学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

肝星形细胞的生长因子信号通路相关基因与大鼠肝再生的相关性研究

作　者: 张永晶
导　师: 徐存拴
学　校: 河南师范大学
专　业: 细胞生物学
关键词: 2/3肝切除 大鼠肝再生 Rat Genome 230 2.0芯片 肝星形细胞 生长因子信号通路 基因表达谱
分类号: R657.3
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
下　载: 42次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载
 

内容摘要


肝再生是一个复杂的过程,涉及细胞激活、去分化、增殖及增殖调控、再分化和组织结构功能重建等多种生理生化活动。细胞信号转导是生命活动的调控中心,细胞的生长、增殖、分化、凋亡、代谢等生理生化活动均要受到信号转导的调控。在大鼠肝再生中,多种生长因子通过自分泌(Autocrine)或旁分泌(Paracrine)方式激活各种生长因子信号通路参与肝再生。肝脏由肝细胞、胆管上皮细胞、肝星形细胞、窦内皮细胞、库普弗细胞、陷窝细胞、树突状细胞等多种细胞组成,以往对肝再生的研究多停留在组织水平。为在转录水平了解肝星形细胞的生长因子信号通路相关基因与肝再生的相关性,本文用门静脉两步灌流法分散肝脏细胞,用Percoll密度梯度离心和免疫磁珠分选方法分离再生肝的星形细胞,用Rat Genome 230 2.0芯片检测大鼠2/3肝切除和手术对照后恢复2、6、12、24、30、36、72、120和168 h时再生肝星形细胞生长因子信号通路相关基因的表达情况,用荧光实时定量PCR检测芯片分析结果的可靠性,用生物信息学和系统生物学等方法分析相关基因在大鼠再生肝星形细胞中的表达模式和作用。荧光实时定量PCR检验再生肝星形细胞的标志基因表达情况表明,芯片结果与荧光实时定量PCR检验结果基本一致,说明芯片检测结果可靠,用生物信息学和系统生物学等方法分析肝再生相关基因在大鼠再生肝星形细胞中表达变化及表达模式和作用表明,38个TGF-β信号通路相关基因与肝再生有关,肝再生启动和进展阶段,TGF-β信号通路抑制肝星形细胞生长和增殖,到终止阶段,相应的抑制作用减弱,此外,TGF-β信号通路还通过调控肝星形细胞分化、炎症反应、胞外基质合成等生理活动参与肝再生;68个WNT信号通路相关基因与大鼠肝再生相关,其中38、28和5个肝再生相关基因分属于WNT/β-catenin、WNT/Ca2+及PCP信号途径,WNT信号通路相关基因在调控肝星形细胞生存、代谢、增殖和分化等方面起作用;77个参与MAPK、PI3K和Ca2+介导的信号通路的生长因子及其受体基因与大鼠肝再生相关,除生长因子及其受体基因外,95、82和43个肝再生相关基因分属于MAPK信号通路、PI3K信号通路及Ca2+介导的信号通路,这些基因通过调控肝星形细胞炎症反应、存活、增殖、分化、迁移等生理活动参与肝再生。总的来看,生长因子信号通路相关基因表达模式多样、复杂,相关基因主要在肝再生启动阶段起始表达,总表达以上调表达为主,在整个肝再生中起作用。

全文目录


摘要  4-6
ABSTRACT  6-11
缩略语表  11-15
第一章 文献综述  15-23
  1 大鼠肝星形细胞的形态结构及生理功能  15-16
  2 大鼠部分肝切除与肝再生  16-17
  3 生长因子与大鼠肝再生  17-18
  4 大鼠肝星形细胞与大鼠肝再生  18-19
  5 本论文研究的目的和意义  19-20
  参考文献  20-23
第二章 大鼠再生肝星形细胞的分离及活性分析  23-35
  1 引言  23
  2 材料与方法  23-27
    2.1 实验动物  23
    2.2 大鼠2/3 肝切除模型制备  23-24
    2.3 仪器和试剂  24
    2.4 肝脏细胞的分散  24
    2.5 肝星形细胞的分离  24-25
    2.6 组织化学  25
    2.7 免疫组织化学  25
    2.8 免疫细胞化学与肝星形细胞的鉴定  25-26
    2.9 蛋白免疫印迹  26-27
  3 结果  27-32
    3.1 大鼠肝再生中肝星形细胞的形态结构变化  27-29
    3.2 大鼠再生肝的星形细胞分散率、收率及纯度、活性  29-31
    3.3 大鼠肝再生中肝星形细胞的标志蛋白表达情况  31-32
  4 讨论  32-33
  参考文献  33-35
第三章 肝星形细胞的TGF-β信号通路相关基因与大鼠肝再生的相关性研究  35-53
  摘要  35
  1 引言  35-37
  2 材料与方法  37-41
    2.1 总RNA 提取  37
    2.2 荧光定量-PCR  37-38
    2.3 Rat Genome 230 2.0 芯片检测  38-40
    2.4 肝再生相关基因的确认  40
    2.5 大鼠肝再生相关基因的表达模式分析  40
    2.6 大鼠肝再生相关基因的聚类分析  40
    2.7 TGF-β信号通路相关基因转录谱预示大鼠再生肝星形细胞的生理活动分析  40-41
  3 结果  41-47
    3.1 肝星形细胞的Rat Genome 230 2.0 芯片检测结果可靠性分析  41-42
    3.2 TGF-β信号通路相关基因在大鼠再生肝星形细胞中表达变化  42-44
    3.3 TGF-β信号通路相关基因在大鼠再生肝星形细胞中表达模式  44-46
    3.4 大鼠再生肝星形细胞的TGF-β信号通路相关基因表达相似性  46
    3.5 TGF-β信号通路相关基因转录谱预示大鼠再生肝星形细胞的生理活动  46-47
  4 讨论  47-50
  参考文献  50-53
第四章 肝星形细胞的WNT 信号通路相关基因与大鼠肝再生的相关性研究  53-65
  摘要  53
  1 引言  53-55
  2 材料与方法  55
  3 结果  55-60
    3.1 WNT 信号通路相关基因在大鼠再生肝星形细胞中表达变化  55-57
    3.2 WNT 信号通路相关基因在大鼠再生肝星形细胞中表达模式  57-59
    3.3 大鼠再生肝星形细胞的WNT 信号通路相关基因表达相似性  59
    3.4 WNT 信号通路相关基因转录谱预示大鼠再生肝星形细胞的生理活动  59-60
  4 讨论  60-63
  参考文献  63-65
第五章 肝星形细胞的其他生长因子信号通路相关基因与大鼠肝再生的相关性研究  65-83
  摘要  65
  1 引言  65-66
  2 材料与方法  66
  3 结果  66-76
    3.1 其他生长因子信号通路相关基因在大鼠再生肝星形细胞中表达变化  66-70
    3.2 其他生长因子信号通路相关基因在大鼠再生肝星形细胞中表达模式  70-75
    3.3 大鼠再生肝星形细胞的其他生长因子信号通路相关基因表达相似性  75-76
  4 讨论  76-79
  参考文献  79-83
总结与结论  83-85
攻读硕士学位期间参加的科研项目和发表论文  85-86
致谢  86-87

相似论文

  1. 基于RNA测序技术的马氏珠母贝珍珠囊转录组及数字基因表达谱分析,Q786
  2. 基因表达谱数据聚类分析方法比较与大豆疫霉基因的网络构建,S435.651
  3. 夜间低温对番茄苗期抗逆性、基因表达谱及碳水化合物代谢的影响,S641.2
  4. 肝血管瘤剥脱术与规则性肝切除术的术式探讨,R735.7
  5. ERK1/2和JNK信号通路对大鼠再生肝8种细胞的增殖和凋亡调控作用研究,Q418
  6. 去神经对大鼠肝再生的影响研究,R363
  7. 大鼠肝再生与肝硬化发生的基因转录谱相关性及其意义研究,R575.2
  8. 大鼠肝再生与非酒精性脂肪肝发生的基因转录谱相关性及其意义研究,R575.5
  9. 大鼠肝再生与肝肿瘤发生的基因转录谱相关性及其意义研究,R735.7
  10. 大鼠肝再生与急性肝衰竭发生的基因转录谱相关性及其意义研究,Q418
  11. 急性胰腺炎患者血浆DNA定量分析和基因表达谱研究,R576
  12. 大肝癌肝切除术或TACE后肝功能代偿不良相关因素的临床分析,R735.7
  13. 原发性肝细胞癌根治性术后复发的相关危险因素分析,R735.7
  14. 巴塞罗那肝癌临床分期的手术指征是否合理？结果和修改意见,R735.7
  15. 冬凌草甲素预处理对离体肝切除自体肝移植大鼠缺血再灌注损伤的保护作用及机制研究,R657.3
  16. 腹腔镜下左半肝切除治疗肝内胆管结石的研究,R657.4
  17. 射频辅助无血切肝术在肝脏切除中的应用,R657.3
  18. 基于连续小波变换分析的基因表达谱数据分析,O174.2
  19. 绕肝提拉前入路肝切除术的应用解剖研究,R657.3
  20. 胞外蛋白酶抑制剂基因expi对大鼠肝再生的作用研究,Q343

中图分类: > 医药、卫生 > 外科学 > 外科学各论 > 腹部外科学 > 肝及肝管
© 2012 www.xueweilunwen.com