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CNTF快速通路中主要构成单元的探索
作 者: 程祺
导 师: 严进;孙继虎;倪鑫;杨勇骥
学 校: 第二军医大学
专 业: 应用心理学
关键词: 睫状神经营养因子 海马神经元 N-甲基-D-天冬氨酸 睫状神经营养因子受体α亚基抗体 酪氨酸磷酸酶抑制蛋白2 Janus激酶信号转导及转录活化蛋白 全细胞膜片钳 细胞内游离钙离子
分类号: R741
类 型: 硕士论文
年 份: 2008年
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内容摘要
前期研究发现CNTF具有保护海马神经元应激性损伤的快速作用,但其快速通路的构成尚不清楚。为了探索CNTF快速通路中主要构成单元,本研究以NMDA诱发海马神经元损伤模型,运用活细胞连续照相、全细胞膜片钳、细胞内游离钙离子浓度测定等方法,观察CNTF对海马神经元的快速保护作用及Anti-CNTFRα和JAK/STAT通路阻断剂PTPi-2对快速保护作用的影响。主要研究方法:1、用活细胞连续照相的方法观察CNTF的细胞保护作用,Anti-CNTFRα及PTPi-2对保护作用的影响。2、用全细胞膜片钳的方法观察CNTF对海马神经元兴奋性的影响。3、用全细胞膜片钳的方法观察CNTF对NMDA诱发INMDA的作用,Anti-CNTFRα及PTPi-2对该作用的影响。4、用共聚焦显微镜细胞内游离钙离子测定的方法观察CNTF对NMDA诱发[Ca2+]变化的作用,Anti-CNTFRα及PTPi-2对该作用的影响。根据实验结果得出主要结论如下:1.活细胞连续照相结果显示,CNTF具有细胞保护作用,Anti-CNTFRα可以阻断CNTF的保护作用,但PTPi-2不能阻断CNTF的保护作用。2.全细胞膜片钳结果显示,CNTF对海马神经元兴奋性无显著影响,但对NMDA诱发电流有快速抑制作用。Anti-CNTFRα可以阻断CNTF的抑制作用,但PTPi-2不能阻断CNTF的抑制作用。3.细胞内游离钙离子浓度测定结果显示,CNTF对NMDA诱发细胞内游离钙离子浓度升高有快速抑制作用,Anti-CNTFRα可以阻断CNTF的抑制作用,但PTPi-2不能阻断CNTF的抑制作用。综上所述,通过研究Anti-CNTFRα和JAK/STAT通路阻断剂PTPi-2对CNTF快速作用的影响,可推测CNTFR、NMDAR和钙离子参与了CNTF快速通路的构成,而JAK/STAT通路不参与CNTF快速通路的构成。
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全文目录
摘要 6-7 Abstract 7-9 缩写词汇表 9-11 第一章 前言 11-17 一、CNTF及其传统的基因组信号通路 11-13 二、CNTF快速通路的前期研究 13-14 三、NMDA受体及其作用 14-15 四、本课题研究目的与内容 15-17 (一) 研究目的 16 (二) 研究内容 16-17 第二章 材料与方法 17-24 一、主要仪器与试剂 17-19 (一) 实验仪器 17-18 (二) 主要试剂 18-19 (三) 试剂配制 19 二、海马神经元原代培养 19-20 三、活细胞连续照相 20 四、全细胞膜片钳记录方法 20-22 五、共聚焦显微镜细胞内游离钙离子测定方法 22-23 六、实验分组 23 七、数据处理及统计分析 23-24 第三章 实验结果 24-34 一、活细胞连续照相观察结果 24-26 二、CNTF对海马神经元兴奋性的影响 26-27 三、NMDA电流的一般特性 27-28 四、CNTF对NMDA诱发电流的快速抑制作用 28-29 五、Anti-CNTFR α和PTPi-2对电流抑制作用的影响 29-32 六、活细胞内游离钙离子浓度测定结果 32-34 第四章 讨论 34-38 一、CNTF快速通路中CNTFR与JAK/STAT的作用 34-35 二、CNTF快速通路中NMDAR的作用 35-36 三、CNTF快速通路中钙离子的作用 36-38 第五章 结论 38-39 参考文献 39-45 综述 45-60 神经营养因子的临床应用前景 45-60 附录 60-75 Protective action of an unknown CNTF quick signal transduction pathwayonhippocampal neurons 60-75 论文和科研工作 75-76 致谢 76
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中图分类: > 医药、卫生 > 神经病学与精神病学 > 神经病学
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