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Hhcy对大鼠周围神经结构和功能的影响

作　者: 于伟
导　师: 张哲成
学　校: 天津医科大学
专　业: 神经病学
关键词: 高同型半胱氨酸血症 大鼠 周围神经 髓鞘碱性蛋白 神经丝蛋白 神经传导速度 氧化应激
分类号: R587.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2008年
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内容摘要


目的:高同型半胱氨酸血症(hyperhomocysteinemia,Hhcy)可能为糖尿病周围神经病变(diabetic peripheral neuropathy,DPN)的一个独立危险因素,并与多种神经系统疾病相关。目前尚未有关于Hhcy导致周围神经病变的报道。本实验通过研究Hhcy对大鼠周围神经结构和功能的损害作用及氧化应激反应的影响,探讨Hhcy与周围神经病变的关系。方法:将20只雄性SD大鼠按体重随机分为Hhcy模型组(H组,1.5%高蛋氨酸饮食诱发)和正常对照组(C组)。采用高效液相色谱荧光检测法(Highperformance liquid chromatographv,HPLC)检测第0、4、8、12、16、20、24周血浆总同型半胱氨酸(total homocysteine,tHcy)水平。实验进行至24周,对大鼠腓肠神经行Luxol fast blue染色,计数单位面积有髓神经纤维密度、有髓神经纤维平均截面积、有髓神经纤维平均髓鞘及轴突面积;免疫组织化学方法检测大鼠腓肠神经髓鞘碱性蛋白(MBP)、神经丝蛋白(NF)的表达;电镜观察腓肠神经超微结构;进行摆尾实验,测定大鼠热痛阈摆尾反应潜伏期;应用肌电图仪检测大鼠尾神经运动和感觉传导速度(MCV、SCV)及动作电位(CMAP、SNAP)波幅;测定血清SOD活力、MDA含量、NO含量。结果:1.不同时期两组大鼠血浆tHcy水平变化:第4周H组大鼠血浆tHcy水平(19.93±5.20μmol/L)较0周时(9.33±2.17μmol/L)升高,并高于同时期C组大鼠(9.26±1.58μmol/L),其差异有统计学意义(均P＜0.05),Hhcy大鼠模型建立成功。H组大鼠在第8、12、16、20、24周时血浆tHcy水平(21.80±4.00μmol/L,22.77±3.12μmol/L,27.82±5.24μmol/L,31.89±5.65μmol/L,30.64±4.35μmol/L)仍高于同时期C组(9.05±1.91μmol/L,9.10±2.26μmol/L,9.00±1.38μmol/L,9.25±1.56μmol/L,9.60±2.08μmol/L),为同时期C组大鼠血浆tHcy水平均值的2～3倍,其差异有统计学意义(均P＜0.05)。2.两组大鼠腓肠神经形态学测定结果:第24周H组大鼠单位面积(mm~2)腓肠神经有髓神经纤维密度(15790±1431个/mm~2)较C组(16802±1620个个/mm~2)减低(P＜0.05),有髓神经纤维平均截面积及平均髓鞘、轴突面积(21.42±2.09μm~2,11.67±1.89μm~2,9.31±2.19μm~2)均较C组(26.35±1.75μm~2,14.64±1.62mm~2,12.81±4.19μm~2)减少,其差异有统计学意义(均P＜0.05)。3.两组大鼠腓肠神经MBP、NF表达的比较:H组大鼠腓肠神经MBP、NF积分光密度(18421.85±2701.73,12644.54±2195.60)均较C组(24960.93±3081.83,16401.39±2065.12)减低,其差异有统计学意义(均P＜0.05)。4.两组大鼠腓肠神经超微结构的比较:电镜结果显示C组大鼠腓肠神经髓鞘板层结构清晰,轴突呈现清晰的神经微丝、微管以及线粒体等细胞器;有髓神经纤维每一个均被一个完整的雪旺细胞(Schwall cell,SC)包绕,可见部分无髓神经纤维。H组大鼠腓肠神经出现有髓神经纤维脱失、节段性髓鞘、轴突变性、间质水肿等改变。无髓纤维内见异常凝集物及水肿。雪旺氏细胞基膜局部有溶解,细胞器模糊。C组大鼠未见神经微血管内皮细胞病理改变及红细胞淤积。H组大鼠神经微血管基膜不连续,出现间隙、水肿,局部有溶解;内皮细胞水肿,异染色质趋边、凝集;部分管腔堵塞,血管内有红细胞边集。5.两组大鼠尾神经传导检测及摆尾实验结果:H组大鼠尾神经MCV(17.28±1.89m/s)、SCV(30.69±3.22 m/s)均较C组(21.59±2.52m/s,40.20±3.15m/s)减慢,CMAP、SNAP波幅(0.30±0.10mv,4.89±2.00μv)均较C组(0.50±0.17mv,7.81±2.73μv)减低,其差异有统计学意义(均P＜0.05)。H组大鼠热痛阈摆尾反应潜伏期(9.10±1.20s)较C组(6.50±2.07s)明显延长,其差异有统计学意义(P＜0.05)。6.两组大鼠血清SOD、MDA、NO水平的比较:H组大鼠血清MDA含量(7.50±1.72nmol/L)高于C组(4.08±0.45nmol/L),H组大鼠血清SOD活力(214.21±11.52U/ml)、NO含量(23.59±4.23μmol/L)均低于C组(310.30±22.48U/ml,29.40±2.01μmol/L),其差异有统计学意义(均P＜0.05)。结论:通过高蛋氨酸饮食可以诱发大鼠Hhcy。Hhcy大鼠腓肠神经纤维髓鞘和轴索结构均有损伤。Hhcy可引起大鼠尾神经MCV、SCV减慢,CMAP、SNAP波幅减低,对热痛觉迟钝,影响了周围神经传导功能,病变累及有髓神经纤维和无髓神经纤维、运动和感觉神经纤维、神经髓鞘和轴索。Hhcy大鼠体内氧自由基生成增多,氧化应激水平增高,周围神经结构与功能的损害可能与氧化应激有关。

全文目录


中文摘要  4-6
Abstract  6-9
符号说明  9-10
前言  10-12
  研究现状、成果  10-11
  研究目的、方法  11-12
第一部分 HHcy大鼠模型的建立  12-18
  对象与方法  12-14
  结果  14-15
  讨论  15-18
第二部分 Hhcy对大鼠周围神经形态学及超微结构的影响  18-28
  对象与方法  18-20
  结果  20-26
  讨论  26-28
第三部分 Hhcy对大鼠周围神经传导功能的影响  28-34
  对象与方法  28-31
  结果  31
  讨论  31-34
第四部分 Hhcy对大鼠氧化应激反应的影响  34-39
  对象与方法  34-36
  结果  36
  讨论  36-39
小结  39-40
结论  40-41
参考文献  41-45
发表论文和参加科研情况说明  45-46
综述  46-55
  综述正文  46-53
  综述参考文献  53-55
致谢  55

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中图分类: > 医药、卫生 > 内科学 > 内分泌腺疾病及代谢病 > 胰岛疾病 > 糖尿病性昏迷及其他并发症
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