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非霍奇金淋巴瘤患者sVEGF、sbFGF水平变化及姜黄素对Raji细胞株VEGF表达影响的研究

作　者: 朱红波
导　师: 周丽
学　校: 泰山医学院
专　业: 内科学
关键词: 非霍奇金淋巴瘤 血管内皮生长因子 碱性成纤维细胞生长因子 姜黄素 Raji细胞株
分类号: R733.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要


目的研究非霍奇金淋巴瘤(non Hodgkin lymphoma,NHL)患者血清血管内皮生长因子(serum vascular endothelial growth factor,sVEGF)及血清碱性成纤维细胞生长因子(serum basic fibroblast growth factor,sbFGF)水平与临床特征的关系;探讨抗血管生成药物姜黄素对人非霍奇金淋巴瘤Raji细胞增殖及VEGF表达的影响,为临床抗血管新生治疗提供理论依据。方法ELISA法检测不同病期NHL患者sVEGF、sbFGF水平,并收集临床资料,进行统计分析;ELISA法检测姜黄素对Raji细胞上清中VEGF含量变化的影响;不同浓度姜黄素(5umol/L、10umol/L、25umol/L、50umol/L)作用于Raji细胞24h、48h、72h后,WST-1法检测姜黄素对细胞增殖的影响;倒置相差显微镜下观察Raji细胞形态及生长情况;Annexin-V/PI双标流式细胞术检测Raji细胞凋亡率。结果1. NHL患者sVEGF水平(1)NHL初治化疗前36例,其sVEGF浓度为(443.59±203.48)pg/ml;正常对照组19例,其sVEGF浓度为(90.50±21.42)pg/ml,两组间差异有统计学意义(P<0.01)。(2)化疗后完全缓解(complete remission,CR)者17例,其sVEGF浓度为(96.34±38.84)pg/ml;部分缓解(partial remission,PR)者11例,其sVEGF浓度为(109.54±46.37)pg/ml;复发进展(palindromia,PD)者8例,其sVEGF浓度为(553.96±250.08)pg/ml,初治化疗前sVEGF明显高于CR者(P<0.01)、也高于PR者(P<0.05);PD者sVEGF比初治化疗前稍高,但差异无统计学意义(P=0.526>0.05)。(3)第一疗程达CR者9例,其化疗前sVEGF浓度为(152.11±57.98)pg/ml;未达CR者27例,其化疗前sVEGF浓度为(540.75±124.45)pg/ml,差异有统计学意义(P<0.05)。(4)比较36例初治化疗前sVEGF与多个临床相关因素的关系,结果显示Ⅲ～Ⅳ期患者sVEGF水平高于Ⅰ～Ⅱ期者(P<0.05);高中危～高危组sVEGF水平高于低危～低中危组(P<0.05);LDH升高者sVEGF水平明显高于LDH正常者(P<0.05);β2-Mg升高者sVEGF水平明显高于β2-Mg正常者(P<0.05);而sVEGF水平与性别、年龄、全身症状及结外病变数目均无显著相关性(P均>0.05)。2. NHL患者sbFGF水平(1)NHL初治化疗前36例,其sbFGF浓度为(314.47±132.01)pg/ml;正常对照组19例,其sbFGF浓度为(78.55±36.35)pg/ml,两组间差异有统计学意义(P<0.05)。(2)化疗后CR者17例,其sbFGF浓度为(82.28±34.85)pg/ml;PR者11例,其sbFGF浓度为(126.21±61.02)pg/ml;PD者8例,其sbFGF浓度为(338.40±161.12)pg/ml。初治者sbFGF浓度明显高于CR、PR者(P均<0.05);PD者sbFGF浓度比初治化疗前稍高,但差异无统计学意义(P=0.246>0.05)。(3)第一疗程达CR者9例,其化疗前sbFGF浓度为(151.14±35.09)pg/ml;未能达CR者27例,其化疗前sbFGF浓度为(346.39±121.40)pg/ml,差异有统计学意义(P<0.05)。(4)比较36例初治患者sbFGF与多个临床相关因素的关系,结果显示Ⅲ～Ⅳ期患者sbFGF水平高于Ⅰ～Ⅱ期者(P<0.05);高中危～高危组sbFGF水平高于低危～低中危组(P<0.05);LDH升高者sbFGF水平明显高于LDH正常者(P<0.05);β2-Mg升高者sbFGF水平明显高于β2-Mg正常者(P<0.05);而sbFGF水平与性别、年龄、全身症状及结外病变数目均无显著相关性(P均>0.05)。3. sVEGF与sbFGF的相关性pearson相关分析表明sVEGF与sbFGF具有显著正相关性(r=0.548,P<0.05)。4.姜黄素对Raji细胞上清VEGF含量的影响ELISA法检测10、25umol/L姜黄素对Raji细胞作用24h后上清液中VEGF含量的变化,结果显示,对照组上清液中VEGF浓度为(707.92±55.92)pg/ml;而10、25umol/L姜黄素处理组细胞上清液中VEGF浓度分别为(369.73±14.22)pg/ml、(178.24±21.18)pg/ml,与对照组相比两者均显著性降低(P均<0.05)。5.姜黄素处理Raji细胞后WST-1法检测结果5umol/L姜黄素对Raji细胞无明显抑制作用;10μmol/L、25μmol/L、50μmol/L姜黄素对Raji细胞增殖有显著抑制作用,呈浓度和时间依赖性。6.姜黄素处理Raji细胞后形态变化倒置相差显微镜下可见Raji细胞由成团生长变为单个散在,细胞数明显减少,细胞体积变小,折光性减弱,有的细胞膜破裂,可见细胞碎片。7.姜黄素对Raji细胞凋亡的影响流式细胞仪检测浓度为10、25umol/L姜黄素对Raji细胞凋亡的影响,结果示随着姜黄素作用浓度及时间增加,细胞凋亡率随之增加。作用24h,Raji细胞凋亡率分别为11.12%、25.07%;作用48h,凋亡率分别为14.74%、33.50%;作用72h,凋亡率分别为25.11%、55.98%,均高于对照组1.75%、2.25%、2.77%的凋亡率(P均<0.01)。结论1. NHL患者sVEGF、sbFGF水平显著高于正常对照,并与临床分期、IPI预后分组、LDH及β2-Mg有关。提示NHL的发病与血管新生有关,且可联合其他指标一起作为病情监测、预后评估的指标。2.姜黄素能够抑制Raji细胞分泌VEGF,其抑制作用存在浓度依赖性。提示姜黄素具有抑制血管新生的作用,通过其作用达到抗NHL的目的,且为其他抗血管新生药物应用于NHL治疗提供参考。3.姜黄素在一定浓度范围内可以明显抑制Raji细胞增殖,诱导Raji细胞凋亡,并呈浓度和时间依赖性。说明抑制血管新生有可能达到诱导Raji细胞凋亡的作用。

全文目录


中文摘要  4-7
英文摘要  7-10
符号说明  10-11
前言  11-13
第一部分 非霍奇金淋巴瘤患者血清VEGF、bFGF 水平变化及临床意义  13-27
  材料与方法  14-17
  结果  17-24
  讨论  24-26
  结论  26-27
第二部分 姜黄素对人非霍奇金淋巴瘤细胞Raji 增殖及VEGF 表达的影响  27-43
  材料与方法  28-33
  结果  33-40
  讨论  40-42
  结论  42-43
附图  43-46
参考文献  46-49
综述  49-57
致谢  57-58
攻读学位期间发表的学术论文  58

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 造血器及淋巴系肿瘤 > 网状内皮系统肿瘤
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