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桑黄菌固体和液体培养基优化及人工栽培研究

作　者: 吕英华
导　师: 宋新华
学　校: 西北农林科技大学
专　业: 特种经济动物饲养
关键词: 桑黄培养基正交设计人工培养
分类号: S646.9
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

目的:研究野生桑黄菌(Phellinus spp.)菌种分离技术;桑黄菌(Phellinus linteus)母种、原种、栽培种的菌种制作及培养,适合桑黄菌母种培养的固体培养基的选择和优化;桑黄菌菌丝体液体发酵培养基和发酵培养条件优化;人工栽培技术出菇管理条件。方法:通过子实体组织分离法获得野生桑黄菌母种;以Phellinus linteus Gy~20为代表菌株,通过L9(34)正交试验设计分别优化了桑黄菌固体培养基和液体发酵培养基配方;同时研究摇床转速、温度、接种量、装液量、pH及发酵时间对桑黄菌液体发酵培养的影响;制作原种和栽培种,通过栽培试验,从温度、湿度、光照、通风四方面总结桑黄菌人工栽培技术出菇管理要点。结果:1、本研究共成功分离出11株桑黄菌母种。其中,9株经本实验室鉴定:5株为裂蹄木层孔菌(Phellinus linteus),4株为鲍姆氏层孔菌(Phellinus baumii),其它2株待鉴定。2、玉米粉综合培养基最适合桑黄菌母种培养,优化固体培养基配方为:葡萄糖、玉米粉、蛋白胨、MgSO4、KH2PO4、琼脂。几种重要组分的质量浓度分别为20 g·L-1、20 g·L-1、1 g·L-1、0.5 g·L-1、2 g·L-1、20 g·L-1。3、桑黄菌(100 mL三角瓶)优化液体培养基配方为:葡萄糖、玉米粉、蛋白胨、麸皮、MgSO4、KH2PO4。几种重要组分的质量浓度分别为:15 g·L-1、25 g·L-1、0.5 g·L-1、5 g·L-1、0.5 g·L-1、2 g·L-1;优化培养条件为:温度28℃、装液量75 mL、接种量10%、初始pH 6.0、摇瓶转速190 r/min,发酵时间13 d。4、桑黄菌人工栽培技术出菇管理条件:发菌阶段,菌丝培养温度25℃;培养料含水量60%～70%;培养时间35 d～40 d;通风1次/d,不需要光照,暗室培养。菇蕾形成原基阶段,分化温度20℃～25℃;相对湿度80%～95%;时间14 d～21 d;通风2次/d;散射光照射。子实体发育(长菇)阶段,生长温度18℃～25℃;相对湿度90%～95%;时间30 d～40 d,通风2次/d;散射光照射。

全文目录

摘要  5-6
ABSTRACT  6-11
第一章药用真菌桑黄的研究进展  11-19
  1.1 桑黄菌的分类学地位  11-12
  1.2 桑黄菌的形态学特征及地理分布  12-13
  1.3 桑黄菌的人工培养  13-14
    1.3.1 固体培养  14
    1.3.2 液体发酵培养  14
    1.3.3 人工栽培技术  14
    1.3.4 分子育种  14
  1.4 桑黄菌的药理活性物质组成及检测  14-15
    1.4.1 子实体多糖  14-15
    1.4.2 胞内多糖  15
    1.4.3 胞外多糖  15
  1.5 桑黄菌的药理活性成分提取与分离纯化  15-16
    1.5.1 子实体多糖的提取  15
    1.5.2 胞内多糖的提取  15
    1.5.3 胞外多糖的提取  15
    1.5.4 桑黄多糖的纯化  15-16
  1.6 桑黄菌的药理作用  16-17
    1.6.1 抗癌  16
    1.6.2 保肝护肝  16
    1.6.3 抗血管生成作用  16
    1.6.4 降血糖  16-17
    1.6.5 抑菌消炎  17
    1.6.6 其它作用  17
  1.7 桑黄菌研究与开发中存在的问题及研究工作展望  17-19
第二章桑黄菌菌种分离及固体培养研究  19-26
  2.1 试验材料与方法  19-20
    2.1.1 试验材料  19
    2.1.2 试验仪器  19-20
  2.2 试验方法  20-22
    2.2.1 菌种的分离及纯化培养  20-21
    2.2.2 基础培养基的选择  21
    2.2.3 碳源和氮源的筛选  21
    2.2.4 正交试验设计优化固体培养基  21-22
  2.3 结果与分析  22-25
    2.3.1 不同基础培养基上桑黄菌菌株的生长情况  22-23
    2.3.2 不同碳氮源对桑黄菌菌株菌丝体生长的影响  23-24
    2.3.3 桑黄菌菌株菌丝体固体培养基的优化配方  24-25
  2.4 讨论  25
  2.5 结论  25-26
第三章桑黄菌液体培养基优化及发酵条件研究  26-41
  3.1 试验材料和仪器  26-27
    3.1.1 试验材料  26
    3.1.2 试验仪器  26-27
  3.2 试验方法  27-29
    3.2.1 一级摇瓶种子培养  27
    3.2.2 二级摇瓶发酵培养  27
    3.2.3 测量指标  27
    3.2.4 培养基成分对桑黄菌液体发酵培养的影响  27-28
    3.2.5 培养条件对桑黄菌液体发酵培养的影响  28-29
  3.3 结果与分析  29-38
    3.3.1 培养基成分对桑黄菌液体发酵培养的影响  29-32
    3.3.2 培养条件对桑黄菌液体发酵的影响  32-38
  3.4 讨论  38-40
  3.5 结论  40-41
第四章桑黄菌人工栽培技术研究  41-46
  4.1 试验材料和仪器  41-42
    4.1.1 试验材料  41
    4.1.2 试验仪器  41-42
  4.2 试验方法  42-43
    4.2.1 原种培养  42
    4.2.2 栽培种培养  42
    4.2.3 出菇管理  42-43
  4.3 结果与分析  43-44
    4.3.1 发菌期管理  43
    4.3.2 原基分化期管理  43
    4.3.3 子实体发育期管理  43-44
  4.4 讨论  44-45
  4.5 结论  45-46
结论  46-47
参考文献  47-50
致谢  50-51
作者简介  51

桑黄菌固体和液体培养基优化及人工栽培研究

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