学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

胆碱磷酸转移酶基因转化大豆的研究

作　者: 王桂玲
导　师: 姜静
学　校: 东北林业大学
专　业: 林木遗传育种
关键词: 大豆 抗寒 CPT基因 转基因植物 花粉管通道法
分类号: S565.103.53
类　型: 硕士论文
年　份: 2001年
下　载: 54次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载
 

内容摘要


大豆是重要的经济作物，黑龙江省是我国大豆的主产区，但由于低温冷害常造成大幅度减产。本论文把欧洲油菜的胆碱磷酸转移酶基因（cpt）导入大豆，通过直接导入外源基因的技术解决大豆抗寒问题。 低温诱导的植物抗寒性与脂代谢相关，胆碱磷酸转移酶（CPT）是一个整合的膜蛋白，是磷脂合成代谢途径上一个重要的酶，该酶的产物是磷脂酰胆碱（PC），是生物膜的主要组成成份，与膜的流动性和抗寒性有密切关系。 本实验把含有35s-35s-AMV-cpt-NOST片段的质粒pRDH401，通过花粉管通道法导入黑龙江省常见的五个栽培大豆品种中，所获种子第二年种植并加以检测。经抗生素、低温筛选后，对可能转化的植株进行PCR检测，转化植株扩增出目的基因片段。对PCR阳性株的总DNA进行Southern杂交检测，结果显示外源基因已经整合到2个大豆品种的基因组中。

全文目录


中文摘要  3-7
1 综述  7-20
  1．1 寒害的伤害机制与植物抗寒机制  7-12
    1．1．1 冷害的概念及分子机理  7-8
    1．1．2 植物抗冷机制  8-9
    1．1．3 冻害的概念及分子机理  9-10
    1．1．4 植物抗冻机理  10
    1．1．5 寒冷驯化的生理生化变化  10-11
    1．1．6 冷驯化期间寒冷应答基因表达的变化  11-12
  1．2 植物抗寒基因工程途径  12-13
    1．2．1 抗冻蛋白抗寒基因工程途径  12
    1．2．2 超氧化物歧化酶（SOD）基因途径  12-13
    1．2．3 糖类基因途径  13
    1．2．4 脂代谢关键酶基因途径  13
  1．3 脂代谢关键酶基因途径的抗寒基因工程  13-14
    1．3．1 脂肪酸脱饱和酶基因  13-14
    1．3．2 酰基转移酶基因  14
    1．3．3 胆碱磷酸转移酶基因（cpt）  14
  1．4 胆碱磷酸转移酶基因  14-18
    1．4．1 胆碱磷酸转移酶  14-16
      1．4．1．1 胆碱磷酸转移酶在磷脂合成代谢中的作用  14-15
      1．4．1．2 胆碱磷酸转移酶活性调节  15-16
    1．4．2 胆碱磷酸转移酶基因  16-18
      1．4．2．1 酿酒酵母CPT基因  16-17
      1．4．2．2 欧洲油菜CPT基因  17-18
  1．5 大豆的抗寒及转基因研究  18-20
    1．5．1 大豆抗寒研究  18-19
    1．5．2 大豆的基因转化  19-20
2 材料与方法  20-27
  2．1 材料  20
    2．1．1 受体植物  20
    2．1．2 质粒和菌种  20
  2．2 主要试剂和仪器  20-21
  2．3 实验方法  21-27
    2．3．1 质粒大量提取  21-22
    2．3．2 花粉管通道法转化大豆  22
    2．3．3 转化植株的筛选  22
      2．3．3．1 卡那霉素抗性筛选  22
      2．3．3．2 低温筛选  22
    2．3．4 转基因植株的检测  22-27
      2．3．4．1 PCR检测  22-23
      2．3．4．2 Southern杂交检测  23-27
3 实验结果  27-30
  3．1 花粉管道通法转化大豆  27-28
    3．1．1 PRDH401质粒及浓度和纯度的检测  27
    3．1．2 花粉管道道法转化大豆  27-28
  3．2 转化植株的筛选和鉴定  28-30
    3．2．1 转化植株的抗生素筛选  28-29
    3．2．2 转化植株的抗寒筛选  29
    3．2．3 转化植株的PCR检测  29
    3．2．4 转化植株的Southern杂交检测  29-30
4 讨论  30-32
  4．1 选择含双35S启动子的植物表达载体  30
  4．2 转CPT基因增加大豆抗寒性的可行性  30-31
  4．3 转CPT基因大豆的鉴定方法  31-32
    4．3．1 抗寒筛选是鉴定CPT是否导入的有效方法  31
    4．3．2 PCR检测  31-32
5 结论  32-33
参考文献  33-36
图版说明  36-37
图版  37-40
致谢  40

相似论文

  1. 拟南芥胱硫醚-γ-合成酶（D-AtCGS）基因在大肠杆菌中的表达及抗血清制备,Q943.2
  2. 大豆疫霉RXLR效应分子靶标的筛选,S435.651
  3. 大豆农艺和品质性状遗传模型分析与QTL定位,S565.1
  4. 大豆品种对腐竹品质的影响及其品质评价体系的初步构建,TS214.2
  5. rd29A驱动RdreBlBI基因转化‘红颊’草莓的研究,S668.4
  6. 发芽大豆多肽富集工艺及富肽豆乳开发研究,TS214.2
  7. 大豆品种对北豆腐品质的影响及其品质评价方法的研究,TS214.2
  8. 基因表达谱数据聚类分析方法比较与大豆疫霉基因的网络构建,S435.651
  9. 大豆细菌性斑点病原物的分离鉴定及其两个Ⅲ型效应因子的克隆与功能研究,S435.651
  10. 农杆菌介导GmWRKY21基因转化大豆的研究,S565.1
  11. 黄河长江中下游地区野生大豆自然居群的遗传特征、群体分化及其与栽培大豆遗传关系研究,S565.1
  12. 大豆（Glycine max L. Merr.）籽粒大小和形状的QTL定位和驯化研究,S565.1
  13. 大豆杂种优势及其遗传基础研究,S565.1
  14. 大豆叶茸毛着生状态与筛豆龟蝽抗性的关联及基因定位,S565.1
  15. 叶绿素缺乏对大豆叶片光能分配及耐光抑制特性的影响,S565.1
  16. 淹水胁迫对大豆生长和生理特性的影响,S565.1
  17. 大豆孢囊线虫扩展蛋白基因expansin的克隆和分析及大豆种质资源的抗性鉴定,S565.1
  18. 黄淮和南方地区大豆育成品种籽粒性状遗传构成的分子标记解析及等位变异优选,S565.1
  19. 大豆GmFtsH基因的遗传转化及功能分析,S565.1
  20. 大豆细胞质雄性不育系与保持系基因差异表达的cDNA-AFLP分析及atp6基因RNA编辑研究,S565.1
  21. 中国大豆地方品种群体的遗传结构和连锁不平衡特征及主要育种性状QTL的关联分析,S565.1

中图分类: > 农业科学 > 农作物 > 经济作物 > 油料作物 > 大豆
© 2012 www.xueweilunwen.com