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壳聚糖制备、质量控制及纳米粒负载胰岛素性能研究

作　者: 邬思辉
导　师: 苏政权
学　校: 广东药学院
专　业: 药剂学
关键词: 长毛对虾壳聚糖制备工艺资源化利用脱乙酰度分子量碱量法指示剂壳聚糖纳米粒胰岛素 Bradford法
分类号: R914
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要

壳聚糖被学术界誉为继蛋白质、脂肪、糖类、维生素和无机盐之后第六生命元素,具有无毒、无刺激性、无致敏性和无致突变作用,具有良好生物相容性和生物降解性的多聚阳离子,在药剂学领域的应用极为活跃,是天然的阳离子型给药载体。壳聚糖作为药物载体可以控制药物释放、延长药物疗效、降低药物毒副作用,可以提高疏水性药物对细胞膜的通透性和药物稳定性及改变给药途径,还可以加强制剂的靶向给药能力。本课题主要涉及对长毛对虾虾壳甲壳素和壳聚糖的制备、资源化利用进行研究、建立壳聚糖分子量和脱乙酰度质量控制和检测方法、制备不同脱乙酰度及不同分子量壳聚糖,壳聚糖纳米粒和水溶性壳聚糖纳米粒的制备及其负载胰岛素性能研究等工作,为开发一种新型的口服胰岛素制剂奠定基础。本研究以粤东长毛对虾虾壳为原料,采取了比较简易的工艺制备壳聚糖,并对制备过程中的废水中的有用成分进行回收利用,从中回收粗脂肪、蛋白质、碳酸钙,并将过程中的碱液进行重复利用,降低了生产成本,达到资源化利用的目的。脱脂肪后的废水化学耗氧量(COD)值比未脱脂肪的废水COD值降低19%左右,本工艺既可回收粗脂肪,且可降低废水的COD,减轻污染程度,最后对废水进行了初步处理,使其COD指标达到了国家污水综合排放标准的三级标准。探讨以高脱乙酰度高分子量壳聚糖为原料,通过氧化降解制得低分子量、水溶性壳聚糖,对各实验条件进行单因素考察,采用正交实验设计研究制备低分子量壳聚糖的最佳实验条件,在优化实验条件下制备一系列不同分子量壳聚糖。另探讨以低脱乙酰度壳聚糖为原料,通过单因素考察和正交实验结果确定制备高脱乙酰度壳聚糖的最佳实验条件,在优化实验条件下制备一系列不同高脱乙酰度壳聚糖。碱量法是水产行业测定壳聚糖脱乙酰度的标准方法,应用广泛。该方法采用甲基橙-苯胺蓝指示剂,在测定低脱乙酰度壳聚糖终点时颜色变化不明显,重现性差,误差较大;且苯胺蓝有毒,易造成环境污染和人体危害。研究了用于碱量法测定的不同种类指示剂,结果表明甲基橙-亚甲基蓝(1:1)混合指示剂终点颜色变化明显,准确性和重现性好,可以作为测定壳聚糖不同脱乙酰度的通用指示剂,解决了目前碱量法存在的通用性和毒害问题。为了研究壳聚糖负载药物的优越性,本研究分别对壳聚糖纳米粒和水溶性壳聚糖纳米粒的制备工艺、负载胰岛素的影响因素、评价指标及体外释药性能进行研究。结果表明壳聚糖胰岛素纳米粒的包封率和载药量分别为66.31±1.79%和10.31±1.52%,纳米粒的平均粒径为292nm。水溶性壳聚糖胰岛素纳米粒的包封率和载药量分别为48.28±0.90%和9.52±1.34%,纳米粒的平均粒径为153nm。且对壳聚糖纳米粒负载胰岛素中胰岛素包封率和载药量的检测方法进行了深入研究,改善的Bradford法消除了壳聚糖及壳聚糖纳米粒上清液对胰岛素含量测定的干扰,并对方法学进行了考察。验证了该方法是一种简单快速、灵敏准确的检测壳聚糖纳米粒中胰岛素含量的方法。

壳聚糖制备、质量控制及纳米粒负载胰岛素性能研究

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