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磷脂酶A1催化水解大豆油法制备甘油二酯及其固定化研究
作 者: 宋坷珂
导 师: 唐书泽;汪勇
学 校: 暨南大学
专 业: 粮食、油脂与植物蛋白工程
关键词: 磷脂酶A1 大豆油 甘油二酯 分子蒸馏 固定化
分类号: TQ645
类 型: 硕士论文
年 份: 2010年
下 载: 141次
引 用: 1次
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内容摘要
本文利用磷脂酶A1催化水解大豆油的方法,对水解后的产物采用两步分子蒸馏法来制备富含甘油二酯的功能性油脂。并对磷脂酶A1的固定化作了初步探讨。该酶催化的最适pH值为6.8,在pH 4-8之间具有良好的稳定性;最适温度40℃,在低于45℃时具有良好的稳定性;当用0.1%的氯化钙水溶液作为水解反应物时,和蒸馏水相比,钙离子对于维持磷脂酶A1多次循环利用的残余活力有促进作用。水解反应残余活力的磷脂酶A1再加上50%的新添加酶,表现出很强的催化水解活力,酶回收使用6次时,残余酶活力仍然有初次使用活力的86.88%。用分子蒸馏和柱层析的方法制备了大豆油甘油二酯(DAG)的标准样品,通过高效液相-电喷雾质谱联用(HPLC-ESI-MS)和薄层色谱法(TLC)验证了标准样品的纯度。用反相高效液相色谱(RP-HPLC)在UV=210 nm做了大豆油DAG的标准曲线,在浓度范围1.0-12.0 mg/mL,大豆油DAG标准曲线线性良好。通过加样回收试验表明,加样回收率在104-109%之间,RSD在0.69-5.19%之间。并用该方法分析了大豆油、分子蒸馏DAG样品中的DAG含量。采用明胶包埋、戊二醛交联双重固定法固定磷脂酶A1后,固定化酶的稳定催化水解效率为等量液态酶催化水解效率的30%左右;采用硅藻土吸附法来固定磷脂酶A1,固定化酶的稳定催化水解效率仅为等量液态酶水解效率的33%左右;通过对六种型号大孔吸附树脂的吸附能力进行筛选后,选取D113型的树脂作为后续深入研究固定化酶的载体材料。
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全文目录
摘要 4-5 Abstract 5-6 目录 6-7 1 绪论 7-28 1.1 甘油二酯一般特征、代谢过程 7-9 1.2 甘油二酯的功效 9-13 1.3 甘油二酯的安全性 13-14 1.4 甘油二酯的制备与纯化方法 14-18 1.5 甘油二酯的分析检测 18-19 1.6 甘油二酯的应用 19-23 1.7 甘油二酯的研究进展 23-24 1.8 磷脂酶A1与大豆油 24-27 1.9 选题依据及主要研究内容、创新点及科学意义 27-28 2 磷脂酶A1水解条件优化 28-38 2.1 材料与方法 29-32 2.2 结果与分析 32-37 2.3 小结 37-38 3 甘油二酯的纯化、分析及检测 38-50 3.1 材料与方法 39-43 3.2 结果与分析 43-49 3.3 小结 49-50 4 磷脂酶A1的固定化 50-62 4.1 材料与方法 52-55 4.2 结果与分析 55-61 4.3 小结 61-62 5 讨论 62-64 5.1 甘油二酯的制备方法 62 5.2 分子蒸馏法纯化甘油二酯 62-63 5.3 磷脂酶A1的固定化 63-64 6 结论与展望 64-65 6.1 结论 64 6.2 展望 64-65 参考文献 65-72 硕士期间发表论文清单、作者及导师简介 72-73 致谢 73
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中图分类: > 工业技术 > 化学工业 > 油脂和蜡的化学加工工业、肥皂工业 > 油脂工业产品及副产品
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