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特异性PCR在SNP检测中的应用及铁蛋白纳米粒子化学发光检测

作　者: 韩军
导　师: 李正平
学　校: 河北大学
专　业: 分析化学
关键词: 金纳米粒子单核苷酸多态性特异性PCR 化学发光铁蛋白
分类号: TB383.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要

核酸是重要的生命大分子,核酸的分析在生命科学研究中具有重要的意义。特别是脱氧核糖核酸(Deoxyribonucleic Acid, DNA),它是主要的遗传物质,具有重要的生物功能。单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism, SNP)是最常见的基因突变形式。因此,核酸特殊序列及SNP的分析检测,在临床诊断、病理分析、以及食品与药物检测等方面都有很重要的作用。所以,开发高选择性、快速、简便的DNA和SNP检测方法显得越来越迫切。近年来,纳米粒子在生化分析中的研究和应用受到广泛关注。金属纳米粒子以其独特的光谱性质和生物兼容性被广泛应用于对蛋白质,核酸等生命大分子的分析；生物纳米粒子由于具有良好的生物活性,也被应用于信号传导、药物传送以及生命物质分析等多个领域。本文中,我们利用金纳米粒子的独特性质,结合特异性PCR技术,建立了一种可视检测SNP的分析方法,并应用于检测人基因组DNA的p53基因外显子8中的SNP位点。方法简便、快速且准确。我们还对铁蛋白(Ferritin)这种生物纳米粒子进行了研究。发现酸性介质中,铁蛋白(Ferrtin)催化luminol-H202反应并产生很强的化学发光(CL)信号。基于此,建立了简便灵敏的化学发光检测铁蛋白的分析方法。其线性范围为0.5 ng/mL-10 ng/mL,检出限(3σ)为0.36 ng/mL.为铁蛋白作为纳米粒子标记物并直接检测提供了一种新的途径。

全文目录

摘要  5-6
Abstract  6-8
第1章引言  8-23
  1.1 纳米粒子概述  8-14
  1.2 化学发光检测方法在生化分析中的应用  14-17
  1.3 PCR技术概述  17-23
第2章特异性PCR结合金纳米粒子目视法检测人基因DNA中的SNP位点  23-33
  2.1 前言  23
  2.2 实验部分  23-30
  2.3 结果与讨论  30-32
  2.4 结论  32-33
第3章 LUMINOL-H_2O_2化学发光体系检测铁蛋白的研究  33-38
  3.1 前言  33
  3.2 实验部分  33-34
  3.3 结果与讨论  34-36
  3.4 结论  36-38
参考文献  38-45
硕士期间发表论文情况  45-46
致谢  46

特异性PCR在SNP检测中的应用及铁蛋白纳米粒子化学发光检测

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