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工频磁场对中国仓鼠肺成纤维细胞F-actin细胞骨架及其相关信号分子的影响

作　者: 赵晋
导　师: 曾群力
学　校: 浙江大学
专　业: 劳动卫生与环境卫生学
关键词: 极低频磁场中国仓鼠肺成纤维细胞 F-actin细胞骨架
分类号: R35
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
下　载: 48次
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内容摘要

随着电力事业的发展,极低频磁场(extremely low frequency magnetic fields, ELF MF)对生物体的可能影响及其可能致癌性受到广泛关注,国际癌症研究组织(IARC)于2001年将其定义为人类可疑致癌源。但对ELF MF的流行病学研究结论并不一致,ELF MF与肿瘤的关系还需要体内外实验证据的支持。肿瘤发生发展是一个复杂的多阶段过程,其中包括浸润和迁入周围组织、血管新生、淋巴细胞的迁移运输等生理活动,这些过程都需要细胞增殖和迁移的参与。而微丝细胞骨架的重组和循环运动则为其提供了动力和物质基础。已经发现,在多种肿瘤细胞中,肌动蛋白微丝被大量修饰或出现过表达现象,并发现与微丝功能相关的一些重要的信号分子活性或协同表达的上调等与肿瘤的发生和转移密切相关。本研究选择在肿瘤发生发展中与细胞增殖、迁移、信号转导均有密切关系的微丝为主要研究对象。首先采用免疫荧光法,使用罗丹明标记的鬼笔环肽(TRITC-Phalloidin)与纤维化肌动蛋白(F-actin)特异性结合,观察不同强度和时间工频磁场辐照对中国仓鼠肺成纤维细胞(Chinese Hamster Lung, CHL)细胞F-actin的影响；第二,扫描电子显微镜(SEM)观察工频磁场辐照对CHL细胞表面形态的影响；第三,采用划痕实验和MTT法观察与肌动蛋白(actin)相关的细胞迁移和增殖的变化；第四,通过免疫印迹法对其可能的信号通路机制进行初步探索。结果显示50 Hz不同强度工频磁场暴露不同时间可以诱导CHL细胞出现不同程度的F-actin骨架重组和边缘化现象,同时导致细胞周围伪足增多,形态扁平。0.4 mT，24 h暴露可显著增加细胞迁移速率,但本实验条件下ELF MF并不能引起PI3K和磷酸化Akt蛋白表达的显著变化。

全文目录

致谢  4-5
中文摘要  5-7
英文摘要  7-9
缩略语  9-10
目次  10-12
1 引言  12-15
2 实验仪器及材料  15-22
  2.1 仪器设备和耗材  15-16
  2.2 试剂  16-17
  2.3 细胞及其培养液  17
  2.4 免疫荧光相关试剂配制  17-19
  2.5 扫描电子显微镜相关试剂配制  19
  2.6 免疫印迹实验相关试剂配制  19-22
3 实验方法  22-26
  3.1 细胞培养  22
  3.2 分组与处理  22-23
  3.3 sXc-ELF工频磁场辐照系统  23
  3.4 免疫荧光法观察磁场对细胞F-actin细胞骨架的影响  23-24
  3.5 扫描电子显微镜观察磁场对CHL细胞形态的变化  24
  3.6 划痕实验观察磁场对CHL细胞迁移的影响  24
  3.7 MTT法检测磁场对CHL细胞增殖的影响  24
  3.8 免疫印迹实验检测磁场对CHL细胞PI3K、pAkt表达的影响  24-26
4 实验结果  26-34
  4.1 50Hz,0.2、0.4 mT工频磁场辐照不同时间对CHL细胞F-actin骨架的影响 #15■  26-29
  4.2 50Hz,0.2、0.4 mT工频磁场辐照不同时间对CHL细胞表面形态的影响  29-31
  4.3 50Hz,0.4 mT工频磁场辐照不同时间对CHL细胞迁移的影响  31-32
  4.4 50Hz,0.4 mT工频磁场辐照不同时间对CHL细胞增殖的影响  32
  4.5 50Hz,0.4 mT工频磁场对CHL细胞PI3K蛋白的影响  32-34
5 讨论  34-36
6 结论  36-37
参考文献  37-41
综述  41-47
作者简历及在读期间所取得的科研成果  47

工频磁场对中国仓鼠肺成纤维细胞F-actin细胞骨架及其相关信号分子的影响

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