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CNTF快速通路中主要构成单元的探索

作 者: 程祺
导 师: 严进;孙继虎;倪鑫;杨勇骥
学 校: 第二军医大学
专 业: 应用心理学
关键词: 睫状神经营养因子 海马神经元 N-甲基-D-天冬氨酸 睫状神经营养因子受体α亚基抗体 酪氨酸磷酸酶抑制蛋白2 Janus激酶信号转导及转录活化蛋白 全细胞膜片钳 细胞内游离钙离子
分类号: R741
类 型: 硕士论文
年 份: 2008年
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内容摘要


前期研究发现CNTF具有保护海马神经元应激性损伤的快速作用,但其快速通路的构成尚不清楚。为了探索CNTF快速通路中主要构成单元,本研究以NMDA诱发海马神经元损伤模型,运用活细胞连续照相、全细胞膜片钳细胞内游离钙离子浓度测定等方法,观察CNTF对海马神经元的快速保护作用及Anti-CNTFRα和JAK/STAT通路阻断剂PTPi-2对快速保护作用的影响。主要研究方法:1、用活细胞连续照相的方法观察CNTF的细胞保护作用,Anti-CNTFRα及PTPi-2对保护作用的影响。2、用全细胞膜片钳的方法观察CNTF对海马神经元兴奋性的影响。3、用全细胞膜片钳的方法观察CNTF对NMDA诱发INMDA的作用,Anti-CNTFRα及PTPi-2对该作用的影响。4、用共聚焦显微镜细胞内游离钙离子测定的方法观察CNTF对NMDA诱发[Ca2+]变化的作用,Anti-CNTFRα及PTPi-2对该作用的影响。根据实验结果得出主要结论如下:1.活细胞连续照相结果显示,CNTF具有细胞保护作用,Anti-CNTFRα可以阻断CNTF的保护作用,但PTPi-2不能阻断CNTF的保护作用。2.全细胞膜片钳结果显示,CNTF对海马神经元兴奋性无显著影响,但对NMDA诱发电流有快速抑制作用。Anti-CNTFRα可以阻断CNTF的抑制作用,但PTPi-2不能阻断CNTF的抑制作用。3.细胞内游离钙离子浓度测定结果显示,CNTF对NMDA诱发细胞内游离钙离子浓度升高有快速抑制作用,Anti-CNTFRα可以阻断CNTF的抑制作用,但PTPi-2不能阻断CNTF的抑制作用。综上所述,通过研究Anti-CNTFRα和JAK/STAT通路阻断剂PTPi-2对CNTF快速作用的影响,可推测CNTFR、NMDAR和钙离子参与了CNTF快速通路的构成,而JAK/STAT通路不参与CNTF快速通路的构成。

全文目录


摘要  6-7
Abstract  7-9
缩写词汇表  9-11
第一章 前言  11-17
  一、CNTF及其传统的基因组信号通路  11-13
  二、CNTF快速通路的前期研究  13-14
  三、NMDA受体及其作用  14-15
  四、本课题研究目的与内容  15-17
    (一) 研究目的  16
    (二) 研究内容  16-17
第二章 材料与方法  17-24
  一、主要仪器与试剂  17-19
    (一) 实验仪器  17-18
    (二) 主要试剂  18-19
    (三) 试剂配制  19
  二、海马神经元原代培养  19-20
  三、活细胞连续照相  20
  四、全细胞膜片钳记录方法  20-22
  五、共聚焦显微镜细胞内游离钙离子测定方法  22-23
  六、实验分组  23
  七、数据处理及统计分析  23-24
第三章 实验结果  24-34
  一、活细胞连续照相观察结果  24-26
  二、CNTF对海马神经元兴奋性的影响  26-27
  三、NMDA电流的一般特性  27-28
  四、CNTF对NMDA诱发电流的快速抑制作用  28-29
  五、Anti-CNTFR α和PTPi-2对电流抑制作用的影响  29-32
  六、活细胞内游离钙离子浓度测定结果  32-34
第四章 讨论  34-38
  一、CNTF快速通路中CNTFR与JAK/STAT的作用  34-35
  二、CNTF快速通路中NMDAR的作用  35-36
  三、CNTF快速通路中钙离子的作用  36-38
第五章 结论  38-39
参考文献  39-45
综述  45-60
  神经营养因子的临床应用前景  45-60
附录  60-75
  Protective action of an unknown CNTF quick signal transduction pathwayonhippocampal neurons  60-75
论文和科研工作  75-76
致谢  76

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中图分类: > 医药、卫生 > 神经病学与精神病学 > 神经病学
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