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多囊卵巢综合征合并胰岛素抵抗患者子宫内膜胰岛素受体底物1、2蛋白表达及酪氨酸磷酸化的研究
作 者: 盛慧
导 师: 刘义
学 校: 华中科技大学
专 业: 妇产科
关键词: 多囊卵巢综合征 子宫内膜 胰岛素受体底物1 胰岛素受体底物2 酪氨酸磷酸化 胰岛素抵抗
分类号: R711.75
类 型: 硕士论文
年 份: 2007年
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内容摘要
目的:近年来通过对多囊卵巢综合征(PCOS)患者胰岛素作用的经典组织—脂肪组织和生殖功能单位—卵巢组织的研究表明,胰岛素受体底物(Insulin receptor substrate IRS)-1和IRS-2作为胰岛素受体的主要的船坞蛋白,其蛋白表达和酪氨酸磷酸化异常是引起PCOS胰岛素抵抗(IR)的主要原因。但对PCOS患者另一个重要的生殖功能单位—子宫内膜是否也存在胰岛素抵抗目前尚未见报道。为了进一步探讨胰岛素抵抗在PCOS发病中的作用,本文通过对PCOS患者子宫内膜IRS-1和IRS-2的蛋白表达及酪氨酸磷酸化程度进行了研究,旨在明确PCOS患者子宫内膜是否存在胰岛素抵抗,探讨PCOS患者子宫内膜胰岛素抵抗的分子机制。讨论子宫内膜胰岛素抵抗对PCOS患者不孕、高流产率及子宫内膜癌的影响。方法:选择2005年9月至2006年6月在华中科技大学同济医学院附属协和医院妇产科诊断为PCOS合并IR患者15例,平均年龄29±4岁。另外选择月经周期规则,血清性激素、空腹血糖及胰岛素检查正常妇女10例作为对照组,平均年龄28±3岁,与PCOS合并IR组年龄相匹配。两组均除外肾上腺、甲状腺等疾患,3个月内未服用过激素类药物,无心、肝、肾疾病史。所有受试者均于月经第一天,行诊断性刮宫术,术中留取子宫内膜组织,37℃生理盐水冲洗血液。分两组,一组用4%的甲醛固定,石蜡包埋。切片厚度为3-4um,每例均做三张切片,用于免疫组织化学染色。另一组置于-80℃低温箱保存,用于免疫印记及免疫沉淀法。采用免疫组化方法和蛋白印记(western blot)、免疫沉淀技术检测两组子宫内膜IRS-1和IRS-2的蛋白表达及酪氨酸磷酸化程度。结果:⑴免疫组化结果显示,IRS-1、IRS-2主要表达在子宫内膜的腺上皮的胞浆中,呈黄色颗粒状。PCOS合并IR组和对照组IRS-1、IRS-2蛋白表达的灰度值分别为121.94±16,169.35±13和55.35±0.98,111.65±8.02,两组比较差异有显著性(P<0.01,P<0.05);PCOS合并IR组子宫内膜酪氨酸磷酸化程度明显低于对照组,其灰度值分别为141.98±22.5,102±9.78,两组比较差异有显著性(P<0.05)。⑵蛋白印记分析结果显示,PCOS合并IR组和对照组IRS-1、IRS-2蛋白表达分别为1.4±0.62,6.1±0.23和4.2±0.38,9.1±8.4,两组比较差异有显著性(P<0.01,P<0.05)。⑶免疫沉淀结果显示,PCOS合并IR组和对照组IRS-1、IRS-2蛋白酪氨酸磷酸化程度分别为1.6±0.64,1.4±0.42和1.5±0.23,3.4±0.47,两组比较差异有显著性(P<0.01,P<0.05)。结论:⑴免疫组化结果显示,IRS-1、IRS-2主要表达在子宫内膜的腺上皮的胞浆中,呈黄色颗粒状。PCOS合并IR组IRS-1、IRS-2蛋白表达的灰度值高于对照组,表明PCOS合并IR患者子宫内膜IRS-1、IRS-2蛋白的表达明显降低。PCOS合并IR组子宫内膜酪氨酸磷酸化程度明显低于对照组,表明PCOS合并IR组子宫内膜酪氨酸磷酸化程度明显减弱。⑵蛋白印记分析结果显示,PCOS合并IR组IRS-1、IRS-2蛋白表达明显低于对照组。⑶免疫沉淀结果显示,PCOS合并IR组IRS-1、IRS-2蛋白酪氨酸磷酸化程度低于对照组。⑷PCOS合并IR患者子宫内膜IRS-1、IRS-2蛋白的表达及酪氨酸磷酸化程度降低导致受体后信号转导障碍,可能是子宫内膜发生胰岛素抵抗(IR)机制之一。
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全文目录
中文摘要 5-7 ABSTRACT 7-9 前言 9-13 材料与方法 13-21 结果 21-25 讨论 25-29 参考文献 29-32 综述一 多囊卵巢综合征与流产 32-41 参考文献 38-41 综述二 多囊卵巢综合征对子宫内膜的影响 41-51 参考文献 48-51 简略词表 51-52 攻读硕士期间发表论文情况 52-53 致谢 53
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中图分类: > 医药、卫生 > 妇产科学 > 妇科学 > 女性生殖器其他疾病 > 卵巢疾病
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