学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

嗅鞘细胞培养、鉴定及耳蜗移植的初步研究

作　者: 张玉峰
导　师: 黄孝文；崔永华
学　校: 华中科技大学
专　业: 耳鼻咽喉头颈外科
关键词: 嗅鞘细胞细胞移植耳蜗豚鼠
分类号: R764
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
下　载: 12次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

目的建立嗅鞘细胞(olfactory ensheathing cells,OECs)的培养、鉴定及示踪方法,并初步探讨OECs耳蜗移植的可行性。方法1、细胞培养及纯化:对新生3天Sprague-Dawley大鼠嗅球来源的OECs进行原代培养,然后用差速贴壁法+抗有丝分裂法纯化培养。在不同时间点于倒置显微镜下观察细胞的形态特点及生长情况,利用低亲和力神经生长因子受体(NGFR-p75)行免疫组织化学染色观察,并做细胞纯度的鉴定。2、动物实验:将纯化培养7天的OECs与5-溴-2’-脱氧尿嘧啶核苷(5-bromo-2’-deoxyuridine,BrdUrd)孵育48小时,以标记OECs。作成年豚鼠耳后切口,暴露、打开听泡,在耳蜗底周近镫骨动脉处钻孔,注入含OECs的悬液。细胞移植1天后,取豚鼠耳蜗作冰冻切片,免疫荧光染色后,在激光共聚焦显微镜下观察移植细胞的分布情况。结果1、纯化培养后的OECs迅速增殖,于第9天细胞数量最多,纯度最高可达85%。2、BrdUrd与OECs共同孵育48小时后,其标记率可达到90%以上。3、移植后1天OECs主要分布于豚鼠耳蜗的鼓阶中。结论1、采用差速贴壁法+抗有丝分裂法可获得高纯度的OECs。2、BrdUrd可成功标记OECs,是安全、有效、简单、标记率高的示踪方法。3、OECs耳蜗移植后短期内可在鼓阶存活,长期转归有待进一步观察。

全文目录

一、主要缩略词表  5-6
二、摘要  6-10
  中文摘要  6-8
  Abstract  8-10
三、前言  10-14
  参考文献  12-14
四、第一部分：嗅鞘细胞的原代培养、纯化及鉴定  14-24
  1 引言  14
  2 材料与方法  14-18
  3 结果  18-19
  4 讨论  19-21
  5 附图  21-23
  6 参考文献  23-24
五、第二部分：嗅鞘细胞豚鼠耳蜗移植的初步研究  24-31
  1 材料与方法  24-27
  2 结果  27-28
  3 讨论  28-30
  4 参考文献  30-31
六、综述  31-38
  参考文献  36-38
七、致谢  38

嗅鞘细胞培养、鉴定及耳蜗移植的初步研究

内容摘要

全文目录

相似论文