子受体(EGFR)特异性抑制剂AG 1478预处理组;细胞外信号调节激酶(ERK)激酶抑制剂PD98059预处理组。以ELISA去检测压力作用前后细胞裂解液MUC5AC蛋白含量,RT-PCR检测MUC5AC mRNA表达水平,Western印迹法检测各组细胞磷酸化c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)磷酸化ERK (p-ERK)和磷酸化P38(p-P38)蛋白含量。结果(1)与对空白照组相比,慢性机械压力作用后各单纯压力组MUC5AC mRNA水平,MUC5AC蛋白表达均增加(P<0.05),且增加呈压力梯度依赖性30cmH2O压力水平增加最明显(P<0.01)。(2)压力作用组MUC5AC基因转录和蛋白表达水平明显高于空白对照组,同时伴随p-ERK蛋白的表达水平增加,与空白对照组相比差异有统计学意义(P<0.01),但各压力水平p-JNK和p-P38蛋白含量与照组相比均无明显变化(P>0.05)。(3)应用AG1478和PD98059分别预处理后,与30 cmH2O压力组相比MUC5AC蛋白含量和mRNA表达水平均显著下调(P<0.05),同时均伴随有p-ERK蛋白含量的降低(P<0.05)。结论(1)慢性机械压力能够诱导气道上皮黏蛋白5AC基因转录及蛋白合成增加。(2)慢性机械压力作用通过EGFR受体途径作用于气道上皮细胞,引起MUC5AC表达增加,推测这一作用可能系通过机械压力压缩侧面胞间隙来实现。(3)MAPK通路中的ERK途径参与这一过程,P38及JNK途径未参与其中。
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全文目录
英汉缩略语名词对照 5-7 摘要 7-9 ABSTRACT 9-11 前言 11-13 第一部分 气道上皮细胞的培养及慢性机械压力对MUC5AC表达的影响 13-19 1 材料与方法 13-17 2 结果 17-18 3 讨论 18-19 第二部分 EGFR/ERK在慢性机械压力诱导MUC5AC表达过程中的作用 19-24 1 材料与方法 19-21 2 结果 21-22 3 讨论 22-24 全文结论 24-25 参考文献 25-27 附图 27-28 文献综述 28-35 参考文献 32-35 致谢 35-36 研究生期间发表的论文目录 36
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中图分类: > 医药、卫生 > 内科学 > 呼吸系及胸部疾病
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