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油桐花芽分化期Tunglfy基因时空表达及内源激素含量的动态变化

作　者: 郭文丹
导　师: 李建安
学　校: 中南林业科技大学
专　业: 森林培育
关键词: 油桐花芽分化内源激素 LFY
分类号: S794.3
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
下　载: 39次
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内容摘要

油桐(Vernicia fordii(Hemsl.))是我国特有经济林木,栽培历史悠久,桐油是重要工业用油。而花芽分化是植物生殖过程的基础,直接关系到果实的产量和质量。本文在油桐花芽形态分化期的显微结构观察的基础上,研究了其花芽分化期内Tunglfy基因时空表达规律和叶片中内源激素的动态变化,探讨内源激素变化与成花的关系花芽分化的化学调控提供理论依据。主要研究结果如下：1、分析植物钙调素基因的保守区序列,设计引物。以油桐花芽总RNA反转录的cDNA第一链为模板,利用RT-PCR扩增出长为300bp左右的cDNA片段,克隆入PCR2.1 vector载体。测序和序列分析表明,获得了大小为293bp的cDNA片段,命名为VeCam,该片段与猕猴桃等有较高的核苷酸同源性,达到了96%。2、分析油桐Tunglfy基因的3’端序列,设计特异引物。以油桐花芽分化期不同阶段的嫩芽、嫩叶、嫩茎的总RNA反转录的cDNA第一链为模板,分别用该引物和VeCam基因引物进行RT-PCR扩增,电泳检测PCR产物,发现嫩芽、嫩叶、嫩茎在油桐花芽分化的不同时期都有表达,嫩芽的表达相对强烈。3、在油桐花芽分化期组织学观察的基础上,研究该期叶片内源激素ZR(玉米素核苷)、IAA(生长素)、GA(赤霉素)、ABA(脱落酸)含量变化。结果发现：花芽生理分化期,ZR(玉米素核苷)、IAA(生长素)、GA(赤霉素)、ABA(脱落酸)含量迅速下降,到花芽形态分化开始前降到较低的水平；花芽形态分化开始后ZR(玉米素核苷)、IAA(生长素)、GA(赤霉素)、ABA(脱落酸)含量前期上升,中期波动变化,末期上升；花芽生理分化期ZR/GA. ZR/IAA、ABA/GA和ABA/IAA的比值迅速上升,花芽形态分化期在较高水平波动大,后期下降。因此,内源激素间的平衡、综合作用促进了花芽分化,对于油桐花芽分化、花期调控更有意义

全文目录

摘要  4-5
Abstract  5-12
1 前言  12-27
  1.1 高等植物成花机理的研究进展  12-14
  1.2 高等植物LFY同源基因研究进展  14-19
    1.2.1 LFY基因在成花各阶段中的作用  14-16
    1.2.2 LFY基因表达量与开花的关系  16-17
    1.2.3 LFY基因与其他成花基因的关系  17-18
    1.2.4 影响LFY基因表达的生理因子  18-19
  1.3 植物激素与木本植物花芽分化  19-25
    1.3.1 细胞分裂素与木本植物花芽分化  19-20
    1.3.2 赤霉素与木本植物花芽分化  20-22
    1.3.3 生长素与木本植物花芽分化  22-23
    1.3.4 脱落酸与果树花芽分化  23-24
    1.3.5 乙烯与木本植物花芽分化  24
    1.3.6 激素平衡控制花芽孕育假说  24-25
  1.4 研究意义  25-26
  1.5 技术路线  26-27
2 油桐花芽分化期内TUNGLFY基因时空表达规律  27-48
  2.1 材料  27-28
    2.1.1 材料  27
    2.1.2 菌株和载体  27-28
    2.1.3 试剂  28
    2.1.4 主要仪器设备  28
  2.2 实验方法  28-38
    2.2.1 油桐总RNA提取方法的建立  28-32
    2.2.2 油桐总RNA逆转录为cDNA  32-33
    2.2.3 PCR反应体系  33-34
    2.2.4 内参基因的分离与克隆  34-38
  2.3 结果与分析  38-48
    2.3.1 油桐总RNA提取  38-40
    2.3.2 内参基因的分离与克隆  40-43
    2.3.3 油桐花芽分化期内Tunglfy基因时空表达规律  43-46
    2.3.4 讨论  46-48
3 油桐花芽分化过程中内源激素的动态变化  48-59
  3.1 材料  48-49
    3.1.1 材料  48-49
    3.1.2 仪器设备  49
    3.1.3 试剂  49
  3.2 实验方法  49-53
    3.2.1 酶联免疫法测定的原理  49-51
    3.2.2 样品中激素的提取  51
    3.2.3 样品测定  51-52
    3.2.4 结果计算  52-53
  3.3 结果与分析  53-57
    3.3.1 油桐花芽分化期IAA含量的变化  53-54
    3.3.2 油桐花芽分化期ABA含量的变化  54-55
    3.3.3 油桐花芽分化期ZR含量的变化  55
    3.3.4 油桐花芽分化期GA含量的变化  55-56
    3.3.5 油桐花芽分化期内源激素比例的变化  56-57
  3.4 讨论  57-59
4 结论与创新  59-61
  4.1 结论  59-60
  4.2 创新点  60-61
参考文献  61-72
附录A 实验药品  72-74
附录B 主要实验设备  74-75
附录C 攻读学位期间的主要学术成果  75-76
致谢  76

油桐花芽分化期Tunglfy基因时空表达及内源激素含量的动态变化

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